常用培养基配方

常用培养基配方02onpg培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲器葡萄糖蛋白胨水（mr和vp试验用）05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08hugh-leifson培养基（o/f试验用）09马尿酸钠培养基11苯丙氨酸培养基12氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水（靛基质试验用）14硫酸亚铁琼脂（硫化氢试验用）15尿素琼脂16氤化钾（kcn）培养基17氧化酶试验18硝酸盐培养基19细胞色素氧化酶试验20过氧化氢酶试验21过氧化物酶试验22磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24乳酸-苯酚溶液25肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤33乳糖胆盐发酵管34乳糖蒸煮管35ec肉汤36缓冲器蛋白胨水(bp)37氯化镁孔雀绿增菌液(mm)38四硫磺酸钠煌蓝减菌液(ttb)39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40亚硒酸盐胱氨酸减菌液(sc)41gn增菌液42肠道菌增菌肉汤43亚硫酸铋琼脂(bs)44dhl琼脂45he琼脂46ss琼脂47ws琼脂48麦康凯琼脂49伊红美蓝琼脂(emb)50三糖铁琼脂(tsi)51三糖铁琼脂(换用方法)52克氏双糖铁琼脂(ki)53克氏双糖铁琼脂(换用方法)54葡萄糖半液态蒸煮管555%乳糖发酵管56caye培养基57honda氏产毒肉汤58elek氏培养基（毒素测量用）59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60胰蛋白胨水61rustigian氏尿素培养液62氯化钠结晶紫增菌液63氯化钠蔗糖琼脂64嗜盐菌选择性琼脂653.5%氯化钠三糖铁琼脂66氯化钠血琼脂673.5%氯化钠生化试验培养基68改进磷酸盐缓冲液（小肠结肠炎耶尔森氏菌专用）69cin-1培养基70嗜盐性试验培养基01糖发酵管蛋白胨10g磷酸氢二钠（na2hpo4・12h2o）2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12ml蒸馏水1000ml1葡萄糖蒸煮管及按上述成分配不好后，按0.5%重新加入葡萄糖，灌装于存有一个倒转小管的小试管内，121°C高压杀菌15min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后，分装每瓶100ml,121C高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10%溶液，同时高压灭菌.将5ml糖溶液加入于100ml培养基内，以无菌操作分装小试管.备注:蔗糖不氢铵，冷却后可以自行水解者，应当使用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种，于36°C±1°C培养，一般观察2〜3d.迟缓反应需观察14〜30d.02onpg培养基邻硝基酚B-d-半乳糖昔(onpg)60mg(o-nitrophenyl-B-d-galactopyranoside)0.01mol/l磷酸钠缓冲液(ph7.5)10ml1%蛋白胨水(ph7.5)30ml制法:将onpg溶于缓冲液内，加入蛋白胨水，以过滤法除菌，分装于10mmX75mm试管，每管0.5ml,用橡皮塞塞紧.试验方法：自琼脂斜面上挑取培育物1八十环注射，于36±1C培育1〜3h和24h观测结果.如果B-半乳糖苷酶产生，则于1〜3h变黄色，如无此酶则24h不变色.03西蒙氏柠檬酸盐培养基硫酸镁(mgso4・7h2o)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g蒸馏水1000ml0.2%漠麝香草酚蓝溶液40ml制法:先将盐类熔化于水内，校正ph,再提琼脂，冷却熔化.然后重新加入指示剂，混合光滑后灌装试管,121C高压杀菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种，于36±1C培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长，培养基从绿04缓冲器葡萄糖蛋白胨水(mr和vp试验用)磷酸氢二钾5g蒸馏水1000ml制法:溶化后校正ph,分装试管，每管1ml,121C高压灭菌15min.甲基白(mr)试验：自琼脂斜面挑取少量培育物注射本培养基中，于36±1°C培育2〜5d,哈夫尼亚菌则应当在22〜25C培育.碱液甲基白试剂一滴,立即观测结果.鲜红色为阳性，黄色为阴性.甲基白试剂配法：10mg甲基白溶30ml95%乙醇中，然后重新加入20ml蒸馏水.v-p试验:用琼脂培养物接种本培养基中，于36±1C培养2〜4d.哈夫尼亚菌则应在22〜25C培养.