细胞划痕实验

细胞划痕实验实验原理细胞划痕（woundhealing）法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法，类似体外伤口愈合模型，在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上，用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线，去除中央部分的细胞，然后继续培养细胞至实验设定的时间，取出细胞培养板，观察周边细胞的生长迁移能力，实验通常需设定正常对照组和实验组，实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等的组别，通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同，可以判断各组细胞的迁移与修复能力。实验步骤1、所有要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min。2、1）先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，大约每隔0.5-1cm一道，横穿过孔，每孔至少穿过5条线。2）在空中加入约5×105个细胞（具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满），37℃培养箱培养。3）第二天用10µl枪头比着直尺，与标记线垂直的方向划两条平行线，枪头要垂直，不能倾斜。4）用PBS洗细胞3次，去除划下的细胞，加入无血清培养基。5）放入37℃5%CO2培养箱，按0、6、12、24h倒置显微镜观察，拍照。三、注意事项1、在用PBS缓冲液冲洗时，注意贴壁慢慢加入，以免冲散单层贴壁细胞，影响实验拍照结果。2、一般做划痕实验，都是无血清或者低血清（<2%），否则细胞增殖就不能忽略。（也可用丝裂酶处理一小时）3、按照6孔板背后画线的垂直方向划痕，可以形成若干交叉点，作为固定的检测点，以解决了前后观察时位置不固定的问题。项目立项申请书项目名称：申请部门：项目负责人：申报人：申请立项日期：项目名称项目简称所属上级项目项目类型□移动应用□前端项目√企业级项目生命周期瀑布模型项目起止日期自年月日起至年月日止是否重点项目□是□否项目承担部门部门名称联系人电话项目背景项目依据为了丰富我们校园生活，丰富我们的校园文化，让我们在校园闲事生活中更加的丰富多彩，故突发此想法，做一个类似学校官方的学生平台，服务我们自己。项目的意义此项目有利于提高我们的个人能力，对日后的个人发展有着重大意义，包括以后对软件工程综合实践课程更好的提高个人成绩，如果本项目做的比较成功，可以作为个人的毕业设计。项目市场分析市场规模及竞争情况：目前市场上针对学生的生活方面的平台，还是有所欠缺的，所以我们的校园生活平台的潜在市场还是特别的大，有利于我们的开发和推广。收益分析项目如果最后成功的做出来的话，不但能提高我们个人的能力，还让我们对企业级开发这样的开发有个更深入的了解，相信对我们以后的收益是巨大的。项目技术分析项目工作基础和已取得的工作成绩：目前前台的开发技术已经成熟，所以我们有着很大的优势，然而在每年的小学期方面，我们均有校级奖项。技术架构：主要以先搭框架，然后把框架填充为主。技术路线：数据库，HTML，JAVA，等项目目标和范围项目的目标a.技术目标：能后实现数据库，HTML，JAVA，三者的完美结合。b.产品目标：做够做出来一个让学生愿意使用，广告愿意推广的网站。c.团队成长目标：能够让每个成员都能提高自己的个人能力、项目的内容和范围本校园生活平台主要分为6个组成模块，（学习、饮食、兼职、出行、娱乐、链接），其中每个模块，对应的不同的模块功能：A学习模块：有着讨论区，资料区（目前设想可以下载和上传资料），在线阅读区。B.饮食：主要是点餐功能C.兼职：只要是发布兼职信息和应聘信息。D.出行：目前只是设想可以在芜湖部分地区实现点对点的查询公交乘坐信息。E.娱乐：主要是发布聊天室。F.超链接：链接一些对学生有益或者与学校有关的网站。项目验收指标完成《项目的内容和范围》中所列功能。项目实施规划版本里程碑开始时间完成时间备注V1.0完成项目立项书撰写及评审2016/10/102016/10/28第6、7、8周V1.0完成需求规格说明书撰写及评审2016/10/312016/11/13第9、10周V1.0完成概要设计及评审2016/11/142016/11/25第11、12周V1.0完成详细设计及评审2016/11/282016/12/10第13、14周V1.0完成测试用例撰写及评审2016/11/282016/12/10第13、14周V1.0完成代码开发及测试2016/12/122016/12/30第15、16、17周项目资源1.人力资源姓名所属部门角色工作时间工作量Java4项目负责人2016.10.10-2016.12.1220%Java4组员2016.10.10-2016.12.1220%Java4组员2016.10.10-2016.12.1215%Java4组员2016.10.10-2016.12.1215%Java4组员2016.10.10-2016.12.1215%Java4组员2016.10.10-2016.12.1215%项目风险分析及应对措施风险内容应对措施【技术风险】团队大多是新组合，对彼此不熟悉，会增加沟通成本及工期组员多多交流，快速磨合，早点开启项目计划【进度风险】我们小组的功能较多，后期可能实现不了。计划是完成AB两个模块，其他的根据项目的情况待定。项目评审委员会成员名单姓名所属部门评审组职务主要评审内容老师组长组长组长评审委员会审批意见：签字年月日一级项目专家组长审核意见（二级产品类项目必须的审批环节）：项目负责人签字年月