第四章 药物定量分析与分析方法验证

第四章药物定量

分析与分析方法验证第一节常用的定量分析方法常用的含量测定方法

化学分析法仪器分析法生物学方法酶化学方法容量分析法

经典化学分析

重量分析法

现代仪器分析技术

光谱分析法

色谱分析法

电化学分析法

容量分析法（滴定分析法）

酸碱滴定法

氧化还原滴定法

配位滴定法沉淀滴定法

非水溶液滴定法

一、容量分析法

容量分析法用于常量组分测定。虽专属性不高，但由于其具有准确度较高（一般相对误差可达0.2%以下）、精密度好、仪器设备简单、试验成本低及操作简便、快速等优点，广泛用于原料药的含量测定。化学原料药含量测定首选。

（一）容量分析法的特点（二）容量分析法的计算1.滴定度2.百分含量的计算原料药滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数，mg/ml滴定液浓度，mol/L被测物的摩尔质量，g/mol1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常体现为反应摩尔比，即1∶n。（1）原料药，直接滴定法含量测定结果的计算：

滴定时，供试品消耗滴定液的体积，ml浓度校正因子供试品的质量，g。（2）原料药，直接滴定法，有空白校正的计算：

滴定时，空白消耗滴定液的体积，ml（3）原料药，剩余滴定法，有空白试验，含量测定结果的计算：

光谱分析法

紫外—可见分光光度法UV—Vis原子吸收分光光度法AAS荧光分析法

二、光谱分析法（一）紫外—可见分光光度法

根据物质对波长为200～760nm这一范围的光吸收特性建立起来的一种定性、定量和结构分析的方法。

1.基本原理

物质对单色光吸收强弱与吸光物质浓度、液层厚度关系定律

（1）Lambert-Beer定律（2）吸收系数

C以“g/100ml”为单位的吸收系数。

其物理意义为：当吸光物质溶液浓度为1%（1g/100ml），液层厚度为1cm时的吸光度。百分吸收系数摩尔吸收系数

C以“mol/L”为单位的吸收系数。

（1）定期全面检定（2）测定前对波长进行校正汞灯、氘灯、钬玻璃2.仪器的校正和检定（3）吸光度准确度的检定重铬酸钾的硫酸溶液（4）杂散光碘化钠和亚硝酸钠3.吸光度的测定方法（1）对溶剂的要求（2）测定波长的确证紫外—可见分光光度法测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池，在规定的吸收峰波长±2nm以内测试几个点的吸光度，或由仪器在规定波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰波长位置是否正确。除另有规定外，吸收峰波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内，并以吸光度最大的波长作为测定波长。

（3）供试品溶液浓度应使测得的吸光度在0.3～0.7之间。4.在含量测定中的应用（1）吸收系数法（绝对法）吸光度百分吸收系数液层厚度，cm，如无特别注明，L=1cm可在手册或文献中查到（2）对照法供试品溶液的吸光度对照品溶液的吸光度供试品溶液的浓度对照品溶液的浓度条件：A.待测物与对照品在相同条件下测定B.待测物与对照品浓度相近（3）计算分光光度法（4）比色法5.百分含量的计算原料药（1）吸收系数法溶液体积ml稀释倍数（2）对照法6.特点

（1）灵敏度高；（2）仪器价格较低廉，操作简便、快速，易于普及；（3）应用广泛；但由于仪器和操作的原因，误差较容量分析法大，原料药尽可能避免使用。

（二）荧光分析法

物质受光照射时，在吸收某种波长光的同时又发射出比原来波长更长的光，激发光停止照射，光线随之消失，这种光称为荧光。荧光为发射光。利用荧光的物理特性进行定性与定量测定的方法称为荧光分析法。1.荧光及荧光分析法2.荧光激发光谱与荧光发射光谱

以荧光发射光波长为横坐标，发射光强度（荧光强度）为纵坐标荧光发射光谱（荧光光谱）荧光激发光谱（激发光谱）

激发光波长为横坐标，发射光强度（荧光强度）为纵坐标3.荧光光度计（1）激发光源汞灯、氙灯（2）单色器两个单色器（3）样品池低荧光玻璃或石英池（4）检测器光电倍增管，在与激发光源成直角的方向检测荧光4.在含量测定中的应用