加入6%a-萘酚-乙醇溶液0.5ml和40%氢氧化钾溶液0.2ml,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色，如为阴性,应放在36±1C下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g0.2%酚红溶液6ml蒸馏水1000ml制法:冷却熔化，灌装试管，121C高压杀菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面，在36±1C培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06丙二酸钠培养基酵母浸膏1g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g丙二酸钠3g0.2%漠麝香草酚蓝溶液12ml蒸馏水1000ml制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水，校正ph后再加入指示剂，分装试管,121C高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培育物注射，于36±1°C培育48h,观测结果.阳性者由绿色变成蓝色.07葡葡糖铵培养基硫酸镁(mgso4・7h2o)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g蒸馏水1000ml0.2%漠麝香草酚蓝溶液40ml制法:先将盐类和糖溶解于水内，校正ph,再加琼脂，加热溶化，然后加入指示剂，混合均匀后分装试管,121C高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用注射针轻轻跌破培育物的表面,在盐水管内制成藻酸的悬液，肉眼观测不见踪影浑浊，以每一注射环路附带菌数在20〜100之间为宜.将注射环路杀菌后挑取菌液注射，同时再以同法注射普通斜面一支做为对照.于36±1C培育24h.阳性者葡萄糖铵斜面上存有正常大小的菌落生长;阴性者不生长，但在对照培养基上生长较好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可以视作阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水，蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞，干热灭菌后使用.如果操作时不注意，有杂质污染时，易造成假阳性的结果.08hugh-leifson培养基(o/f试验用)磷酸氢二钾0.3g葡萄糖10g0.2%漠麝香草酚蓝溶液12ml蒸馏水1000ml制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后，校正ph至7.2.加入葡萄糖，琼脂煮沸，溶化琼脂，然后加入指示剂.混匀后，分装试管，121C高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培育物作外科手术注射,同时注射两支培养基，其中一支于注射后碱液熔化的1%琼脂液于表面，高度约1cm,于36±1C培育.09马尿酸钠培养基马尿酸钠1g肉浸液100ml制法:将马尿酸钠熔化于肉浸液内，灌装于小试管内，并于管壁画一横线.以标志管内液面高度，高压杀菌121°C20min.试剂:三氯化铁(fecl3・6h2o)12g,溶于2%盐酸溶液100ml中即成.试验方法:用氢铵培育物注射，于42C培育48h,观测培养液与否抵达试管壁上记号处，例如严重不足时,用蒸馏水补齐至原量.经Vergt结晶，汲取上清液0.8ml,重新加入三氯化铁试剂0.2ml,立即混合光滑，经10〜15min,观测结果.结果:发生永恒之沉淀物为阳性.明胶120g蒸馏水1000mlph6.8〜7.0制法:冷却熔化,校正至ph7.4〜7.6,灌装小管，121C高压杀菌10min,抽出后快速加热,并使其凝结.复查最终ph应属6.8〜7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种，放在22〜25C培养,每天观察结果，记录液化时间.或放在36士1C培养，每天取出，放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基酵母浸膏3gdi-苯丙氨酸(或l-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠1g蒸馏水1000ml制法:加热溶解后分装试管，121C高压灭菌15min，使成斜面.试验方法：自琼脂斜面上挑取大量培育物，移种于苯丙氨酸琼脂，在36±1C培育4h或18〜24h.碱液10%三氯化铁溶液2〜3几滴，自斜面培育物上泣不成声，苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈圆形深绿色.12氨基酸脱羧酶试验培养基酵母浸膏3g蒸馏水1000ml1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mll-氨基酸或dl-氨基酸0.5或1g/100ml制法:除氨基酸以外的成分冷却熔化后，灌装每瓶100ml,分别重新加入各种氨基酸:赖氨酸，精氨酸和鸟氨酸.l-氨基酸按0.5%重新加入,dl-氨基酸按1%重新加入.择机校正ph至6.8.