甲氧苄啶和二甲氧苄啶联合西药治疗鸡球虫病的研究

甲氧苄啶和二甲氧苄啶联合西药治疗鸡球虫病的研究

球虫病是一种常见的一起严重疾病。目前,防治鸡球虫病的主要手段还是依靠抗球虫药物。但是,抗球虫药物的使用也带来了一些问题。最突出的一个问题是球虫很容易对药物产生耐药性,据报道,几乎所有的药物都有耐药虫株的出现。为了避免或延缓球虫耐药性的产生,人们多采用增加药物浓度、轮换用药、穿梭用药及配合用药等措施。配合用药可以增加药物的疗效,降低药物用量,减少不良反应,也可以延缓耐药性的产生,并且可以降低药物的残留量。因此,进行抗球虫药物配合应用方面的研究具有一定的现实意义。磺胺喹口恶啉(SQ)、磺胺氯吡嗪钠(Esb3)是常用的磺胺类抗球虫药,甲氧苄啶(TMP)和二甲氧苄啶(DVD)是常用的磺胺增效剂,磺胺药与增效剂联合应用可以在不同的环节抑制细菌和球虫的叶酸代谢,因此应该存在相互之间的协同作用。本试验以TMP和DVD分别与不同浓度的SQ和Esb3配伍应用,观察对人工感染雏鸡柔嫩艾美耳球虫的治疗效果,观察不同浓度SQ和Esb3对人工感染柔嫩艾美耳球的治疗效果,观察TMP和DVD对SQ和Esb3抗鸡柔嫩艾美耳球虫的增效作用,并比较TMP和DVD之间对SQ和Esb3抗鸡柔嫩艾美耳球虫的增效作用的差异。1材料和方法1.1材料表面1.1.1药物、制剂和仪器磺胺喹ue15e啉,浙江黄岩兽药厂生产,批号20030804。敌菌净,如皋市信宇兽药材料有限公司生产,批号440199。乳酸甲氧苄啶(trimethoprim),佛山市南海北沙制药有限公司生产,批号740512007。磺胺氯吡嗪钠,江都市动物药厂生产,批号20060208。1.1.2饲养方法海兰褐雏鸡,由洛阳公华禽业有限公司提供,饲养于河南科技大学动物药业有限公司实验室,统一采用40W灯泡供暖及照明,箱养密度均匀,自由饮水摄食,至10日龄供试验用。1.1.3球虫囊柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,由河南科技大学禽病室在临床采集,并分离鉴定,试验前繁殖扩增。1.2方法1.2.1mtp/dv的配伍比对按每组12只随机分为16组,其中4个对照组(0.02%SQ单独应用和0.06%Esb3单独应用的药物对照组、1个阳性对照组和1个空白对照组),其余各剂量组分别以TMP和DVD按1∶5的比例与SQ配伍,SQ的浓度分别为0.05%、0.02%和0.01%,拌料给药;以TMP和DVD按1∶5的比例与Esb3配伍,Esb3的浓度为0.12%、0.06%和0.03%,拌料给药。1.2.2感染卵囊人工感染初级柔嫩艾美耳球虫,除不感染也不给药组外,其余各组雏鸡经口感染柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊,剂量为5×104个/只。1.2.3病料及抗球虫指数接种球虫卵囊后48h,开始给药,全部采取拌料混饲给药。剂量参照文献设计。药物与饲料混匀后混饲,自由摄食和饮水。每天观察并记录鸡群精神状况、采食量和粪便情况等。对死亡鸡只称重、剖检,确诊是否因感染球虫而死亡,并做好记录。试验自接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊后开始算起,第7天末对各组存活鸡只称重、处死。记录各组鸡存活率、相对增重率、盲肠病变值、盲肠卵囊值(用虫卵计数板计数),并计算抗球虫指数。存活率(%)、相对增重率、病变记分按文献的标准判定;卵囊值按文献的方法计算;抗虫指数(Anticoccidialindex;ACI)按美国默克公司推荐的公式计算。ACI=(相对增重率+存活率)-(盲肠病变值+盲肠卵囊值)存活率=存活鸡数/试验开始鸡数×100%相对增重率=实验组平均每只鸡增重(g)/不感染不给药组每只鸡平均增重(g)×100%盲肠病变值=盲肠平均病变积分×10病变计分标准:0分:无肉眼病变;1分:盲肠壁有很少量散在的淤血点,肠壁不增厚,内容物正常。