当激发光强度、波长、所用溶剂及温度等条件一定时，在较稀浓度范围内药物的荧光强度与溶液中该物质的浓度成正比。

对于很稀的溶液，当：

A＝εLC＜0.05时，

荧光强度与被测物浓度间的关系为：R＝2.3k

f

I0ECl即：R=K·C对照品比较法R∝C供试品溶液试剂空白的荧光强度5.特点荧光法最主要的优点是测定灵敏度高，选择性好。

色谱法是利用物质在流动相与固定相两相中色谱行为的差异而得以分离，并在检测中能检出其信号，从而达到分离、分析的一类分析方法。三、色谱法

色谱法是一种物理或物理化学分离分析方法，具有高灵敏度、高选择性、高效能、分析速度快及应用范围广等优点，是分析混合物的最有效手段。色谱法被广泛应用于药品的鉴别、纯度检查和含量测定。《中国药典》将色谱法分为纸色谱法、薄层色谱法、柱色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法及电泳法等。

（一）HPLC

分类（1）液—固吸附色谱法固定相为硅胶等吸附剂、流动相是烷烃作底剂加入适量极性调整剂（2）液—液分配色谱法固定相几乎全是化学键合相

流动相极性小于固定相极性。固定相为氰基或氨基健合硅胶，流动相是烷烃作底剂加入适量极性调整剂，用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质①正相色谱法

流动相极性大于固定相极性。固定相为十八烷基硅烷健合硅胶（ODS或C18柱）或辛烷基硅烷健合硅胶（C8柱），流动相是甲醇—水或乙腈—水，主要用于分离非极性至中等极性的各类分子型化合物②反相色谱法

调整流动相pH值抑制组分解离，用于分离有机弱酸、弱碱

③反相离子对色谱法

流动相中加入离子对试剂，用于分离有机酸、碱、盐④离子抑制色谱法2.对仪器的一般要求

所用的仪器为高效液相色谱仪。常用的色谱柱填充剂有硅胶和化学键合硅胶，后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用。离子交换填充剂，用于离子交换色谱；凝胶或高分子多孔微球等填充剂用于分子排阻色谱等。进样量一般为数微升。除另有规定外，柱温为室温，检测器为紫外检测器。《中国药典》正文中各品种项下规定的条件除固定相种类、流动相组成、检测器类型不得任意改变外，其余均可适当改变，以适应具体色谱系统并达到系统适用性试验的要求。

指用规定的对照品对色谱系统进行试验，应符合要求。包括理论板数（n）、分离度（R）、重复性和拖尾因子（T）等四个指标。3.系统适用性试验（1）理论板数

色谱柱的理论板数越多，柱效越高。（2）分离度药典要求R大于1.5

用对照溶液，连续进样5次，峰面积RSD应≤2.0%；或配制相当于80%、100%、120%的对照液，加入规定的内标，分别进样3次，计算平均校正因子，RSD亦应≤2.0%。

（3）重复性（4）拖尾因子峰高法定量时T应在0.95～1.05之间（1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量方法

内标物+对照品→对照溶液，进样，测定，计算校正因子

3.在含量测定中的应用供试品+内标物→供试品溶液，进样，测定供试品和内标物质的峰面积或峰高，计算含量（2）外标法测定供试品主成分含量供试品→供试品溶液对照品→对照品溶液进样，测定，计算含量

缺点：不易准确控制进样量，宜用定量环进样

HPLC主要用于抗生素、甾体激素、生化药品及含杂质干扰测定的化学药品。广泛用于药物制剂的分析。在药典中收载率呈大幅度上升趋势。

（二）GC以气体作为流动相的色谱法叫气相色谱法。它适用于分离、分析有一定挥发性和热稳定性的化合物。

1.对仪器的一般要求所用的仪器为气相色谱仪。除另有规定外，载气为氮气；色谱柱为填充柱或毛细管柱；进样口温度应高于柱温30～50℃；进样量一般不超过数微升；检测器为氢火焰离子化检测器，检测温度一般高于柱温，并不得低于150℃，以免水气凝结，通常为250～350℃。