对照培养基不提氨基酸.灌装于杀菌的小试管内,每管及0.5ml,上面碱液一层液体石蜡，115°C高压杀菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种，于36±1C培养18〜24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱，培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物，但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水（靛基质试验用）蛋白胨（或胰蛋白胨）20g蒸馏水1000ml制法:按上述成分配制，分装小试管，121C高压灭菌15min.柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛熔化于75ml戊醇中.然后缓慢重新加入淡盐酸25ml.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95ml95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20ml.试验方法:挑取小量培育物注射，在36±1C培育1〜2d,必要时可以培育4〜5d.重新加入柯凡克试剂约0.5ml,轻摇试管，阳性者于试剂层呈深红色;或重新加入欧-波试剂约0.5ml,沿管壁泣不成声，全面覆盖于培养液表面，阳性者于液面碰触处呈圆形玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后，应先用已知菌种鉴定后方可使用.14硫酸亚铁琼脂（硫化氢试验用）酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g蒸馏水1000ml制法:冷却熔化，校正ph,灌装试管，115C高压杀菌15min,抽出四肢祗其凝结.试验方法:挑取琼脂培养物，沿管壁穿刺，于36±1°C培养1〜2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生，应采用三糖铁琼脂或本培养基.15尿素琼脂磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3ml蒸馏水1000ml20%尿素溶液100mlph7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配不好，并校正ph,重新加入琼脂，冷却熔化并灌装烧瓶.121C高压杀菌15min.热至50〜55C，重新加入经除菌过滤器的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终ph应属7.2±0.1.灌装于杀菌试管内，放成斜面水泵.试验方法:挑取琼脂培养物接种，在36±1C培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16氤化钾(kcn)培养基蛋白胨10g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠5.64g蒸馏水1000ml0.5%氤化钾溶液20ml制法:将除氤化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121C高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100ml培养基加入0.5%氤化钾溶液2.0ml(最后浓度为1:10000),分装于12mmX100mm灭菌试管,每管约4ml,立刻用灭菌橡皮塞塞紧，放在4C冰箱内，至少可保存两个月.同时，将不加氤化钾的培养基作为对照培养基，分装试管备用.17氧化酶试验1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制，干冰箱内避光保存.1%a-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴，阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加a-萘酚溶液一滴，阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂，直接滴加于菌落上，其显色反应与以上相同.18硝酸盐培养基硝酸钾0.2g蒸馏水1000ml制法:溶解，校正ph,分装试管,每管约5ml,121°C高压灭菌15min.硝酸盐还原成试剂：甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/l乙酸溶液100ml中.乙液:将甲萘胺0.5g熔化于2.5mol/l乙酸溶液100ml中.试验方法:接种后在36±1C培养1〜4d,加入甲液和乙液各一滴，观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.