连钱草乙醇提取物抗肠蠕动亢进作用的研究

连钱草乙醇提取物抗肠蠕动亢进作用的研究

连草原植物是活血草（nakai）kuber，是嘴唇科植物。具有利湿通淋、清热解毒、散瘀消肿的功能。主治尿路感染、疳积、黄疸、感冒、肺痈、咳嗽、小儿惊风、跌打扭伤、骨折、风湿性关节炎。在湖北省民间常用于腹泻的治疗,具有较好的疗效。为了探讨连钱草治疗腹泻的作用机制,笔者观察了连钱草醇提物对豚鼠回肠平滑肌和小鼠肠运动的影响,旨在为连钱草治疗腹泻提供实验依据,现将结果报道如下。1实验动物、药物和试剂LMS-2B二道生理记录仪(成都仪器厂);YJ501型超级恒温水浴(上海跃进医疗器械厂);Bs200s电子天平(Sartorins公司);健康豚鼠(湖北省卫生防疫站动物实验中心),体重250～350g,♀♂兼用;昆明种小鼠(湖北省卫生防疫站动物实验中心),体重18～24g,♀♂兼用;氯化乙酰胆碱(北京化学试剂公司,批号20011015);甲基硫酸新斯的明注射液(山东天福制药厂,批号0207051);组胺(中国科学院上海生物化学研究所);氯化钡自贡市张家坝盐化有限公司);大黄浸液(大黄购于洪山区医药公司,取大黄粉适量,加蒸馏水浸渍24h,浓度为1mL∶0.2g生药,备用);连钱草乙醇提取物(连钱草自行采集,由湖北中医学院中药鉴定教研室陈家春教授鉴定为唇形科植物连钱草,取粉碎过4号筛的连钱草干品适量,加95%的乙醇于圆底烧瓶中,浸泡6h后水浴加热回流1h,趁热过滤,药渣再用95%的乙醇加热回流1h,过滤,合并滤液,减压回收乙醇浓缩至100%,即含生药1mL∶1g,备用)。2方法和结果2.1炭末推进百分率测定取小鼠24只,体重18～20g,随机分成3组,每组8只,分别灌服连钱草乙醇提取物,阴性对照灌服等容积生理盐水,阳性对照灌服硫酸阿托品0.01g·kg-1。每只小鼠给药后30min,均以5%炭末混悬液(混悬于2%羧甲基纤维素溶液中)0.3mL灌胃。20min后,将小鼠颈椎脱臼法致死,打开腹腔取出小肠,不加牵引平铺于托盘上,测量从幽门至回盲部之间距离(小肠全长)及炭末推进距离,求出推进百分率,结果见表1。炭末推进率(%)=炭末在小肠内推进距离(cm)小肠全长(cm)×100%(%)=炭末在小肠内推进距离(cm)小肠全长(cm)×100%由表1可见,与生理盐水对照组相比,连钱草乙醇提取物能显著降低小肠炭末推进率(P<0.01),表明连钱草乙醇提取物有抑制小鼠小肠推进运动的作用。2.2大黄粉浸液与炭末混悬液的配制取小鼠24只,体重18～22g,随机分成3组,禁食12h(供水)。连钱草醇提物组于灌服药物后1h,加服大黄粉(20%,5g·kg-1)浸液与炭末混悬液,另两组中一组给5%炭末混悬液作为正常对照,一组给大黄粉炭末混悬液。观察各组黑便出现时间及6h内黑便粒数,结果见表2。由结果可见,连钱草醇提物组黑便出现时间均较大黄组为慢,黑便粒数较少,差异显著,表明连钱草乙醇提取物有抑制肠蠕动,减缓粪便排出的作用。2.3炭末推进试验取小鼠24只,体重18～22g,随机分成3组。禁食12h(供水)。生理盐水组给等容积生理盐水,新斯的明组以甲基硫酸新斯的明2mg·kg-1灌胃,连钱草乙醇提取物灌胃给药。30min后,以甲基硫酸新斯的明2mg·kg-1灌胃,10min后,以15%活性炭混悬液(混悬于2%的羧甲基纤维素溶液中)0.3mL灌胃。给炭末后20min将小鼠脱颈椎处死,测量全肠长度及炭末在肠内推进长度,求出炭末推进率,结果见表3。结果可见甲基硫酸新斯的明能使肠蠕动亢进,而连钱草醇提物组能降低小肠炭末推进率,对抗新斯的明所致的肠蠕动亢进。2.4连钱草乙醇提取物对保肝活动力的影响2.4.1连钱草乙醇提取物对豚鼠回肠平滑肌的作用取健康豚鼠8只,体重250～350g,♀♂不限。用木锤敲击动物头部致昏,立即剖腹取出回肠,小心分离除去粘膜组织,随后用台氏液将肠内容物洗净,并将肠管分剪成1～2cm长小段的标本备用,将上述备用的回肠标本,置于盛有10mL台氏液的麦氏浴槽内,通入O2,(38.0±0.5)℃恒温,张力负荷1g,平衡30min,用记录仪描记运动曲线,稳定后加入连钱草乙醇提取物(0.2g·mL-1),观察给药前后回肠平滑肌的收缩幅度、频率、张力的变化,比较给药前后的肠道活动力(肠道活动力=平均强度×频率,单位:g·次数·min-1),结果见表4。由表4可见,不同浓度的连钱草乙醇提取物(0.05,0.1,0.2,0.3g·mL-1)均能显著抑制豚鼠离体回肠平滑肌的活动。2.4.2连钱草乙醇提取物对豚鼠回肠平滑肌细胞受体的作用将上述回肠标本,置于盛有10mL台氏液的麦氏浴槽内,通入O2,(38.0±0.5)℃恒温,张力负荷1g,平衡30min,用记录仪描记运动曲线,稳定后分别加入氯化乙酰胆碱、组胺和氯化钡等各类激动剂,待其稳定后加入连钱草乙醇提取物,观察两次给药前后回肠运动的变化,比较给药前后的肠道动力,结果见表5。结果可见,连钱草乙醇提取物能够显著拮抗氯化乙酰胆碱、组胺、氯化钡对离体豚鼠回肠平滑肌的激动作用。3连钱草乙醇提取物小鼠在体实验表明,连钱草乙醇提取物对大黄冷浸液引起的小鼠腹泻有明显的拮抗作用,对炭末在小鼠小肠内的推进率有抑制作用,亦能对抗新斯的明所致的小肠运动亢进