正文中各品种项下规定的条件，除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意改变外，其余均可适当改变，以适应具体品种并且符合系统适用性试验的要求。2.系统适用性试验3.测定法（1）内标法加校正因子测定供试品中主成分含量

（2）外标法测定供试品中主成分含量（3）标准溶液加入法测定供试品中主成分含量

精密称（量）取待测成分对照品适量，配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量，精密加入到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定主成分含量，再扣除加入的对照品溶液含量，即得供试品溶液中主成分含量。结构性质（物理、化学性质）分析方法（鉴别、检查、含量测定）醇酚羟基烯醇羟基酚胺芳胺芳伯氨基羧酸芳酸第二节样品的前处理方法（一）含卤素有机药物含卤素有机药物系指药物分子结构中所含卤素直接与芳环或脂肪链相连者，而不包括某些有机药物的卤酸盐或氢卤酸盐结构特点：C—X一、概述1.卤原子的活泼性（1）卤原子与碳原子直接相连，卤原子的活泼性和它直接相连的烃基的结构有很大关系1）乙烯型卤和芳卤不活泼2）烯丙型卤和苄卤活泼3）卤代烷型介于两者之间（2）分子中所含卤原子的个数

分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强，特别是同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显（3）卤素的种类I＞Br＞Cl＞F常见的含卤素有机药物：三氯叔丁醇六氯对二甲苯泛影酸胆影酸碘他拉酸碘番酸碘苯酯I盐酸胺碘酮诺氟沙星醋酸氟轻松磺溴酞钠2.含卤素有机药物的分析经水解后测定法经还原分解后测定法氧瓶燃烧分解后测定法（二）含金属有机药物

含金属的有机药物：金属原子不与碳原子直接相连，通常为有机酸及酚的金属盐或配位化合物如葡萄糖酸钙、葡萄糖酸锑钠、富马酸亚铁

有机金属药物：金属原子直接与碳原子以共价键相连，结合比较牢固如卡巴胂、醋酸苯汞、汞撒利富马酸亚铁葡萄糖酸锑钠卡巴胂醋酸苯汞汞撒利二、不经有机破坏的分析方法（一）直接测定法1.配位滴定法葡萄糖酸钙的含量测定

例：富马酸亚铁的含量测定

Ch.P（2005）取本品约0.3g，精密称定，加稀硫酸15ml，加热溶解后，放冷，加新沸过的冷水50ml与邻二氮菲指示液2滴，立即用硫酸铈滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液(0.1mol/L)相当于16.99mg2.氧化还原滴定法原理Fe2++Ce4+Ce3++Fe2+

Fe2++e-Fe3+红色浅蓝色OOCCHOHCCOˉˉ+Fe2+

例：葡萄糖酸锑钠的测定Ch.P（2005）

取本品约0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加水100ml、盐酸15ml与碘化钾试液10ml，密塞、振摇后，在暗处静置10min，用硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)相当于6.088mg的Sb。（二）经水解后测定法

本法是将含卤素有机药物溶于适当溶剂（如乙醇）中，加入氢氧化钠溶液（或定量过量的硝酸银滴定液）后，加热回流使其水解，将有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（Volhard法）测定。1.碱水解后测定法

本法适用于含卤素有机药物结构中卤素原子结合不牢固的药物。

原理三氯叔丁醇在氢氧化钠溶液中加热回流水解，氯元素全部转变成氯化钠，然后用剩余滴定法，即于水解液中加硝酸酸化，再加入定量过量的硝酸银滴定液，使Cl-生成AgCl沉淀，过量的硝酸银，以Fe3+为指示剂，用硫氰酸铵滴定液回滴定。例三氯叔丁醇的测定Ch.P（2005）CCl3-C(CH3)2-OH+4NaOH

