香港海鸥型菌属原核细菌的分离鉴定及耐药性分析

香港海鸥型菌属原核细菌的分离鉴定及耐药性分析

香港海猪是一种原核细菌。1材料和方法1.1材料表面香港海鸥型菌株的筛选2016年1-9月期间,从广州8个不同的零售市场采集草鱼和青蛙肠道标本,通过分离培养,生化鉴定和香港海鸥型菌16SrRNA基因特异性序列测序,最终确定122株为香港海鸥型菌株,由广州医科大学附属第一医院检验科保存。其中鱼源株85株,蛙源株37株。营养药的提取血琼脂平板、红霉素药敏纸片(环凯公司),MH平板、营养肉汤(生物梅里埃公司),DNA提取试剂盒、200bpMakerⅢ(天根有限公司)。引物合成自生工生物工程(上海)股份有限公司,Premix标准菌株大肠埃希氏菌ATCC25922和金黄色葡萄球菌ATCC25923由广州医科大学附属第一医院检验科保存,并作为药敏试验的质控菌株。实验仪器和仪器PCR扩增仪(伯乐公司)、电泳仪(北京六一仪器厂)、凝胶成像分析系统(英国Syngene公司)、生物安全柜(Thermo公司产品)、生物培养箱LRH-250A(广州医疗器械厂)、低温超速离心机(Eppendorf公司)、电子分析天平(上海民桥精密科学仪器厂)和0.5麦氏比浊仪(梅里埃公司)。1.2方法香港海鸥型菌对麻黄的敏感性测定按照CLSI的纸片扩散法(K-B法)测定122株香港海鸥型菌对红霉素的敏感性。使用游标卡尺测量抑菌圈并记录,结果判读根据CLSI标准进行。dns模型的制备采用天根柱式DNA提取试剂盒,按照说明书提取菌体DNA。将提取的模板DNA置于-20℃冰箱保存。测定了类固醇抗剂的基因引用产品参照文献pcr反应系统的配置反应体系共25μL,其中包括12.5μLpcrmixdd-pcr凝胶的观察取0.6μL扩增产物加样于1.5%琼脂糖凝胶中(使用DD染料配制),在130V电压下电泳15min,用凝胶成像系统观察并保存图片。2结果广告过敏的结果122株香港海鸥型菌对红霉素耐药率为29.5%(见表1)。抗癫痫基因的分布只在蛙源耐药株中检出红霉素抗性基因抗癫痫基因试验的结果420bp处出现一些遗传因素的研究通过与GenBank上的3香港海鸥型菌激素耐药性分析由于广东省地处珠江三角洲地区,毗邻香港,属亚热带气候,温热多雨,居民素喜食鱼、虾、蟹等淡水产品,因此,存在引发人群食源性疾病的潜在危险。目前国内和国外均有香港海鸥型菌所致人胃肠炎的临床病例报道,香港地区为首次报道从社区胃肠炎患者粪便中培养出香港海鸥型菌目前,我国滥用抗生素的情况依然十分严重,多重耐药甚至泛耐药细菌的出现应当起人们的警惕。故本课题组开展香港海鸥型菌红霉素耐药性研究对于预防和治疗其引起的感染具有重要意义。本研究122株香港海鸥型菌中对红霉素耐药株有35株,耐药率达28.7%,表明香港海鸥型菌对红霉素耐药较为严重。这与以往广州地区研究结果相吻合,如王祉蕴等本研究同时发现蛙源株对红霉素的耐药率比鱼源株要高;同时检测常见导致细菌红霉素耐药的基因:香港海鸥型菌自发现至今已有18年,大部分的文献报道均针对该菌的分离情况和表型进行研究。近年来开始对该菌的致病机制和耐药机制进行深入研究。而该菌对红霉素耐药及传播机制仍不明确,国内外均无相关文献报道。故本研究通过对香港海鸥型菌红霉素耐药株的相关耐药基因香港海鸥型菌的主要宿主是水产品(淡水鱼和蛙),多种抗生素耐药菌的出现应引起养殖业对滥用抗生素的警惕,建议对抗生素市场进行更严格的监管。:无:张铮峰,张冰纯,王盼盼,等.广州市香港海鸥型菌红霉素耐药性与基