备注:本试验阴性的原因存有三:细菌无法还原成硝酸盐;亚硝酸盐稳步水解，分解成氨和氮;培养基不适合细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐与否未被水解，可以再重新加入锌粉少许，可以并使硝酸盐还原成为亚硝酸盐而呈现出红色.19细胞色素氧化酶试验1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%a-萘酚-乙醇溶液.试验方法:挑37C（或高于37C）培育20h的斜面培育物一支,将两种试剂各2〜3几滴,从斜面上端滴下，并将斜面略作弯曲，并使试剂混合液流经斜面上的培育物.例如系平板培育物，则需用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性•阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取液态培养基上菌落一注射环路，放在洁净试管内，碱液3%过氧化氢溶液2ml,观测结果.结果:于半分钟内出现气泡者为阳性，不出现气泡者为阴性.21过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取液态培养基上菌落一注射环路，放在洁净试管内，碱液2%儿茶酚溶液1ml及3%过氧化氢溶液1ml.静放在室温(20°C)中30〜60min,观测结果.结果:阳性反应，细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.备注:过氧化物酶的促进作用可以受到氤化钾的遏制.22磷酸盐缓冲液磷酸二氢钾34g1mol/l氢氧化钠溶液175ml蒸馏水825ml制法:先将磷酸盐溶解于500ml蒸馏水中，用1mol/l氢氧化钠溶液校正ph后,再用蒸馏水稀释至1000ml.稀释液:取储存液1.25ml,用蒸馏水稀释至1000ml.分装每瓶100ml或每管10ml,121C高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠4g蒸馏水1000ml制法:加热溶解，校正ph,121C高压灭菌15min.24乳酸-苯酚溶液乳酸(比重1.21)10g蒸馏水10ml制法:将苯酚在水中加热溶解，然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25肉浸液肉汤切碎牛肉500g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000ml制法:将切碎之回去筋膜并无油脂牛肉500g提蒸馏水1000ml，混合后摆冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮熟半小时，并使肉渣全然凝固成块,用绒布过滤器，并侵蚀搜集全部滤液,搅拌补齐原量.重新加入蛋白胨，氯化钠和磷酸盐，熔化后校正ph7.4〜7.6煮熟并过滤器，灌装烧瓶，121°C高压杀菌30min.26肉浸液琼脂肉浸液肉汤（ph7.4）1000ml琼脂17〜20g制法:冷却熔化琼脂，灌装烧瓶或试管,121C高压杀菌30min.根据须要,蕴含平板或放成斜面.27牛肉（或牛心）消化汤切碎牛肉（或牛心）1000g15%氢氧化钠溶液27ml胰蛋白酶40ml三氯甲烷1ml氯化钠10g蒸馏水2000ml1表示取碎牛肉，提蒸馏水，隔水冷却至80C，保持15min.2加氢氧化钠溶液，对ph试纸呈弱碱性，冷至40C.3提胰蛋白酶，乙醚，在36±1C置放4〜5h,每小时晃动一二次.44h后，吸取上层液5ml于试管中，加5%硫酸铜溶液0.1ml,4%氢氧化钠溶液5ml,混合之.若呈红色,则不须再消化，可由温箱取出.5重新加入15%乙酸溶液45ml,对ph试纸呈酸性.6煮沸15min，使胰蛋白酶破坏，冷后，放冰箱内一夜.7次日汲取上层清液，提氯化钠10g,并搅拌补齐原量,煮熟.8校正ph7.4〜7.6（加15%氢氧化钠溶液约10ml）,加热，用滤纸过滤，分装烧瓶,121C高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础，不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之酿制:称取回去脂切碎的猪胰500g,重新加入乙醇500ml,蒸馏水1500ml,混合之，装人玻塞瓶内.每日容器三次.3d后，用绒布过滤器抽走其汁，提盐酸至0.05%,摆冰箱内留存水泵.绞碎猪胃100g切碎猪血块100g蒸馏水1000ml淡盐酸10ml1洗涤猪胃，除去油脂，保留胃粘膜，用绞肉机绞碎.2用绞肉机将猪血块切碎.3将蒸馏水加热至55°C,加入猪胃，猪血块和盐酸，置55°C水浴中24h,时常加以摇动.4从水浴内抽出，重新加入1mol/l碳酸钠溶液5ml,煮熟10min,放在冰箱内一夜.5吸取上层清液，加磷酸氢二钾1g,加热至75C,加入1mol/l碳酸钠溶液45ml,煮沸，校正ph7.2〜7.4.6用滤纸过滤，分装烧瓶，121C高压灭菌20min.牛心消化汤(ph7.4〜7.6)1000ml黄豆粉浸液50ml制法:将琼脂提在牛心消化汤内，冷却熔化,过滤器.重新加入豌豆粉浸液，灌装每瓶100ml,121C高压杀菌15min.豌豆粉浸液制法:挑豌豆粉5g,氯化钠10g,重新加入蒸馏水100ml.复置100C水浴内冷却1h,摆于冰箱中过夜.汲取上清液即为为豌豆浸液.ph7.4〜7.6豆粉琼脂100ml退纤维羊血(或兔血)5〜10ml制法:加热溶化琼脂，冷至50C，以灭菌手续加入脱纤维羊血，摇匀，倾注平板.