高考生物大一轮复习资料第49课时市公开课一等奖百校联赛优质课金奖名师赛课获奖课件

第49课时植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术考点一植物组织培养1.试验操作流程（1）配制培养基：加琼脂溶化加蔗糖、各种母液→调pH→分装。惯用植物组织培养基为MS

培养基，培养基配制好后要进行高压蒸汽灭菌。高频考点突破1/78（2）外植体消毒：外植体通常先用体积分数为70%酒精消毒，再用质量分数为0.1%氯化汞溶液消毒，最终无菌水清洗。（3）接种：要在超净工作台上而且要在酒精灯火焰附近操作。（4）培养。（5）移栽。（6）栽培。2/782.菊花茎组织培养和月季花药培养比较（1）相同点①理论基础：植物细胞全能性。②基本过程：脱分化→再分化→试管苗。③影响原因：营养、激素、pH、温度、光照等。（2）不一样点菊花茎组织培养月季花药培养材料选取未开花植株茎上部新萌生侧枝通常选择完全未开放花蕾光照情况每日用日光灯照12h开始不需光照，幼小植株形成后才需光照3/78 ①材料选取：菊花组织培养试验中，应选择未开花植株茎上部新萌生侧枝，该部分不但分生能力强，而且无病毒侵染。月季花药培养试验中，应选择花粉发育过程中单核靠边期花药进行培养，且在花蕾期，因为此时质地幼嫩，花瓣未开，微生物不易侵入，轻易消毒。操作流程制备培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育结果正常植株单倍体植株提醒4/78②剥离花药时，尽可能不要损伤花药，同时还要彻底去除花丝，预防对试验产生干扰。③外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%酒精和质量分数为0.1%氯化汞溶液，所使用清洗液是无菌水。④培养过程：在早期，菊花组织培养需光照，月季花药培养不需光照，而在后期均需光照。5/783.影响植物组织培养原因（1）材料：植物种类、材料年纪和保留时间长短等都会影响试验结果。普通来说，轻易进行无性繁殖植物轻易进行组织培养。嫩枝生理状态好，轻易诱导脱分化和再分化。（2）营养：惯用培养基是MS培养基，其中含有大量元素是N、P、S、K、Ca、Mg，微量元素是Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co，有机物有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。（3）激素：在培养基中需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素，其浓度、使用先后次序、用量百分比等都影响结果。6/78激素使用先后次序及其用量百分比对细胞分裂和分化影响以下表：使用次序试验结果先生长素，后细胞分裂素有利于分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提升7/78（4）环境条件：pH、温度、光等环境条件。如菊花组培所需pH为5.8，温度为18~22℃，光照条件为每日用日光灯照射12小时。生长素/细胞分裂素比值与结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长8/78对位训练1.植物细胞表现出全能性必要条件是（）A.导入其它植物细胞基因B.将成熟筛管细胞核移植到去核卵细胞内C.用适当浓度秋水仙素处理D.脱离母体后，给予适宜营养和外界条件D9/782.影响植物组织培养原因包含 （）①培养基配制②外植体选取③激素应用④消毒⑤温度、pH、光照A.①②③④⑤ B.①②③C.①②③④ D.①②③⑤A10/78考点二DNA粗提取与判定1.原理、方法和目标基本原理方法目标DNA在不一样浓度NaCl溶液中溶解度不一样，在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低溶于NaCl溶液中并稀释①NaCl溶液为2mol/L时，DNA溶解，而部分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质及不溶于NaCl溶液杂质②当NaCl溶液稀释至0.14mol/L时，DNA析出，过滤可除去溶于NaCl中部分蛋白质和其它杂质11/78DNA不被蛋白酶所水解加入嫩肉粉嫩肉粉中含木瓜蛋白酶，水解蛋白质DNA不溶于酒精溶液加入冷却酒精（95%）DNA析出，除去溶于酒精蛋白质DNA可被二苯胺染成蓝色加入二苯胺，并沸水浴判定DNA12/782.试验材料（1）动物（2）植物：新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。

