D二聚体检测胶乳凝集法-检验科免疫室作业指导书

D二聚体检测胶乳凝集法原理用D-二聚体的单克隆抗体致敏胶乳颗粒，当血浆中 D-二聚体浓度升高，胶乳颗粒将发生凝集。2.标本米集：2.1标本米集前病人准备：受检者应空腹。2.2标本种类：血浆2.3标本要求：采集静脉血2ml，枸橼酸钠抗凝（蓝色盖子的抗凝管）,分离血浆备用。3•标本储存：待测血浆室温下储存不超过 4小时，4C不超过8小时，-20C不超过一个月。4.标本运输：室温运输。5•标本拒收标准：凝集、溶血、脂血和细菌污染标本不能作测定。6試剂6.1试剂名称：D二聚体检测试剂盒6.2试剂生产厂家：美国Fisher科技有限公司包装规格：80Test/kit6.4试剂组成：致敏胶乳试剂---LatexReagent阳性对照---PositiveControl阴性对照---NegativeControl样品稀释液---SalineSolution645实验板646搅棒6.5试剂储存条件及有效期：保存于2~8C,有效期1年。7•操作步骤：7.1定性检测：7.1.1用前将所有试剂回复至室温。7.1.2按下表在实验板#1,#2,#3区域滴加试剂。实验板区域#1#2#3阴性对照阳性对照标本对照50卩l50卩l标本50□l胶乳试剂50卩l50卩l50卩l用搅拌棒搅匀，旋转实验板，在2分钟内于直射光源下观察结果7.2半定量检测7.2.1用前将所有试剂恢复至室温7.2.2用样品稀释液稀释标本：稀释比例未稀释1：21：41：8未稀释标本中所含D-二聚体([1g/ml)0.250.51.02.0稀释后标本5011501150115011胶乳试剂50卩l50卩l50卩l50卩l用搅拌棒搅匀，旋转实验板，在2分钟内于直射光源下观察结果8•结果判断：阴性：呈现圆滑均匀的乳状悬液。阳性：呈现凝集颗粒。半定量测定：浓度为出现阳性结果的最高稀释度X 0.25卩g/ml9•参考范围：阴性或＜0.25卩g/ml质量控制：每次试验均应设阴性和阳性对照，其结果应与预期相符。临床意义：11.1高凝状态，血栓性疾病和DIC时，血浆D-二聚体明显升高，是诊断DIC的重要依据。11.2D-二聚体在继发性纤溶症时升高，而在原发性纤溶症时正常，这是鉴别两者的重要依据。操作性能：快捷简便、灵敏度 0.225卩g/ml重复性好，特异性高。方法局限性：13.1D-二聚体阴性不能完全排除栓塞的存在。13.2正常水平的D-二聚体偶尔会出现非特异性凝集。13.3EDTA抗凝血储存超过4个小时，将会出现非特异性凝集。注意事项：14.1脂血或者有微生物污染都有可能造成非特异性凝集。14.22分钟内观察结果。14.3试剂和对照中含叠氮钠，勿触及皮肤和粘膜。参考文献：15.1Elms ， M.J ， etal ，(1986)Rapiddetectionofcross-linkedfibrindegradationproductsinplasmausingmonoclonalantibodycoatedlatexparticles.J.Path.85360-36415.2Ballegaeer ， V ，etal.(1987)FibrinolyticresponsetovesousocclusionandfibrinfragmentD-di