△回流(CH3)2-CO+3NaCl+HCOONa+2H2ONaCl

+AgNO3

AgCl↓

+NaNO3

AgNO3+

NH4SCNAgSCN↓+

NH4NO3（淡棕红色）(Ksp=1.56×10–10)(Ksp=1.0×10-12)Fe3++SCNˉFe(SCN)2+

测定方法取本品约0.1g，精密称定，加乙醇5ml，溶解后，加20%氢氧化钠溶液5ml，加热回流15分钟，放冷，加水20ml与硝酸5ml，精密加硝酸银滴定液(0.1mol/L)30ml，再加邻苯二甲酸二丁酯5ml，密塞，强力振摇后，加硫酸铁胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于6.216mg的C4H7Cl3O·1/2H2O。滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数，mg/ml滴定液浓度，mol/L被测物的摩尔质量，g/mol1mol样品消耗滴定液的摩尔数，常体现为反应摩尔比，即1∶n。反应摩尔比为1∶32.酸水解后测定法十一烯酸锌的含量测定酸水解后，配位滴定法

（三）经还原分解后测定法本法是将含卤素有机药物在碱性或酸性下，加还原剂（如锌粉）加热回流，药物产生还原裂解反应，使有机结合的卤素转变为无机的卤素离子，然后采用银量法（Fajans法）测定。

本法适用于测定结构中碘与苯环直接相连，且一个苯环上含多个碘原子的含卤素有机药物。

1.碱性还原后测定法例泛影酸的测定Ch.P（2005）

取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠溶液30ml与锌粉1.0g，加热回流30分钟，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15ml，洗液与滤液合并，加冰醋酸5ml与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于20.46mg的C11H9I3N2O4。COOHINHCOCH3IIH3COCHN+11NaOH+Zn回流△COONaNH2

H2N+3NaI+2CH3COONa+2Na2ZnO2+H2O

USP（30）、BP（2005）

Ch.P（2005）收载的胆影酸、碘番酸、胆影葡胺、泛影葡胺、碘他拉酸等均采用同法测定。

2.酸性还原后测定法例碘番酸的测定JP(15)

取本品的干燥品约0.4g，精密称定，加锌粉1g及冰醋酸10ml，加热回流30min，放冷，冷凝管用水30ml洗涤，用脱脂棉过滤，烧瓶与脱脂棉用水洗涤2次，每次20ml，洗液与滤液合并，加四溴酚酞乙酯指示液1ml，用硝酸银滴定液(0.1mol/L)滴定。终点时黄色沉淀变为绿色。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于19.031mg的C11H12I3NO2。三、经有机破坏的分析方法（一）湿法破坏本法适用于含氮有机合成药物分析的前处理，在生物制品分析中用于氮（包括蛋白质）、磷、硫柳汞及氯化钠测定法的前处理。另外，本法亦用于生物样品中金属元素测定时生物基质的去除。本法主要使用硫酸作为分解剂(消解剂或消化剂)，常加入氧化剂(如硝酸、高氯酸、过氧化氢等)作为辅助分解剂。1.硝酸-高氯酸法本法适用于血、尿、组织等生物样品的破坏，有机金属药物经破坏后，得到的无机金属离子一般呈高价态。本法不能用于含氮杂环药物的破坏

2.

硝酸-硫酸法本法适用于大多数有机物质的破坏，破坏得到的无机金属离子均为高价态。本法不能用于含碱土金属有机药物的破坏

3.硫酸-硫酸盐法本法是往样品中加入浓硫酸作氧化剂，加入硫酸盐提高硫酸的沸点，增强硫酸的氧化破坏能力，且防止硫酸的分解损失。本法常用于含砷或锑有机药物的破坏，破坏得到的无机金属离子多为低价态。

4.其它湿法硝酸—硫酸—高氯酸法硫酸—氧化剂法（过氧化氢法、高锰酸钾）破坏后，金属呈高价态5.凯氏定氮法——氮测定法Ch.P（2005）分为第一法（常量法）和第二法（半微量法），应用于测定含有氨基或酰胺结构的药物含量。原理:

有机含氮化合物与硫酸共热，药物分子中有机结构被氧化分解，有机结合的氮转变成氨，并与硫酸结合成为硫酸氢铵及硫酸铵，用氢氧化钠碱化后，释放出氨气，随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸吸收后，用酸滴定液或碱滴定液滴定，并将滴定结果用空白试验校正。根据与氨作用的酸量计算供试品中氮的含量或换算为被测药物的含量。测定步骤：（1）消解（2）蒸馏（3）滴定（二）干法破坏1.高温炽灼法本法系将含待测元素的有机药物经高温灼烧灰化，使有机结构分解而待测元素转化为无机元素或可溶性无机盐，以供分析。注意事项：（1）加热或灼烧时，应控制温度在420℃以下（2）一定要灰化完全（3）经本法破坏后，所得灰分往往不易溶解，但不要轻易弃去2.氧瓶燃烧分解法（1）原理

氧瓶燃烧法：本法是将分子中含有卤素或硫等元素的有机药物在充满氧气的密闭燃烧瓶中进行燃烧，并将燃烧产物吸收于适当的吸收液中，再采用适宜的分析方法来检查或测定卤素或硫等元素的含量

适用于含卤素、硫、氮、硒等有机药物的分析

本法特点是简便、快速、破坏完全，尤其适用于微量样品的分析（2）仪器与材料

①仪器装置燃烧瓶为500、1000或2000ml无色、磨口、厚壁、硬质玻璃锥型瓶；瓶塞空心，底部熔封铂丝一根，下端呈螺旋状或网状②称样用材料及称样A.固体样品无灰滤纸B.液体样品纸袋

C.软膏类样品：将适量样品置不含被测成分的蜡油纸中包裹严密，外层再用无灰滤纸包裹④吸收液

A.作用：吸收液的作用是将样品经燃烧分解所产生的各种价态的卤素、硫、氮、硒等，定量地吸收并转变为一定的便于测定的价态③氧气B.吸收液的选择氟水

氯NaOH溶液溴H2O2-NaOHNaOH-硫酸肼饱和溶液碘NaOH－硫酸肼饱和溶液硫NaOH或H2O2

硒硝酸溶液（3）操作方法①燃烧瓶燃烧前的准备用洗液洗净后，按各药品项下的规定加入吸收液，将瓶口用水湿润，小心急速地通入氧气1min，立即用表面皿覆盖瓶口。②样品的准备取样品适量，精密称定后按规定方法包裹，固定于铂丝下端的网内或螺旋处。③样品的燃烧点燃包有供试品的滤纸尾部，迅速放入燃烧瓶中，按紧瓶塞，加水少量封闭瓶口，俟燃烧完毕（应无黑色碎片），充分振摇，使生成的烟雾完全吸入吸收液中，放置15min，用水少量冲洗瓶塞及铂丝，合并洗液及吸收液，同法另做空白试验。然后按各药品项下规定的方法进行检查或测定。①根据被燃烧分解的样品量选用适宜大小的燃烧瓶。（4）注意事项

Ch.P（2005）规定的燃烧瓶体积为500、1000或2000ml三种，采用常量或半微量分析待分解样品量燃烧瓶的体积

10~20mg（半微量分析）500ml50~60mg1000ml0.6~0.7g或更多2000ml或特殊结构的燃烧瓶

正确选用燃烧瓶的目的在于：样品能在足够的氧气中燃烧分解完全；有利于将燃烧分解产物较快地吸收到吸收液中；防止爆炸的可能性。②测定含氟有机药物时，用石英制燃烧瓶③铂丝燃烧时起催化作用④应同时做空白试验⑤燃烧时要注意防爆⑥燃烧要完全⑦燃烧产生的烟雾完全被吸收（5）应用例磺溴酞钠的含量测定Ch.P(2005)燃烧分解O2HBr+S2-+SO4+…