人和哺乳动物成熟红细胞中不含细胞核,也没有DNA，不适于作DNA提取材料，但却是提取血红蛋白理想材料。鸡血红细胞、白细胞中都有细胞核，含大量DNA既经济又易取鸡血细胞液优点提醒13/783.试验步骤及注意事项（1）步骤：提取血细胞核物质（蒸馏水涨破）→溶解（2mol/LNaCl）→过滤（除杂质）→析出（滴蒸馏水，降NaCl浓度至0.14mol/L）→过滤→再溶解（2mol/LNaCl）→过滤→深入提纯（体积分数为95%冷却酒精）→判定。14/78（2）判定比较加入物质结果图示实验组均加入：①4mL二苯胺试剂②2mol/LNaCl溶液5mL丝状物(DNA)溶液逐步变蓝对照组——不变蓝15/78（3）注意事项①制备鸡血细胞液时，要在取鸡血同时加入柠檬酸钠，静置后上层是血清，下层为所需要血细胞。②两次加蒸馏水目标不一样。③判定DNA时需沸水浴加热。16/78对位训练3.相对于细菌分离，而DNA分子分离和提取操作要复杂多。（1）在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目标分别是

。（2）试验中能否以哺乳动物成熟红细胞为试验材料？为何？

。使血细胞破裂，释放出DNA分子、稀释NaCl溶液，使DNA分子析出不能，哺乳动物成熟红细胞中无DNA分子17/78考点三PCR扩增技术与体内DNA复制1.PCR反应过程（1）变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA

解旋为单链，以下列图：（2）复性：温度下降到50℃左右，两种引物经过碱基互补配对与两条单链DNA结合，以下列图：18/78（3）延伸：温度上升到72℃左右，溶液中四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶作用下，依据碱基互补配对标准合成新DNA链，以下列图：19/782.PCR扩增技术和DNA复制比较DNA复制PCR扩增技术场所细胞核内生物体外原理碱基互补配对碱基互补配对酶DNA聚合酶、解旋酶耐热DNA聚合酶（Taq酶）条件模板、ATP、引物链（RNA）、常温模板、ATP、引物链（DNA及RNA片段）、温度改变（90~95℃→55~60℃→70~75℃）原料四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸特点形成是整个DNA分子，一个细胞周期只复制一次短时间内形成大量目标基因DNA片段，呈指数增加——2n20/78对位训练4.标准PCR过程普通分为变性、复性、延伸三大步，这三大步需要温度依次是 （）A.92℃、50℃、72℃B.72℃、50℃、92℃C.50℃、92℃、72℃D.80℃、50℃、72℃A21/785.引物作用是 （）A.打开DNA双链B.催化合成DNA子链C.使DNA聚合酶能够从引物3′端开始复制D.提供模板C22/78考点四血红蛋白提取和分离1.蛋白质分离依据蛋白质各种特征差异，如分子形状和大小、所带电荷性质和多少、溶解度、吸附性质和对其它分子亲和力等，能够用来提取和分离不一样种类蛋白质。23/782.方法及原理（1）凝胶色谱法原理

蛋白质比较相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下垂直向下和无规则扩散运动经过旅程较短较长洗脱次序先流出后流出24/78提醒

凝胶色谱柱直径大小不影响分离效果，但直径过大造成洗脱液体积大，样品稀释度大；凝胶色谱柱高度与分离度相关。（2）凝胶电泳法原理凝胶电泳法原理是不一样蛋白质带电性质、电量、形状和大小不一样，在电场中受到作用力大小、方向、阻力不一样，造成不一样蛋白质在电场中运动方向和运动速度不一样。以下表：25/78决定运动方向形成库仑力形成阻力决定运动速率电荷性质√电荷量√√分子形状√√分子大小√√26/783.试验操作流程样品处理红细胞洗涤——离心去除血清释放血红蛋白——蒸馏水涨破分离血红蛋白——离心处理粗分离——透析（去除小分子杂质）纯化——凝胶色谱法进行分离和纯化纯度判定——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定相对分子量27/78提醒①红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，不然无法除去血浆蛋白；离心时转速要低，时间要短，不然白细胞等会一同沉淀，达不到分离效果。②血红蛋白释放过程中，蒸馏水作用是涨破红细胞，甲苯作用主要是溶解细胞膜。③为了加紧干凝胶膨胀，可将加入洗脱液湿凝胶用沸水浴加热，逐步升温至靠近沸腾，通常只需1～2h。这种方法不但节约时间，而且能够除去凝胶中可能带有微生物，排除胶粒内空气。④滴加样品时，吸管管口要贴着管壁围绕移动，预防破坏凝胶面。28/78对位训练6.为了提取血红蛋白，从学校附近屠宰场索取新鲜猪血，对猪血处理正确操作是 （）A.要在采血容器中预先加入抗凝血剂柠檬酸钠B.取血回来后，马上进行高速长时间离心C.将离心后血细胞加入清水迟缓搅拌D.重复洗涤直到上清液呈红色为止A29/787.洗涤红细胞时，离心所用方法为 （）A.低速长时间离心B.低速短时间离心C.高速长时间离心D.高速短时间离心B30/78思维误区警示易错分析

