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HIV试验室生物安全防护1/761学会安全操作基本原理和技术在日常工作和紧急情况时,都能得到同事信任让彼此信任和尊重成为生物安全试验室关键价值理念2/762良好生物安全行为是试验室人员责任和义务3/763

保护自己和同事、环境安全是一线试验人员不可推卸责任，世界卫生组织一直强调个人责任对于试验室生物安全主要性，只有每个相关人员都受过良好培训、恪守试验室安全操作规范、而且以自己和同事安全、小区安全和环境安全为己任，安全健康试验室环境才会有最基本保障。个人责任也包含当所要开展工作包括新规程或新病原体时，应预先做风险评定，评定这些活动危险性。4/764一、个人防护二、生物安全试验室规范操作三、HIV试验室十条安全操作和防护办法四、试验室安全事故处理五、病原微生物试验室生物安全管理条例六、职业暴露评定及预防用药七、我国艾滋病试验室网络职业暴露危险度分析5/765个休防护装备必要性：感染性材料或其它有害因子在试验室操作时难免发生沾染或溢洒，发生身体暴露任何物理防护设备保护功效都有一定程度，都不是绝正确。譬如标准二级生物安全柜也可能有少许气溶胶粒子扩散到室内，所以在围场操作时还要进行个体防护。试验室生物安全防护是一项受制于多步骤多原因系统工程，在长久运转中难免有意外发生，此时个体防护就是保障安全关键。一、个人防护6/766各级生物安全试验室个体防护要求BSL-1：工作服、手套，工作服不穿离试验区，出试验室前洗手。BSL-2：背开式防护服、手套、帽子、口罩、必要时面部保护装置BSL-3：两层防护服、两层手套、帽子、专业防护口罩、必要时防护镜和呼吸保护装置。可再次使用工作服要先去除污染再清洗。BSL-4：进入BSL-4试验室时要更换全套服装，工作后脱下全部防护服，出口淋浴后离开。不一样类型BSL-4试验室中，个体防护装备有所不一样：在生物安全柜型BSL-4试验室，个体防护装备同BSL—3，在防护服型试验室中，使用正压防护服。混合型试验室同时使用三级生物安全柜和正压一体式防护服。7/767眼睛防护装备安全眼镜和护目镜在全部可能发生眼睛损伤（生物、物理和化学原因）生物安全试验室中工作时，必须采取眼睛防护办法。此要求不但适合用于在试验室中长时间工作人员，也适合用于进入试验室进行仪器设备维修保养工作人员。全部眼睛防护装备技术质量要求应该符合相关质量标准要求。8/768眼睛防护装备安全眼镜和护目镜当在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出试验时，必须佩戴护目镜。护目镜应戴在常规视力矫正眼镜或隐形眼镜外面来对飞溅和撞击提供保护。当进行更为危险操作时，如进行有潜在爆炸反应和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时，必须佩戴面罩或同时佩戴面罩和护目镜或安全眼镜。9/769眼睛防护装备安全眼镜和护目镜配戴隐形眼镜人员在生物安全试验室中工作时要使用护目镜。原因以下：假如腐蚀性液体溅至眼睛，本能反射会使眼睑夹紧关闭而使取出隐形眼镜更为困难。试验室中一些水汽能透过隐形眼镜，而引发对眼睛广泛刺激（这种情况下要使用特殊护目镜加以保护）。镜片能妨碍眼泪洗去刺激物。10/7610眼睛防护装备安全眼镜和护目镜安全眼镜能够保护工作人员防止受到大部分试验室操作所带来损害，不过对一些特殊操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时，佩戴安全眼镜显然是不够安全。