辅酶q辅酶q皂化提取法的研究进展

辅酶q辅酶q皂化提取法的研究进展

1肥皂法的提取法提取方法：q矩阵优。1.1提取工艺的制备醇碱皂化提取法的一般方法是:首先向菌体中加入质量分数为7%左右的焦性没食子酸,再缓慢加入1.3～1.5倍体积的氢氧化钠-乙醇溶液搅拌,再加入正己烷进行回流提取,迅速冷却至室温。然后用适量石油醚多次萃取,水洗至中性,再取水浓缩,真空浓缩旋转蒸发除去有机溶剂,最后用无水乙醇溶解。李聚海等醇碱皂化法中,由于在乙醇的存在下,长时间的皂化可能导致辅酶Q11.2生物处理法提取碱后制备工艺碱皂化提取法的一般方法是:首先向菌体中加入酸性水,水浴加热回流3h后,缓慢加入稀释一定倍数的氢氧化钠,再回流一段时间,迅速冷却至室温。然后加入用机溶剂浸提2～3次,取上清液水洗至中性,再取水浓缩,真空浓缩旋转蒸发除去有机溶剂,最后用无水乙醇溶解。邱卫东等碱皂化提取法与醇碱皂化提取法相比,虽然容易产生乳化现象,但利用碱皂化法提取辅酶Q1提取量高且生成的杂质少。2细胞破碎法细胞破碎提取法目前常用的有物理研磨法、化学溶解法等,但其破碎效果不是十分理想,提取率低且成本太高,因此,寻找高效的细胞破碎方法对于工业化生产具有十分重要的实际意义。常见的细胞破碎提取法主要有:有机溶剂搅拌破碎提取法、研磨破碎提取法、超声波破碎提取法。2.1提取溶剂、过滤液有机溶剂搅拌破碎提取法的一般方法是:首先在烧杯中加入湿菌体和丙酮,磁力搅拌器搅拌,离心后倒取上清液,然后使用旋转蒸发器50℃浓缩上清液,继而加入石油醚或正己烷萃取,再将萃取液用旋转蒸发器浓缩至浓稠液,最后加入无水乙醇,放人冰箱冷冻,析出胆固醇等杂质,过滤回收滤液。选择最佳的搅拌时间是有机溶剂搅拌破碎提取法的关键,搅拌时间过短,细胞没有充分破碎,细胞内的辅酶Q12.2氧化酶q的制备研磨破碎提取法的一般方法是:首先取湿菌体于研钵中,加入少量石英砂,丙酮和抗氧化剂迅速进行研磨,研磨一段时间后离心,离心后倒取上清液,然后使用旋转蒸发器50℃浓缩上清液,继而加入石油醚或正己烷萃取,再将萃取液用旋转蒸发器浓缩至浓稠液,最后加入无水乙醇,放人冰箱冷冻,析出胆固醇等杂质,过滤回收滤液。辅酶Q10的溶出量受研磨时间影响明显。研磨时间10min～20min,辅酶Q10产量相对较高,过度研磨容易造成辅酶Q10氧化和损失,因此要在研磨前加入一定量的抗氧化剂。由于人工研磨用力不均匀,因此细胞破碎效果欠佳。刘玲等2.3超声波破碎提取法超声波破碎提取法的一般方法是:首先在湿菌体中加入丙酮,配制为菌悬液,然后在冰浴条件下使用超声波细胞破碎仪破碎菌体,选取一定的超声波破碎频率,功率,超声间隙时间以及超声总时间,最后离心、提取。李聚海等虽然超声波破碎提取法破碎菌体细胞壁效果好,但其设备昂贵,在处理过程中会大量产热,要使用冰水冷却,因而提取成本较高。而且超声波在水中传递损失,距离超声波发生器(喷头)距离越远,单位面积得到的能量也越少,因此每次的处理量相当少,仅为几十毫升。为进一步优化超声破碎提取法,提高辅酶Q2.3.1超声破碎提取法溶菌酶是一类专门作用于微生物细胞壁的水解酶,其酶解条件为:pH值7.2的0.2mol·L-溶菌酶酶解辅助超声破碎提取法的一般方法是:首先在相应的条件下加入溶菌酶,振荡一定时间后离心,然后加入丙酮,使用超声细胞破碎仪对其进行破碎,弃去上清液,所得菌体加入石油醚,萃取2～3次,取上清液水洗至中性,脱水、减压浓缩,最后用无水乙醇溶解。许芳等2.3.2超声波细胞破碎法冻融辅助超声破碎提取法的一般方法是:首先将菌体放入冰箱冷冻一定时间,然后加入丙酮,使用超声波细胞破碎仪对其进行破碎,弃去上清液,所得菌体加入石油醚,萃取2次,取上清液水洗至中性,脱水、减压浓缩,最后用无水乙醇溶解。冻融辅助超声破碎提取法不仅可以有效提高辅酶Q2.3.3超声法提取焦性无水皂化辅助超声破碎提取法的一般方法是:首先取菌体,加入一定比例焦性没食子酸,搅拌均匀,再加入一定浓度氢氧化钠-乙醇水溶液搅拌,超声一定时间,迅速冷却