对DNA和蛋白质提取与分离原理不清楚（1）DNA溶解度与NaCl浓度关系（2）两次蒸馏水目标不一样：第1次是使红细胞吸水涨破；第2次是降低NaCl浓度，析出DNA。解题思绪探究31/78（3）血红蛋白分离方法及相关原理方法原理凝胶色谱法依据相对分子质量大小分离蛋白质电泳法依据各种分子带电性质差异以及分子本身大小、形状不一样进行分离32/781.（·江苏卷，18）以下叙述中错误是()A.改变NaCl溶液浓度只能使DNA溶解而不能使其析出B.在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会展现蓝色C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同蛋白质D.用透析法可去除蛋白质样品中小分子物质纠正训练33/78解析

在不一样浓度氯化钠溶液中DNA溶解度不同，在0.14mol/L氯化钠溶液中溶解度最小,DNA析出,呈丝状物,过滤后存在于黏稠物中;在2mol/L氯化钠溶液中溶解度最大，所以DNA呈溶解状态，过滤后存在于滤液中。答案A34/782.使用凝胶色谱法分离蛋白质试验中，相对分子质量不同蛋白质在凝胶中行进过程，可表示为图中（）B35/78知识综合应用重点提醒

经过“植物组织培养及题干中信息分析推断”考查，提升“判别选择试题给出相关生物信息，并能利用这些信息，结合所学知识处理相关生物学问题”能力。36/78典例分析（·上海卷，36）回答以下相关植物组织培养问题。（1）用于植物组织培养植物材料称为

。（2）组织培养中细胞，从分化状态转变为未分化状态过程称为

。37/78（3）在再分化阶段所用培养基中，含有植物激素X和植物激素Y。逐步改变培养基中这两种植物激素浓度比，未分化细胞群改变情况以下列图所表示。据图指出两种激素不一样浓度比与形成芽、根、愈伤组织关系：

38/78①当植物激素X与植物激素Y浓度比等于1时,

；②

；③

。（4）若植物激素Y是生长素，在植物组织培养中其主要作用是

；则植物激素X名称是

。（5）生产上用试管苗保留植物优良性状，其原因是

。39/78

解析（1）植物组织培养时所取材料称为外植体。（2）让已经分化细胞，经过诱导后，失去其特有结构和功效而转变成未分化细胞过程，称为脱分化。（3）据图可得当激素X与激素Y浓度比为1时，未分化细胞群形成愈伤组织；当激素X与激素Y浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽；当激素X与激素Y浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根。（4）生长素作用是促进细胞生长、分裂和分化；激素X能促进细胞分裂，是细胞分裂素。（5）试管苗为无性繁殖系，能够保持亲本一切性状，不发生性状分离。40/78答案（1）外植体（2）去分化（脱分化）（3）①未分化细胞群经分裂形成愈伤组织②当植物激素X与植物激素Y浓度比大于1时，未分化细胞群分化形成芽③当植物激素X与植物激素Y浓度比小于1时，未分化细胞群分化形成根（4）促进细胞生长（伸长）、分裂和分化细胞分裂素（5）组织培养形成试管苗过程属于无性生殖，后代不发生性状分离41/781.（·山东理综，34）人参是一个名贵中药材，其有效成份主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷大致流程以下：定时检测42/78请回答：（1）配制诱导愈伤组织固体培养基,分装后要进行