又如在用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿，或使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害（比如在压力或温度突然增加或降低情况下）试验室操作时。在这些情况下，有必要保护整个面部和喉部，应该配戴面罩。安全眼镜、护目镜或面罩使用后未经去除污染，不得带离试验区。11/7611眼睛防护装备洗眼装置BSL-2和BSL-3试验室应配置紧急洗眼装置或淋浴设施。洗眼装置应安装在室内显著和易取地方，并保持洗眼管道通畅，便于工作人员紧急时使用。工作人员应掌握其操作方法。假如发生感染性物质或腐蚀性物质溅至工作人员眼睛时，工作人员应该（或在同事帮助下）使用就近洗眼装置用大量清水冲洗眼睛表面最少15-30分钟。注意：速度是决定性。12/7612淋浴和应急消毒喷淋装置BSL-2试验室在必要时应设应急喷淋装置；BSL-3试验室应在清洁区设淋浴装置，必要时在半污染区设应急消毒喷淋装置。这些装置应保持管道通畅。必须通知工作人员应急消毒喷淋装置摆放位置并培训其操作方法。在使用中可用大量冷水淋洗污染部位，最少需20分钟。假如为化学品溅出污染，需用大量急水冲洗。13/7613头面部防护装备口罩外科口罩能够保护部分面部免受生物危害物质如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷溅物污染。外科口罩单独使用不能为工作人员提供呼吸保护。14/7614防护面罩由防碎塑料制成，保护工作人员免受脸部碰撞或切割伤、血液、体液、分泌液、排泄物或其它感染性物质或化学物质飞溅或滴液接触至脸部，或污染眼睛、鼻子以及口。15/7615防护帽由无纺布制成一次性简易防护帽能够保护工作人员防止化学和生物危害物质飞溅至头部（头发）所造成污染。16/7616手部防护装备手套选择依据不一样用途选择适当手套。生物安全试验室最惯用是乳胶手套，对乳胶手套过敏者可使用聚氯乙烯和聚腈类手套。橡胶或塑料手套不能接触高温物体。使用耐热材料（皮制品）制成手套可供接触高温物体时使用。处理极冷物体如液氮或干冰时要用特殊绝缘耐冷手套。在进行尸体解剖等可能接触利器时，应戴不锈钢网手套以防切割损伤，但不能预防针刺损伤。17/7617手部防护装备手套检验在使用手套前应该检验手套是否褪色、穿孔或有裂缝。手套使用普通情况下，佩戴一副手套即可，操作高致病性或潜在高致病性病原微生物时应戴两副手套。在操作过程中，外层手套被污染时应马上用消毒剂喷洒手套，脱下后丢在生物安全柜内高压袋中，并马上戴上新手套继续试验。手套戴好后应覆盖试验服袖口。18/7618手部防护装备防止手套“触摸污染”戴手套手防止触摸鼻子、面部和防止触摸或调整其它个体防护装备以及触摸无须要物体一表面（如灯开关、门把手等；）戴手套过程注意关键点在试验室中要一直保持戴手套状态；选择正确类型和尺寸手套；手套戴好后要覆盖试验服袖口；戴手套手要远离面部。19/7619手部防护装备脱手套过程注意关键点脱手套时注意不要污染手部。手套脱下后内面向外。脱第二只手套时，手指插入第二只手套腕部内面，使手套脱下后内面向外，扔进高压袋中。20/7620身体防护装备试验服隔离衣正压防护服围裙套袖21/7621足部防护装备鞋鞋套22/7622用过个人防护用具处理凡在生物安全试验室使用过个人防护装备均应视为被污染过。一次性用具可高压灭菌后作为医疗废物统一处理。可重复使用防护服帽子等高压灭菌后再洗涤处理，重复使用。其它依据物品性质选择物理或化学方法处理。23/7623二、生物安全试验室规范操作24/7624在试验室工作需穿试验服、戴适当手套25/7625防止皮肤裸露-手套拉到袖口以盖住腕部