亦可分装灭菌试管，置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.蛋白胨10g琼脂15〜20g蒸馏水1000ml制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内，加入15%氢氧化钠溶液约2ml,校正ph至7.2〜7.4.加入琼脂，加热煮沸，使琼脂溶化.分装烧瓶,121C高压灭菌15min.备注:此培养基可以可供通常细菌培养之用，可以蕴含平板或做成斜面.如用作菌落计数，琼脂量为1.5%;例如做成平板或斜面,则应属2%.蛋白陈10g蒸馏水1000ml制法:按上述成分混合，溶解后校正ph,分装烧瓶，每瓶225ml,121°C高压灭菌15min.33乳糖胆盐蒸煮管蛋白胨20g猪胆盐（或牛，羊胆盐）5g0.04%滇甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000ml制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中，校正ph,加入指示剂，分装每管10ml,并放入一个小倒管，115C高压灭菌15min.备注:双料乳糖胆盐蒸煮管除蒸馏水外，其他成分加倍.34乳糖发酵管蛋白胨20g0.04%漠甲酚紫水溶液25ml蒸馏水1000ml制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中，校正ph,加入指示剂，按检验要求分装30ml,10ml或3ml,并放入一个小倒管，115C高压灭菌15min.备注:①双料乳糖蒸煮管除蒸馏水外，其他成分加倍.②30ml和10ml乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3ml乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35ec肉汤胰蛋白胨20g3号胆盐（或混合胆盐）1.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g蒸馏水1000ml制法:将上述成分混合，熔化后,分后装有蒸煮倒管的试管中，121°C高压杀菌15min,最终ph为6.9±0.2.36缓冲蛋白胨水(bp)蛋白胨10g磷酸氢二钠(na2hpo4・12h2o)9g磷酸二氢钾1.5g蒸馏水1000ml制法:按上述成分配不好后以大烧瓶上装，121C高压杀菌15min.临用时无菌灌装每瓶225ml.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37氯化镁孔雀绿减菌液(mm)胰蛋白胨5g磷酸二氢钾1.6g蒸馏水1000ml氯化镁(化学纯)40g蒸馏水100ml4.13.3丙液0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配不好后，121C高压杀菌15min水泵.临用时挑甲液90ml,乙液9ml,丙液0.9ml,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称rappaport10(r10)增菌液.38四硫磺酸钠煌蓝减菌液(ttb)多胨或昕胨5g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000ml蒸馏水20ml制法:将基础培养基的各成分重新加入蒸馏水中，冷却熔化，灌装每瓶100ml.灌装时应随时振摇，并使其中的碳酸钙搅匀.121°C高压杀菌15min水泵.临用时每100ml基础培养基中重新加入碘溶液2ml,0.1%煌蓝溶液1ml.39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)蛋白胨10g碳酸钙45g蒸馏水1000ml将各成分加入于蒸馏水中，加热至约70C溶解，校正ph至7.0±0.1,121C高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液硫代硫酸钠(na2s2o3・5h2o)50g蒸馏水减至100ml碘化钾25g蒸馏水减至100ml将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中，加入碘片，振摇玻瓶至碘片全部溶解，再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内，紧塞瓶盖备用.煌蓝0.5g蒸馏水100ml放置暗处,不少于1d,并使其自然杀菌.干燥的牛胆盐10g蒸馏水100ml煮沸溶解，121C高压灭菌20min.基础液900ml硫代硫酸钠溶液100ml碘液20ml煌绿溶液2ml牛胆盐溶液50ml临用前，按上列顺序，以无菌操作依次加入于基础液中，每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中，每瓶100ml.40亚硒酸盐胱氨酸减菌液(sc)亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠5.5g磷酸二氢钾4.58l-胱氨酸0.01g蒸馏水1000ml1%l-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取l-胱氨酸0.1g(或dl-胱氨酸0.2g),提1mol/l氢氧化钠1.5ml,并使熔化，再重新加入蒸馏水8.5ml可自.