。接种前，要对人参根进行

。（2）用于离体培养根切块，叫做

。培养几天后发觉少数培养基被污染，若是有颜色绒毛状菌落，属于

污染；若是有光泽黏液状菌落，属于

污染。（3）用少许

酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提升人参皂苷合成量。（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选取

方法，操作时应采取

加热。43/78解析

(1)灭菌是指用强烈物理或化学方法，杀死物体内外一切微生物，包含芽孢和孢子。消毒指使用较为温和物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害微生物。在组织培养过程中要预防杂菌污染，需要对固体培养基进行灭菌，对人参根进行消毒。（2）用于离体培养离体植物组织或器官（根切块）称为外植体。单个或少数微生物细胞生长繁殖后，会形成以母细胞为中心一堆肉眼可见、有一定形态结构子细胞集团，这就是菌落。我们能够依据菌落特征判断微生物种类。霉菌菌落较大，肉眼可见许多毛状物，呈棕色、青色等，细菌菌落常表现为湿润、黏稠，有光泽。44/78（3）果胶酶能够分解果胶，瓦解植物细胞壁和胞间层，使愈伤组织分离。（4）人参皂苷溶于水溶性有机溶剂，能够用萃取法从培养物干粉中提取。萃取时要采取水浴加热，这是因为有机溶剂都是易燃物，用明火加热轻易引发燃烧、爆炸。

答案（1）灭菌消毒（2）外植体真菌（霉菌）细菌（3）果胶（4）萃取(浸取)水浴45/782.下列图是月季花药离体培养产生花粉植株两种途径，请据图回答相关问题：

（1）选取材料适当是否是成功诱导出花粉植株主要原因，普通来说选取

期花粉可提高成功率。选择花粉时，普通要经过

来确定花粉是否处于适当发育期，这时需要对花粉细胞核进行染色，惯用染色剂是

。46/78（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中

。（3）胚状体与愈伤组织在结构上主要区分在于愈伤组织细胞排列疏松无规则，是一个高度

薄壁细胞。胚状体与

发育形成胚有类似结构，即含有胚芽、胚轴和胚根。（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株主要原因，请说明以下各项需要消毒，还是需要灭菌。47/78①培养基，②培养皿，③接种环，④花蕾，⑤试验操作者双手，⑥三角锥形瓶。

(填编号)需要灭菌,

（填编号）需要消毒。（5）试管苗移栽到土壤前，通常要进行壮苗处理，应怎样壮苗？

。48/78解析（1）并不是任何时期花粉都能够培养产生愈伤组织或胚状体，只有花粉发育到一定时期对离体刺激才最敏感。对大多数植物而言，单核中期至晚期花粉最轻易形成花粉胚或花粉愈伤组织。在培养花药之前，通惯用醋酸洋红染色制片法制片镜检以确定花粉发育时期。（2）花药培养产生花粉植株普通有两种路径：其一是花药中花粉经过胚状体阶段发育为小植株；其二是花药中花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再诱导其分化成植株。两种路径并无绝对界限，主要取决于培养基中激素种类及其浓度配比。（3）愈伤组织是一团高度液49/78泡化薄壁细胞，植物组织培养得到胚状体与正常受精卵发育成胚都有胚芽、胚根和胚轴。（4）灭菌是用理化方法杀死环境中全部微生物细胞、芽孢和孢子。消毒是杀死物体表面病原微生物。在微生物培养过程中通常对培养基、培养皿、接种环、三角锥形瓶，进行灭菌处理；对花蕾、试验操作者双手进行消毒处理。50/78答案（1）单核镜检（显微镜观察）醋酸洋红（2）激素种类及其浓度配比（3）液泡化正常受精卵（或受精卵）（4）①②③⑥④⑤（5）将试管苗移栽到经消毒过培养基中生活一段时间，等幼苗长壮后再移栽到土壤中51/783.下列图为“DNA粗提取与判定”试验装置，请回答下列问题。52/78（1）试验材料选取鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是鸡血细胞液中