用创可贴包住小伤口26/7626使用机械移液装置生物安全1级（BSL-1）防止产生溅出气溶胶27/7627降低气溶胶禁止:吹出移液器中最终一滴液体吹打混匀28/7628生物安全1级（BSL-1）防护设备个人保护装置①面罩②眼罩29/7629洗手生物安全1级（BSL-1）

处理感染性物质以及动物，离开试验室前洗手30/7630生物安全2级（BSL-2）特殊规程防范针头和利器伤害；①使用利器搜集器；②不要打坏注射器、弯曲注射针头、用后装上针头套、重复使用针管或针头。31/7631生物安全2级（BSL-2）特殊规程防范针头和利器伤害；③不要把针头或利器放在垃圾袋中；32/7632生物安全2级（BSL-2）特殊规程防范针头和利器伤害；④不要用手直接接触破碎玻璃器皿；33/7633生物安全2级（BSL-2）特殊规程防范针头和利器伤害；⑤使用塑料器皿34/7634生物性废弃物处置方法☆防刺穿、防泄漏、密封容器

☆防止装载过满

☆处置正确35/7635生物性废弃物处置方法①不要把试验废物放到办公区废物内

②把利器放入专用容器内；

③废弃物离开试验室前

要对其外表进行消毒；

④做上标识；

⑤贴封条，并保持到高

压灭菌结束；

⑥安全运输到高压灭

菌处。36/7636生物性废弃物消毒目标

经过去除或降低生物有害因子，来确保转送物件或材料安全性。化学法——高效消毒剂，足够作用时间；

②

物理法——干烤、压力蒸汽；

③

焚烧；

④

其它方法，如破碎+化学；消毒方法37/7637惯用去除污染程序洗手既保护操作者，又预防危险物经过污染手而带出试验室。戴手套不能代替洗手。手套可能会有不易觉察破损，脱手套时也可能污染到手。从试验室出来时，要在出口处摘下手套并洗手。38/7638固体废弃物BSL-2及以上试验室产生不回收固体废弃物（放射性除外）要先高压灭菌后再焚烧处理，BSL-1试验室废弃物可直接送出焚烧。39/7639液体废弃物搜集后用高压灭菌或化学法去污染后再排放。40/7640移液器TIP有TIP比较尖锐，在BSL-2及以上试验室中，应采取一定办法预防刺破高压袋，危及后续试验室废弃物处理人员，如放到一个塑料或金属有盖盒子里。41/7641利器利器包含注射器、解剖刀等。试验室要将利器使用量降到最低。使用后利器要放到专用可防刺破利器盒里，注射器不要重新盖帽，不要折断、剪断，完整注射器放到利器盒中，不要拆下针头。利器盒不要装满，装到3/4满时，扣上盖子，先高压后焚烧。利器盒任何情况下都不要扔到普通垃圾里。绝不能用硬纸盒代替专用利器盒。42/7642设备去除污染当BSL—2及以上设备需拿出试验室维护或报废时，要先去除污染，依据仪器设备特征选择表面消毒、高压或薰蒸方法。43/7643房间去除污染当试验室发生大范围污染或更换操作微生物种类时，或要暂时关闭时，要去除污染，可采取甲醛薰蒸或其它权威部门推荐方法。44/7644三、HIV试验室十条安全操作和防护办法（一）HIV试验室安全感认识1.试验室安全教授针对设备和试验室进行安全性评定，并提出改进意见。2.检验安全标准操作规程（S-SOP），这些规程应适合用于现有条件，并与其它规则和操作过程相一致。试验室管理人员应确保工作人员和参观人员了解这些安全要求。3.不论是否有意外发生和新危险出现，均要定时对安全标准操作规程及实施情况进行检验。45/7645（二）尽可能降低利器使用

利器包含注射器、针头、刀片、玻璃器皿、载玻片等，它们在接触传染性材料后非常危险，应用时需尤其小心。假如有可能最好不要在HIV试验室使用这些利器或使用替换品，如塑料移液管。

46/7646（三）严格而又不停更新培训

全部工作人员都必须经过培训（包含上岗培训和复训），并要接收试验室管理人员监督，试验室上级教授要对工作安全及整齐安全工作环境负责，全部工作人员都有责任确保自己和他人工作安全。