制法:将除亚硒酸氢钠和l-胱氨酸以外的各成分溶解于900ml蒸馏水中，加热煮沸，俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100ml蒸馏水中，加热煮沸,候冷，以无菌操作与上液混合.再加入1%l-胱氨酸-氢氧化钠溶液1ml.分装于灭菌瓶中，每瓶100ml,ph应为7.0±0.1.41gn减菌液胰蛋白胨20g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g蒸馏水1000ml制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正ph.分装每瓶225ml,115°C高压灭菌15min.42肠道菌增菌肉汤蛋白胨110g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000ml制法:按上述成分配好，加热使溶解，校正ph.分装每瓶30ml,115°C高压灭菌15min.43亚硫酸铋琼脂(bs)蛋白胨10g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌蓝0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18〜20g蒸馏水1000ml1将前面5种成分溶解于300ml蒸馏水中.2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50ml蒸馏水熔化.3将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解，冷至80C4将以上三液分拆,补足蒸馏水至1000ml,校正ph,提0.5%煌蓝水溶液5ml,容器.热至50〜55C，蕴含平皿.备注:此培养基不须要高压杀菌.制取过程不必过分冷却.以免减少其选择性.应当在临用前一天制取，储藏于室温暗处.少于48h不必采用.44dhl琼脂蛋白胨20g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠2.3g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18〜20g蒸馏水1000ml制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400ml蒸馏水中，校正ph.再将琼脂于600ml蒸馏水中煮沸溶解,两液合并，并加入0.5%中性红水溶液6ml,待冷至50〜55°C，倾注平板.45he琼脂琼脂18〜20g蒸馏水1000ml0.4%漠麝香草酚蓝溶液16mlandrade指示剂20ml甲液20ml乙液20ml制法:将前面七种成分溶解于400ml蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600ml蒸馏水内，加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内，校正ph.再加入指示剂，并与琼脂液合并,待冷至50〜55C，倾注平板.备注:①此培养基不容高压杀菌.硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100ml回去氧胆酸钠10g蒸馏水100ml②andrade指示剂酸性复红0.5g1mol/l氢氧化钠溶液16ml蒸馏水100ml将复红熔化于蒸馏水中，重新加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红退色不全系列，再提氢氧化钠溶液1〜2ml.46ss琼脂蒸馏水1000ml再将两液混合,121°C高压杀菌15min,留存水泵.基础培养基100ml柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10ml1%中性红溶液2.5ml0.1%煌蓝溶液0.33ml加热溶化基础培养基，按比例加入上述染料以外之各成分，充分混合均匀,校正至ph7.0,加入中性红和煌绿溶液，倾注平板.备注:①合叶的培养基宜当日采用，或留存于冰箱内于48h内采用.煌绿溶液配好后应在10d以内使用.可以购用ss琼脂的潮湿培养基.47ws琼脂十二烷基硫酸钠2gandrade指示剂20ml0.4%漠麝香草酚蓝溶液16ml甲液20ml蒸馏水1000ml制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解，不需消毒，校正ph后加入指示剂和甲液，倾注平板应呈草绿色.备注:①可供沙门氏菌拆分用.②andrade指示剂和甲液的配制均见he琼脂.48麦康凯琼脂蛋白胨17g猪胆盐(或牛，羊胆盐)5g蒸馏水1000ml0.01%结晶紫水溶液10ml0.5%中性红水溶液5ml1将蛋白胨,昕,胆盐和氯化钠熔化于400ml蒸馏水中，校正ph7.2.将琼脂重新加入600ml加热溶解.