含量较高。（2）在图A所表示试验步骤中加蒸馏水20mL目标是

，经过

图B所表示步骤取得滤液,再在滤液中加入2mol/L

NaCl溶液目标是

；图C所表示试验步骤中加蒸馏水目标是

。（3）为判定试验所得丝状物主要成份是DNA，可滴加

溶液，结果丝状物被染成绿色。53/78（4）a试管为对照组，b试管为试验组。①a试管现象

；b试管现象

。②在沸水中加热目标是

，同时说明DNA对高温有较强

。③a试管在试验中作用是

。④b试管中溶液颜色改变程度主要与相关

。54/78解析“DNA粗提取与判定”试验材料选取鸡血细胞液，而不用鸡全血，主要原因是DNA主要储存于细胞核内，而不在血浆内，使用鸡血细胞液提升材料中细胞数量和DNA含量，从而能够确保试验提取到DNA数量。图A、B、C所表示为本试验三个关键步骤。图A经过添加蒸馏水，血细胞与蒸馏水相混合而使血细胞处于极低浓度溶液中，细胞因大量吸水而造成最终破裂，并释放出胞内物。图B经过纱布过滤使血细胞释放出DNA滤入搜集滤液中（将大量胶状物滤出），再在滤液中加入2mol/LNaCl溶液使DNA溶解度增加。图C在DNA浓盐溶55/78液中加入蒸馏水（大量），可使溶液NaCl浓度降至较底，因为DNA在较低浓度NaCl溶液中溶解度很低（在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最低，浓度再变小则DNA溶解度将增大），使DNA析出，经过滤等伎俩能够搜集到DNA。甲基绿为比较惯用细胞核染色剂，染色后细胞核中染色体呈绿色，属碱性染料，能够用来判定DNA。56/78答案

（1）DNA（2）使血细胞吸水涨破，放出DNA使滤液中DNA溶于浓盐溶液使DNA析出（3）甲基绿（4）①溶液不变蓝溶液变蓝②加紧颜色反应速度耐受性③对照④加入DNA（丝状物）多少57/784.年5月20日民政部等制订汶川大地震遇难人员遗体处理意见指出，无法确认遇难者身份，由公安部门提取可供DNA检验检材方便事后身份识别。事后遗体识别可借助于DNA杂交技术，即从遗体细胞与死者家眷提供死者生前生活用具中分别提取DNA，然后借助DNA杂交技术对遗体进行确认。据此回答：（1）为了确保识别准确性，需要克隆出较多

DNA样品。这需借助PCR技术。使用PCR技术详细试验操作次序是：58/78按配方准备好各组分→→离心使反应液集中在离心管底部→设计好PCR仪循环程序→进行PCR反应。请写出图中方框步骤:

，该步操作应尤其注意问题是

。59/78（2）上表所表示为分别从死者遗体和死者生前生活用具中提取三条相同染色体上同一区段DNA单链碱基序列，依据碱基互补配对情况进行判断，A、B、C三组DNA中不是同一人是

。（3）为何从死者体细胞与死者家眷提供其生前生活用具中分别提取DNA能够完全互补配对？

。60/78解析

PCR技术是一个体外快速扩增DNA片段技术，它能以极少许DNA为模板，在几小时内复制出上百万份DNA拷贝。这项技术有效地处理了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究问题，被广泛地应用于遗传疾病诊疗、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等领域。DNA杂交技术方法是从遗体细胞和死者家眷提供死者生前生活用具中分别提取DNA，在一定温度下，水浴共热，使DNA氢键断裂，双链打开。若两份DNA样原来自同一个体，在温度降低时，两份样61/78本中DNA单链经过氢键连接在一起，若不是来自同一个体，则两份样本中DNA单链在一定程度上不能互补，DNA杂交技术就是经过这一过程对面目全非死者进行识别。答案（1）用微量移液器在微量离心管中依次加入各组分PCR试验使用微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压灭菌（2）B、C（3）人体全部体细胞均由一个受精卵有丝分裂产生，其细胞核中均含有相同遗传物质62/785.对血红蛋白（Hb）研究结果表明，血红蛋白实际上是由珠蛋白、原卟琳和二价铁离子（Fe2+）所组成结合蛋白质，由4条肽链各结合一个辅基即血红素，O2结合于Fe2+上，血红蛋白与氧疏松结合形成氧合血红蛋白（HbO2）,这种氧合作用在氧分压高时容易进行，在氧分压低时易于解离。红细胞结合和携带O2过程并不影响Fe2+，也就是说不会使之氧化为Fe3+。Fe3+无携带O2能力。CO与Hb亲和力大于O2，结合成HbCO后不能分离，致使Hb丧失运输O2和CO2机能，这称为一氧化碳中毒即煤气中毒。63/78（1）用凝胶色谱法分离血红蛋白时，待