47/7647（四）高标准个人保健1、高标准个人保健对于降低感染危险性很主要。皮肤受损、患病都会增加感染危险性。2、很小伤口和擦伤都应以防水敷料覆盖。3、患有急性疾病和严重慢性疾病工作人员不应进入P3试验室。4、在进入HIV检测试验室时，要穿侧面和后面能系紧隔离衣，戴一次性手套，如接触物传染性危险大，可戴两付手套以增加保护。5、进试验室前要摘除首饰，修剪长、带刺手指甲，以免刺破手套。48/76486、在脱去隔离衣、离开试验室前必须洗手。7、在试验室工作人员应尽可能防止用可能已受到污染手套触摸面部。8、在有危险化学品溅出或爆炸可能时，应配戴安全眼镜和面罩，比如把样品管移出液氮时。9、禁止在HIV和相关试验室用嘴吸收液体。禁止在试验室内吃、喝、吸烟。10、HIV检测试验室工作人员应享受职业安全保险。11、HIV检测试验室工作人员一旦因工作中意外事故可能造成感染时，国家将按《HIV职业暴露安全药品贮备库和贮备点实施方案》（年5月）相关要求为其提供无偿抗病毒药品治疗。49/7649（五）清楚在试验室区域人员1、试验室主任和设备管理者应了解全部些人员。在安排新工作人员试验室区域时，要依据其工作种类和所包括生物试剂，对试验室环境做安全检验。2、严格执行试验室工作人员年度采血检测HIV抗体和立案制度。3、全部工作人员应佩戴一目了然标志。包含照片、姓名和在岗使用期。4、来访客人应分发身份标牌，对于陪同人员和进出清洁工也应和正常工作人员一样佩戴醒目标标志。50/76501、试验室和动物室应与公共建筑分开。2、试验室和动物室应一直上锁。3、进入试验室和动物室应持钥匙卡或类似装置。4、全部进入试验室人员（包含来访者、维护工人、修理工和其它只进入一次或偶然进入人员）都应作统计，能够持钥匙卡或在统计本上署名。（六）监控存放生物试剂和有毒物区域51/76515、只有要求工人工作时才能允许其在试验室内，他们在需要和要求地点和时间内进行。同时，工作人员工作时要限制学生、来访者、清洁工、维护人员及修理工入内。6、冷藏柜、冰箱、培养箱和存放生物试剂、化学危险品、放射性物质容器置于工作人员视线之外地点时应上锁。7、应设有专门储存阳性血低温冰柜，并应上锁。52/76521、全部带入试验室包裹都应经过检验（眼看/X线照射）。

2、装有样品、细菌或病毒株及有毒物包裹应在安全柜或其它适当消毒装置内打开。

（七）了解带入试验室物品53/7653

感染性样品处理接收者:（1）全部带入试验室包裹都应经过检验（眼看和/或X线照射），泄漏包裹必须马上汇报相关领导和教授。（2）尽管感染性材料应该有适当包装并有醒目标标识，但实际工作中依然有可能收到没有适当包装和标识材料。应按潜在感染性材料处理。（3）感染性包裹应该送到适当试验室，在实验室污染区或操作台内打开，不能在收发地点、运输途中、仓库和办公室等地点打开。54/7654（4）包裹必须在以下情况下才能打开：a)在处理感染源方面受过训练工作人员，b)含有处理感染源设备试验室，c)穿戴保护衣工作人员，d)在用后可消毒容器中。（5）包有样品、细菌或病毒株及有毒物包裹应在安全柜或其它适当消毒装置内打开。感染性样品处理55/76551、在将HIV相关样品或物品转移到其它试验室时应单独打包装，并在适当地方按地方或国际通用规则作标识。2、转移这些生物活性材料时要携带通行证。3、护送者应了解接收者，并努力确保这些材料被转入安全装置，得到安全处理。4、污染材料或可能造成污染材料在被带出试验室前应进行消毒。（八）将物品带出试验室时要确保安全56/7656发放者:（1）在转移一些生物活化学材料时要携带通行证。（2）全部感染性材料必须清楚地标识为感染性。（3）生物材料/有毒物在转到其它试验室时应打包装，并在适当地方按地方或国际通用规则作标识。（4）感染性材料必须放在密闭管子中，后者放在生物危险罐中，罐里含有足够吸收材料，以防泄露。

感染性样品处理57/7657（5）每一包装体积不得超出50ml。（6）全部发放第二类病原微生物必须有统计。（7）准备应急包：吸附材料，消毒液，手套等（8）污染材料或可能造成污染材料在被带出实验室前应进行消毒。感染性样品处理58/7658