HBr+S2-NaBr+Na2SO4

+H2O

NaOH,H2O2溴取本品约0.2g，照氧瓶燃烧法（附录ⅦC）进行有机破坏，选用1000ml燃烧瓶，以0.4%氢氧化钠溶液10ml、浓过氧化氢溶液0.5ml与水10ml作为吸收液，俟生成的烟雾完全吸入吸收液后，用水稀释至100ml，煮沸5分钟，放冷，加稀硝酸使成酸性，精密加硝酸银滴定液（0.1mol/l）20ml，摇匀，再加硫酸铁胺指示液2ml，用硫氰酸胺滴定液(0.1mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相当于7.990mg的溴(Br)。例碘苯酯的含量测定Ch.P（2005）碘苯酯I原理碘苯酯系有机碘化物，用氧瓶燃烧分解，转变为碘化物，继而氧化为游离的碘，并被定量地吸收于吸收液中，和氢氧化钠反应，生成碘化物与碘酸盐，加入溴-醋酸溶液，使全部转变为碘酸盐，过量的溴以甲酸及通空气去除。加入碘化钾，使与碘酸盐反应析出游离碘，用硫代硫酸钠液滴定，碘与淀粉结合所显的蓝色消失即为终点

取本品约20mg，精密称定，照氧瓶燃烧法进行有机破坏，用氢氧化钠试液2ml与水l0ml为吸收液，待吸收完全后，加溴醋酸溶液(取醋酸钾10g，加冰醋酸适量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成100m1)l0ml，密塞，振摇，放置数分钟，加甲酸约lml，用水洗涤瓶口，并通入空气流约3～5min以除去剩余的溴蒸气，加碘化钾2g，密塞，摇匀，用硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液，继续滴定至蓝色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每lml的硫代硫酸钠滴定液(0.02mol/L)相当于1.388mg的C19H29IO2。滴定度的计算放大反应2mol碘苯酯→1molI21molI2→1molNaIO+1molNaI1molNaIO→1/3molNaIO3+2/3molNaImolNaI+Br2→molNaIO3即2mol碘苯酯→2molNaIO32molNaIO3+10I-→6molI2即2mol碘苯酯→1molI2→6molI2→12molNa2S2O3反应摩尔比为1∶698：140.氧瓶燃烧法中的装置有A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.磨口软质玻璃锥形瓶C.铂丝D.铁丝E.铝丝96：133（99x：138）．选择氧瓶燃烧法所必备的实验物品A.磨口硬质玻璃锥形瓶B.铂丝C.普通滤纸D.氢气E.无灰滤纸99：76．氧瓶燃烧法测定含氯有机药物时所用的吸收液多数为A.H2O2溶液B.H2O2—NaOH溶液C.NaOH溶液D．硫酸肼饱和液E.NaOH—硫酸肼饱和液99：134.氧瓶燃烧法可用于A.含卤素有机药物的含量测定B.醚类药物的含量测定C.检查甾体激素类药物中的氟D.检查甾体激素类药物中的硒E.芳酸类药物的含量测定第三节药品质量标准

分析方法验证

一、目的

证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求，方法验证理由、过程和结果均应记载在药品标准起草或修订说明中。二、用途（一）建立药品质量标准时，分析方法需经验证。（二）药品生产工艺变更、制剂的组分变更、原分析方法进行修订时，分析方法需经验证。三、需验证的分析项目1.鉴别试验；2.杂质定量检查或限度检查；3.原料药或制剂中有效成分含量测定；4.制剂中其它成分（如防腐剂等）的测定；5.溶出度、释放度等检查中的溶出量等的测试方法。

验证内容有：准确度、精密度（重复性、中间精密度和重现性）、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。四、验证内容

（一）准确度（accuracy）准确度是指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度，用回收率（%）表示。

测定回收率R（recovery）的具体方法可采用“回收试验法”和“加样回收试验法”。

回收试验空白+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M

加样回收试验已准确测定药物含量P的真实样品+已知量A的对照品（或标准品）测定，测定值为M

数据要求规定的范围内，至少用9个测定结果评价。例如，设计3个不同浓度，每个浓度分别制备3份供试品溶液，进行测定。1.含量测定方法的准确度

原料药可用已知纯度的对照品或供试品进行测定，或用本法所得结果与已知准