接近色谱柱底端时，才用试管搜集。血红蛋白因含

而展现红色。（2）要使血红蛋白从红细胞中释放出来，可选取方法是

。（3）红细胞含有运输氧功效，是因为

。（4）亚硝酸盐为强氧化剂，进入人体后，可使血红蛋白失去运输氧功效，造成人体组织缺氧，其可能原因是

。64/78解析用凝胶色谱法分离血红蛋白时，血红蛋白因含血红素而展现红色，待红色区带靠近色谱柱底端时，才用试管搜集。将红细胞置于蒸馏水中,加40%体积甲苯，搅拌使红细胞破裂并释放出血红蛋白。红细胞中血红蛋白与氧在氧分压高时轻易结合，在氧分压低时又轻易分离。亚硝酸盐可将血细胞中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，从而使其失去与氧结合能力。65/78答案

（1）红色区带血红素（2）将红细胞置于蒸馏水中，加40%体积甲苯，搅拌使之破裂并释放血红蛋白（3）红细胞中血红蛋白与氧在氧分压高时轻易结合，在氧分压低时又轻易分离（4）亚硝酸盐可使血细胞中低铁血红蛋白氧化成高铁血红蛋白66/786.PCR（多聚酶链式反应）技术是一项在生物体外复制特定DNA片段核酸合成技术，下列图表示合成过程，请据图分析回答：（1）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程原理叙述，正确是

。A.该过程用到耐高温解旋酶破坏氢键B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键C.该过程不需要解旋酶作用D.该过程与人体细胞过程完全相同67/78（2）C过程要用到酶是。这种酶在高温下仍保持活性，所以在PCR扩增时能够

加入,

（需要/不需要）再添加。PCR反应除提供酶外，还需要满足基本条件有:

。（3）假如把模板DNA两条链用15N标识，游离脱氧核苷酸不做标识，控制“94℃~55℃~72℃”温度循环3次，则在形成子代DNA中含有15N标识

DNA占

。（4）假如模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸个

。68/78（5）PCR中由碱基错配引发变异属于

。假设对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，则扩增若干次后检测所用DNA扩增片段，与原DNA对应片段相同占

。解析（1）高温所起作用类似于解旋酶，使双链DNA变为单链。（2）C过程为PCR技术延伸阶段，当系统温度上升至72℃左右，溶液中四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶作用下合成新DNA链。TaqDNA聚合酶是耐热，高温下不变性，所以一次性加入即可。（3）PCR技术遵照半保留复制特69/78点。经过三次循环，共产生23个DNA分子，其中有2个DNA分子含有15N标识。（4）在一个双链DNA分子中，C+T占碱基总数二分之一，故T数目为a-m，复制10次，相当于新增加了210-1个DNA分子。故需补充T数目为（210-1）（a-m）。（5）基因中碱基对改变属于基因突变。对一个DNA进行扩增，第一次循环时某一条模板链上发生碱基错配，以后按正常配对方式进行扩增，错配链作模板扩增都是错误DNA分子，原正常链扩增得到DNA分子都是正常DNA分子，故若干次后检测所用DNA扩增片段，与原DNA对应片段相同占3/4。70/78答案（1）C（2）TaqDNA聚合酶一次不需要DNA模板，分别与两条模板链相结合两种引物，四种脱氧核苷酸，同时经过控制温度使DNA复制在体外重复进行（3）25%（4）（210-1）（a-m）（5）基因突变75%71/787.红细胞含有大量血红蛋白，红细胞机能主要是由血红蛋白完成,血红蛋白主要功效是携带O2

或CO2，我们能够选取猪、牛、羊或其它脊椎动物血液进行试验，来提取和分离血红蛋白，请回答以下相关问题：（1）血红蛋白提取和分离程序可分为四步:

、

、