运输者:（1）护送者应了解接收者，并努力确保这些材料被转入安全装置，得到安全处理。（2）不宜手提装有微生物材料和有毒物装置。假如普通携带者手提这些生物材料或危险物应该有一些适用防护方法。（应急包）感染性样品处理59/76591、在处理紧急事件计划中要包含设备管理员、试验室主任、调查员、试验室工作人员、设备安全员和设备安全官员。2、要依据试验室应用生物材料种类通知警察、消防员和其它紧急事件处理者，以帮助他们制订紧急事件发生时处理方案。3、计划中要有在紧急事件发生时通知试验室主任、试验室工作人员、安全官员条款，方便他们在生物安全发生问题时做出处理。（九）建立应付突发事件办法60/76604、试验室紧急处理计划要广泛灵活。在制订计划时还要考虑到包含炸弹威胁、严重天气情况（飓风、洪水）、地震、停电及自然（或非自然）灾害原因。5、试验室主任和设备安全员要按照《HIV职业暴露安全药品贮备和贮备点实施方案》要求统计处理和按期汇报突发事件以及所发生意外职业暴露。61/7661

消毒不能代替灭菌或整个清洁活动,消毒通常被用作表面清洁或作为使用前做安全工作。主要采取消毒方法以下:1、化学消毒2、熏蒸消毒3、高压蒸汽消毒（高压消毒）

（十）掌握有效消毒方法62/7662不一样温度对HIV活性降低

10倍所需时间63/766364/7664工作人员发生意外事故时，如针刺损伤、感染性标本溅及体表或口鼻眼内，或污染试验台面等均视为安全事故，应马上进行紧急处理。（一）紧急处理：依据事故情况采取对应处理方法1、小型事故：任何一个小损伤，包含皮肤破损或刺伤等都可能与传染性物质接触，必须用肥皂和水冲洗，假如可能尽可能挤出损伤处血液，使用70%乙醇或其它皮肤消毒剂，马上进行医疗处理；四、试验室安全事故处理65/76652、皮肤污染：皮肤污染部位用水和肥皂冲洗，并用适当消毒剂浸泡，比如，70%乙醇或皮肤消毒剂（外科用药）.3、针刺和切割伤：怀疑皮肤有损伤或针刺时，提议尽可能挤压伤口，然后用大量水冲洗.4、眼睛溅入液体：眼睛溅入液体，马上用水冲洗。必须快速。防止揉擦眼睛。连续冲洗最少十分钟.66/7666（1）尽快脱掉隔离衣以预防感染物触及皮肤并预防深入扩散。脱掉防护手套。洗手并更换隔离衣及手套.（2）将已污染隔离衣及手套放入高压灭菌器.（3）清剪发生污染地方及放置隔离衣地方.（4）假如个人衣物被污染，应马上将污染处浸入消毒剂.（5）应马上寻求帮助，抛弃已污染衣物并更换洁净衣物或一次性衣物。5、衣物污染:67/76676、重大事故：指是严重损伤或暴露。皮肤受损处理同上。试验室重大损失及泼溅，应按下述第7项马上行动起来，主管领导和教授到场并提供指导。全部事故和意外必须统计在事故登记簿和意外事故/危险登记簿上，这些统计本必须由单位保留立案。68/76687、包括污染物重大损伤及泼溅当感染性培养物泼溅出来后，气溶胶会造成最大危害；发生泼溅事故后应马上采取办法保护易污染物质；假如怀疑有严重事故，应按较严重情况处理并采取以下办法：（1）污染处疏散人员，但要预防污染扩散；（2）控制污染—-锁门并预防深入进入；（3）通知试验室主管领导、安全责任人，方便查清情况，确定消毒程序；（4）假如认为适当，可进行生物安全柜和/或试验室熏蒸消毒；（5）消毒：发生溢出后应离开房间约30分钟。69/76691、向主管领导及相关教授汇报（1）重大事故在紧急处理同时要马上向主管领导和相关教授汇报，主管领导和教授要马上到现场对处理方法详细指导，并马上向地域性抗HIV安全药品贮备库汇报，力争在暴露后最短时间内（二十四小时以内）开始预防性治疗，并同时抽血检测抗HIV，该血清留样备用。暴露一年内要定时检测HIV抗体（6周、12周、6个月、12个月）安全事故汇报和检测70/7670（2）小型事故可在紧急处理后马上将事故情况和处理方法一并汇报主管领导和教授，以及时发觉处理中疏漏之处，使处理尽可能完善妥当。不一定进行预防性治疗，但要定时检测HIV抗体，检测时间同前。

71/76712、向卫生部性病艾滋病预防控制中心汇报每年6、12月底，