中医临床常用实验模型的建立

中医临床常用实验模型的建立

1中医证候动物模型的准备1.1中医证证论此前，该模型涵盖了广泛的综合征综合征模型，如八项辨证、脏腑辩证法、气气辩证、气、血液循环辩证法、六经辩证法、卫气营血辩证法等。其中,按照脏腑辨证,包括:肾虚证(肾阴虚、肾阳虚证)动物模型、脾虚证动物模型、肝脏证候(肝郁、肝阳上亢)动物模型、心脏证候动物模型(心气虚)、肺脏证候动物模型等。按照气血津液辨证,包括:气虚证动物模型、血虚证动物模型、血瘀证动物模型等。按照六淫辨证,包括:寒证、热证动物模型,按照卫气营血辨证,包括温病动物模型。另外还有痹证动物模型、厥脱证动物模型等。各种模型以脾虚、肾虚、血瘀证最多。1.2建模方法：通常分为三种类型1.2.1建立温病湿温之现实中阻模型在中医病因学说的基础上,利用各种病证模型,如冷水浴制造阳虚模型;温湿箱加高糖高脂饮食制作温病湿温之湿热中阻模型。还有利用中药四气五味特性制成的特色模型,如青皮、枳壳、附子制作的糖尿病气阴两虚证动物模型。1.2.2中医证候模型发现某些药物的毒性反应、或手术后的不良反应所致特异病理改变与中医某些证候中典型的病理改变相一致的,于是将该种病理模型纳为中医证候模型。典型者如利血平造模形成的脾虚证模型。1.2.3哲学基础及方法综合上述两种模型的优势,较贴近理想的中医病证模型。如吕爱平等以Ⅱ型胶原免疫所致关节炎动物模型为基础,以风寒湿痹证为外因、肾虚为痹证内因的学说为依据,利用中西医结合肾本质研究的成果,采用复合因子方法制作痹证动物模型。但由于中、西医的发病机制不同,具体相关性尚有待深入研究,故该种模型目前应用较少。2中医证候动物模型的辩证依据2.1微色图联体观察其寒热、饮食、二便、面色、活动度、神色、舌r值、爪r值、尾r值、体重、形体虚实、毛色、呼吸、眼神、耳、鼻、唇、腹、二阴、爪和尾显微拍照(颜色、胖瘦、光泽、爪舒展、爪伸展、爪老嫩、爪洁净、爪溃烂);闻气味等。2.2用法2.3病理改变2.4变学改变和脑虚证所涉及的指标目前实证的生化指标,主要根据具体病变系统和器官而定。如中风血瘀证观察血液流变学改变和脑虚证所涉及的指标以免疫学相关指标为主,其它指标相对较少。具体体现在:气虚证以研究免疫学相关指标为主,血虚证以研究外周血象及骨髓造血细胞为主,阴阳虚证以研究肝脾肾组织化学及各种酶、核酸为主,如cAMP、cGMP。2.5基因芯片技术基因芯片技术目前在中医药科研中得到广泛应用。当使用证的动物模型,或在疾病模型基础上通过辨证区分为不同的证,对主要的病变组织了解后,便可以利用基因芯片技术,观察有关组织基因的变异,以了解证与证、证与病、证与体质之间的差异。沈自尹关于肾本质的研究,可作为这方面代表。随着现代分子生物学、生命科学的发展,这样的研究会取得更多成绩。2.6治疗综合征3对于中医证候模型的研究,其基本观点提出一般而言,成功的模型建立必须满足三个条件:(1)模型与原型之间有相似关系。(2)模型能够代替原型。(3)对模型的研究,应该能够得出原型的信息。就中医证候动物模型而言,所谓原型就是指中医证候以及具有中医特色病证结合的病理反应。田金洲等也提出证候模型应该符合中医四诊信息所表达的证候表现特征,而不是用想象的某些生物指标来替代。证候动物模型目前面临的问题包括:3.1外湿和内湿上湿中医病因多为非特异性的因素,一种病因可致多种病证,多种病因又可致同一种证,中医传统病因并不一定是能直接引起相应中医证候的客观因素,如湿温中湿热中阻模型,单独外湿未必能造成该种证候,只有“外湿与内湿相合”才能形成其湿热中阻证。由此导致中医证候模型的可重复性差,可信度不高。3.2毒性反应模型诸多病理模型,伴有明显症状体征和理化指标的变化,造模成功率高、易于观察、总结,但实际上造模结果多为一些药物、手术等的继发反应或不良反应,甚至毒性反应,且这种模型的制作并无临床病因学支持,与中医临床更无甚联系,而毒性反应所导致的症状和指标改变,停药后可能自愈,故该类模型在中医药研究中越来越受怀疑。另外,利用西药副作用制作的病理模型还可能导致同一药物导致不同甚至相反证型的尴尬:如甲状腺素造模,有的定为肾阴虚、有的定为阴虚、有的定为阳虚;用糖皮质激素造模,有的出现肾阴虚、有的出现肾阳虚,这种矛盾固然与用药剂量、用药时间有关,但也与药物副作用广泛、不确定有关。3.3不同一品的药代动力学由于缺乏统一的动物模型标准,在许多新药实验中曾广泛使用以方验证的模式。但在临床新药实验中可以出现不同方药对于同一疾病模型效果一样的情况,如对同一溃疡模型,清热止血方药与温中止血方药均可显示减轻胃黏膜损伤,缩短出凝血时间等相同效果,那么该模型性质按照中医辨证观点,究竟属寒性还是热性?由此看来,由药物反证模型证候属性,不完全可靠。3.4中药特异性与特异性的关系证候实质研究的传统目标是追求研究指标的高特异性,而其研究结果的特点却恰恰是其弱特异性。以脾虚证研究为例,实验指标有70余种,涉及消化系统、植物神经系统、能量代谢、免疫、内分泌、造血功能等方面,特异性相对较高的仅有酸刺激后唾液淀粉酶活性下降和木糖吸收率下降两个。多年来为克服弱特异性,中医证候实质研究者作出不懈的努力,但实践结果收效甚微。4解决现有中医证候模型问题的对策4.1创设新的检测方法对动物的辨证指标,尽量采用可动态观察、非创伤性的原则。因为对证候演变的观察是中医疾病诊断的特色之一,而任何创伤性的检测,对于动物都是一个恶性刺激,改变了原有的“证”,不利于这种动态观察。但由于人与动物的交流障碍,将临床的四诊合参完全照搬到动物身上,不切实际,所以我们要尽量发明、创造这样一些检测仪器和方法,以收集到动态、真实、客观的动物症状。在这方面,方肇勤课题组已经有多年探索与经验,已取得一定成果。4.2加强临床基础研究4.3动物证候模型计算,根据掌握动物证候模型的辨识和模型建立动物证候模型参照临床的辨证标准,结合动物自身特点,制定动物证候模型的辨证指标。将临床辨证标准与动物特性相结合,指定可操作的特定种属动物的证候模型辨证标准。4.4中医证候动物模型的研究,既是中医科研的特色,虽然动物模型在中医证候的研究中仍然有许多缺憾和不足,但其在中医学科研中起到的不可替代的作用,对实现中医现代化做出的巨大贡献。只是,为了让动物模型更符合中医整体观、辨证论治的特色,使研究成果能有效运用于中医临床,我们只能既要坚持中医特色、理解中医经典,又掌握先进科学技术、灵活运用于中医科研中。继承不泥古、创新不离宗。对中医证候动物模型的研究,我们仍任重而道远。体温、步态、心率、舌、脉,肌力,神