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)的蔗糖水溶液)40%(w/v)蔗糖水溶液(2g/5ml的dder)的蔗糖水溶液)40%(w/v)蔗糖水溶液(2g/5ml的dder)、溴化乙锭(EB、5XTBE电泳缓冲液(Tris、硼I溶液(不用灭菌)ml的浓盐酸,加灭菌ddHbO,混匀,室温降低产量。PCR反应中每种dNTP的终浓度为20200口所用一、所需仪器设备及消耗品L的EDTA4mlX3=12mlCTAB2gX3=6gL的EDTA100口l最后加ddHO定容到50ml工作液为XTE(45ml灭菌的ddbbO中,加入5ml已灭菌的1XTE))(aneeinTransgenicWheatPCR扩增反应程序引物浓度是5卩mol/L吗PCR反应时,每个引物的终浓度是多火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再72CaneeinTransgenicWheatPCR扩增反应程序引物浓度是5卩mol/L吗PCR反应时,每个引物的终浓度是多火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再72CNaAc-3HO2加ddH2O30mI用冰乙酸调节pH至力口ddHO定容到50mlRNase10mgEB30mgddHO30ml2磁力搅拌至完全溶解,装入棕色瓶,铝箔包裹,保存于室温。)(L的EDTA20ml以上溶于400ml的ddbbO中,在定容到500ml工作液为1XTBE或XTBE(九)6X上样缓冲液(4C保存)Ac溶液()(50ml)(高压灭菌)NaAc-3HO2加ddmol/L时,特异性降低或形成引物二聚体,冬卩mol/L时,少4XdNTP的)(八)10XTBEAc溶液()(50ml)(高压灭菌)NaAc-3HO2加ddmol/L时,特异性降低或形成引物二聚体,冬卩mol/L时,少4XdNTP的)(八)10XTBE缓冲液(电泳缓冲液)(高压灭菌)Tris2(-一)5mol/L的NaOH容液(50ml,10g的NaOH容于50ml灭菌的ddHhO中不用灭菌)200g的NaOH溶于灭菌的ddHO中,定容至1000ml80ml的ddHO加浓盐酸调节pH值至(大约加)()()(9.305g的EDTA-Na2HO40ml的ddHO最后加水定容到50ml,用NaOH调节pH值至PCR(聚合酶链反应)一、所需仪器设备及消耗品ml(十二)1mol/L的Tris-HCl()(ml(十二)1mol/L的Tris-HCl()(100ml)酸、EDTA三、PCF反应体系与反应程序仅供参考①水、4Xd终浓度为口g/ml(30ml力口15口I、40ml加20口I、单面刀片二、所需化学药品及试剂质粒(阳性对照)、引物(2)2MgC24XdNTPTacDNA聚合酶模板DNA母液浓度mmoI/LmmoI/L10X1X度3UL22①水、4XdNTP混合④混匀、分装PCRt⑤向每个PCRt加入模板DNAPCR扩增反应程序:Tris、冰乙酸、硼酸、B-巯基乙醇、NaAc氯仿(三氯甲烷火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再Tris、冰乙酸、硼酸、B-巯基乙醇、NaAc氯仿(三氯甲烷火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再72C(高压灭菌)12.11g的Tris碱80ml的ddHO加浓盐:94C预变性5min。进入循环:94C变性45s—45C退循环结束后再72C延伸7min。外源脱水应答转录因子DREB基因在转基因小麦中的诱导型表达与抗旱生理效果无离子水4XdNTPTacpNA聚合酶模板DNA母液浓度10X各成分加入量2551各成分终浓度1X1UPCR扩增反应程序:94C预变性5min。循环结束后再72C延伸10min。dHO,加热溶解,注:温度不能太高)(十)1mol/L的HC火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再72C延伸10min。一般PCRdHO,加热溶解,注:温度不能太高)(十)1mol/L的HC火45s—72C延伸1min,35个循环。循环结束后再72C延伸10min。一般PCR反应中引物的终浓度
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