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文档简介

实验一动物细胞培养用液的配制培养液：维持动物细胞生存和生长所需要的基本溶液

平衡盐溶液（BalancedSaltSolution,BSS）用作洗涤组织、细胞以及配制各种培养用液的基础溶液天然培养基（NaturalMedium）主要来自动物体液（如血清）或组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。在细胞培养中使用最早，也最有效。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限。成分复杂，影响实验产物的提取和实验结果的分析。

合成培养基（SyntheticMedium）根据细胞生存所需物质的种类和数量，人工模拟合成，配方恒定。

优点：标准化生产，组分和含量相对固定。成本低。缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。需补充部分天然培养基，多用血清，效果更好。消化液：分离组织、分散细胞的细胞分离液胰蛋白酶液：使细胞间的蛋白质水解、细胞分散常用浓度为0.25%血清可终止其对细胞的消化作用EDTA液：鳌合Ca2+、Mg2+，使细胞分离，对细胞毒性小常用浓度为0.02%冷冻液：用于细胞的冷冻保存在细胞培养的基础液中加入一定剂量的血清和冷冻保护剂，如二甲亚砜（DMSO）、甘油或乙二醇。冷冻保护剂可使冰点降低，提高细胞膜对水的通透性，减少细胞内冰晶的形成，从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。培养细胞生长的条件1细胞的营养需要基本营养物质：氨基酸，维生素，碳水化合物，无机离子。促生长因子等物质：血清中含多种促细胞生长所需的物质。2细胞的生存环境温度：37℃气体：O2和CO2，CO2常用浓度为5%pH值：7.2-7.4渗透压：260－320mmol/L3无污染及无毒常用实验用品培养器皿：培养瓶，血清瓶，吸管，离心管，冻存管超净工作台，压力蒸汽消毒器，电热干燥箱，滤器，酸缸CO2培养箱倒置显微镜液氮罐自动双重纯水蒸馏器，纯水仪培养瓶血清瓶培养板配制培养液必须使用三蒸水或Millipore超纯水，不可用无离子水配制。纯水仪全自动高压灭菌锅滤器

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