将两液合并，分装于烧瓶内，121°C高压灭菌15min备用.2临用时冷却熔化琼脂，趁热重新加入乳糖，热至50〜55C时,重新加入结晶青色和中性白水溶液，容器后蕴含平板.备注:结晶紫及中性白水溶液包好后须经高压杀菌.49伊红美蓝琼脂(emb)蛋白胨10g磷酸氢二钾2g2%伊红y溶液20ml0.65%美蓝溶液10ml蒸馏水1000ml制法:将蛋白胨，磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中，校正ph,分装于烧瓶内，121C高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂，冷至50〜55C,加入伊红和美蓝溶液,摇匀，倾注平板.50三糖铁琼脂(tsi)蛋白胨20g硫酸亚铁铵〔fe(nh4)2(so4)2・6h2o〕0.2g硫代硫酸钠0.2g酚红0.025g蒸馏水1000ml制法:将除琼脂和酚红以外的各成分熔化于蒸馏水中，校正ph.重新加入琼脂，冷却煮熟,以熔化琼脂.重新加入0.2%酚红水溶液12.5ml,容器.灌装试管,装量宜多些，以便获得较低的底层.121°C高压杀菌15min.置放高层斜面水泵.51三糖铁琼脂(换用方法)蛋白胨15g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g酚红0.025g蒸馏水1000ml制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中，校正ph.加入琼脂，加热煮沸，以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5ml，摇匀.分装试管,装量宜多些，以便得到较高的底层.121C高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52克氏双糖铁琼脂(ki)上层培养基成分血消化汤(ph7.6)500ml琼脂6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g0.2%酚红溶液5ml下层培养基成分血消化汤(ph7.6)500ml0.2%酚红溶液5ml1剥皮消化汤按上层和下层的琼脂用量，分别重新加入琼脂，冷却熔化.2分别加入其他各种成分.将上层培养基分装于烧瓶内;将下层培养基分装于灭菌12mmX100mm试管内，每管约2ml.115C高压灭菌10min.3将上层培养基放到56°C水浴箱内保温;将下层培养基四肢放到室温内,并使其凝结.4当下层培养基凝固后，以无菌手续将上层培养基分装于下层培养基的上面,每管约1.5ml,放成斜面.53克氏双糖铁琼脂（换用方法）蛋白胨20g柠檬酸铁铵0.5g硫代硫酸钠0.5g酚红0.025g蒸馏水1000ml制法:将除琼脂和酚红以外的各成分熔化于蒸馏水中，校正ph.重新加入琼脂，冷却煮熟,以熔化琼脂.重新加入0.2%酚红水溶液12.5ml,容器.灌装试管,装量宜多些，以便获得比较低的底层.121C高压杀菌15min.置放高层斜面水泵.54葡萄糖半固体发酵管牛肉膏0.3g氯化钠0.5g1.6%漠甲酚紫酒精溶液0.1ml琼脂0.3g蒸馏水100ml制法:将蛋白胨，牛肉膏和氯化钠加入于水中，校正ph后加入琼脂加热溶解，再加入指示剂和葡萄糖，分装小试管，灭菌121C15min.555%乳糖蒸煮管蛋白胨0.2g氯化钠0.5g2%漠麝香草酚蓝水溶液1.2ml蒸馏水100ml制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50ml蒸馏水内，校正ph.将乳糖溶解于另外50ml蒸馏水内，分别灭菌121°C15min，将两液混合，以无菌操作分装于灭菌小试管内.备注:在此培养基内，大部分乳糖迟缓蒸煮的细菌可于1d内蒸煮.56caye培养基此培养基附于在肠毒素诊断试剂盒内，例如无此培养基，一般会用honda氏产毒肉汤.57honda氏产毒肉汤水解酪蛋白20g酵母浸膏粉10g氯化钠2.5g磷酸氢二钠15g微量元素0.5ml蒸馏水1000ml制法:熔化后校正ph,高压杀菌121C15min,等待热至45〜50C时,重新加入林可霉素溶液，每毫升培养基附带90ug.微量元素配方:硫酸镁5g,氯化铁0.5g,氯化钻2g,蒸馏水100ml58elek氏培养基（毒素测定用）乳糖0.7g40%氢氧化钠溶液1.5ml蒸馏水1000ml制法:用500ml蒸馏水溶解琼脂以外的成分，煮沸，并用滤纸过滤.用1mo1/l氢氧化钠校正ph.用另外500ml蒸馏水加热溶解琼脂.将两液混合，分装试管10ml或20ml.121C高压灭菌15min.临用时加热溶化琼脂倾注平板.59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基甲液:胰蛋白胨10g蒸馏水1000ml乙液:磷酸氢二钠9.5g蒸馏水1000ml丙液:氯化镁(mgcl2*6h2o)40g蒸馏水400ml以上分别在121°C灭菌15min.丁液:孔雀绿0.2g蒸馏水100ml戊液:羧苄青霉素1mg/ml制法:取甲液620ml,乙液160ml,丙液212ml混合，再加入丁液6.4ml和戊液2.4ml,即为1000ml培养基.分装灭菌烧瓶，每瓶100ml,或灭菌试管10ml.60胰蛋白胨水胰蛋白胨10g蒸馏水1000ml制法:将上述成分溶解，校正ph.分装试管，121C高压