2分:病变数量较多,盲肠内容物明显带血,盲肠壁少增厚,内容物正常。3分:盲肠内多量血液或有盲肠芯(血凝块或有灰白色干酪样的香蕉形块状物)盲肠壁肥厚明显,盲肠中央粪便含量少。4分:因充满大量血液和肠芯而盲肠肿大,肠芯中有粪渣或不含,死亡鸡只也记为+4分。盲肠卵囊值:0表示0万个～10万个/双侧盲肠;1表示10万个～100万个/双侧盲肠;10表示101万个～500万个/双侧盲肠;20表示501万个～1000万个/双侧盲肠;40表示1100万以上/双侧盲肠。1.2.4评估标准抗柔嫩艾美耳球虫指数<120为无效;120～160为弱效;160～180为中效;180以上为强效。2结果2.1tmp和保鲜剂最佳剂量的确定,其与现有药物组的抗球虫增效作用比较结果见表1。TMP与0.05%、0.02%、0.01%浓度SQ配伍的剂量组的ACI值分别为196、181和177;DVD与0.05%、0.02%、0.01%浓度SQ配伍的剂量组的ACI值分别为194、194和177,与单独应用0.02%SQ的药物对照组比较,加TMP或DVD后,抗球虫效果明显提高;从ACI值看不出TMP和DVD之间对不同浓度的SQ抗球虫增效作用有何差异。TMP+0.02%SQFIC值为181,DVD+0.02%SQACI值为194,与SQ联用的增效作用,DVD比TMP似乎更具优越性。单独应用0.06%Esb3药物对照组的ACI值为165,抗球虫效果为中效;TMP与0.12%、0.06%、0.03%浓度Esb3配伍的剂量组的ACI值分别为192、188和181,抗球虫效果均为高效,三组均高于不加增效剂的药物对照组;DVD与0.12%、0.06%、0.03%浓度Esb3配伍的剂量组的ACI值分别为191、187和185,抗球虫效果也均为高效,也均高于不加增效剂的药物对照组。2.2两组sq-lq-msq药物对照组aci值的比较结果见表1。DVD+0.01%SQ和TMP+0.01%SQ的ACI值分别为177和177,接近0.02%SQ药物对照组ACI值(181),显示有接近2倍的增效作用;TMP+0.03%Esb3和DVD+0.03%Esb3组的ACI值分别为181和185,远远高于0.06%Esb3药物对照组(162)。增效作用应在2倍以上。2.3盲肠病变值结果见表1。联合用药的高剂量组其盲肠病变值远低于低剂量组和单独用药组。0.02%SQ+TMP的盲肠病变值为4.2远小于0.02%SQ组的盲肠病变值18,经非配对进行两个样本平均数的差异显著性检验(t检验):0.02%SQ+DVD组与0.02%SQ组差异极显著(P<0.01);在Esb3+DVD组中,0.06%Esb3+DVD组与0.06%Esb3组差异极显著(P<0.01)。3tmp和dv对esb3和sq抗球虫的作用本试验所用柔嫩艾美耳球虫虫种是从病鸡盲肠中采取的,试验前繁殖扩增。Esb3药物对照组剂量(即以0.06%的浓度拌料)是依照文献设计的,但从ACI值(162)来看,抗球虫效果不太理想,显示球虫对Esb3的敏感性不高,可能是球虫对Esb3已产生了一定的耐药性。SQ单独应用的药物对照组的剂量为0.02%,略低于文献推荐的剂量,其ACI值为151,没能达到理想的抗球虫活性。添加TMP和DVD后,抗球虫活性明显增强,显示出TMP和DVD均能增强Esb3和SQ的抗球虫作用。相同剂量的Esb3和SQ分别添加等比例的TMP和DVD,ACI值的变化不明显,如0.05%SQ+TMP和0.05%SQ+DVD、0.02%SQ+TMP和0.02%SQ+DVD、0.01%SQ+TMP和0.01%SQ+DVD的ACI值分别为195、194、181和194、177、177;0.03%Esb3+TMP和0.03%Esb3+DVD、0.06%Esb3+TMP和0.06%Esb3+DVD、0.12