足癣的感染现状及防治措施

足癣的感染现状及防治措施

足虱是一种常见的临床皮肤感染疾病，由皮肤上的丝状细菌引起。该病的真菌主要累及皮肤、甲壳素和毛发。临床上主要的致菌病有红色毛癣菌、石膏样小孢子菌和须癣毛癣菌,近年来白色念珠菌及其他酵母菌感染有增多趋势。学生多是集体生活加之体育活动较多使其成为真菌尤其是浅部真菌感染的一个特殊群体。本课题从多方面对足癣进行研究,以期为足癣病原菌的分离、培养、鉴定提供指导并为足癣的诊断、治疗及药物选择提供参考。1材料和方法1.1来自本地格式的资源于2008年9月份,取本校在校生足癣症状典型者皮屑标本60例。1.2抗菌药物及试剂沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂培养基(SDA)、MH培养基、乳酸酚棉兰染液、Rosco药敏纸片:酮康唑(KTC)、氟康唑(FTC)、二性霉素B(AMB)、制霉菌素(NYS)、甲氧苄啶(TMP)均购自杭州微生物试剂有限公司;革兰染色染液(珠海贝素生物技术有限公司);真菌培养箱(上海博迅实业有限公司医疗设备厂)。1.3方法1.3.1玻片溶液的溶解取皮屑于载玻片上,加10%KOH2~3滴,盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热往返数次,以加速角质溶解。放置10min后镜检。镜下形态疑似白色念珠菌者,分离培养后革兰染色进一步镜检鉴定。1.3.2等间距1.3.2.1.倾斜培养基培养1.3.3药物过敏试验1.3.3.1.悬挂式细菌悬浮液的制备1.3.3.2洛可可晶体传播法2结果2.1koh消化后的显微镜检查结果KOH消化后镜检47例阳性,可见典型菌丝或孢子,真菌培养54例阳性,可见典型菌落,见图1~2。2.2识别细菌根据菌落的形态、颜色及镜下特点可鉴定出的菌种有:红色毛癣菌,白色念珠菌,须癣毛癣菌,石膏样小孢子菌,孢子丝菌,见表1,图3~4。2.3细菌耐药试验药敏结果显示:红色毛癣菌对FTC最敏感,对NYS完全耐药;白色念珠菌和须癣毛癣菌均对KTC最敏感,前者对FTC、AMB、NYS均表现出敏感,后者表现出不同程度的耐药;孢子丝菌同样对KTC最敏感,却表现出对FTC完全耐药。此外,实验同时还显示各种真菌对抗细菌药TMP完全耐药。具体见表2。3koh的消化后及安全性评价真菌性足癣病是常见临床皮肤病之一,也是大学生常见的传染性皮肤病。青岛大学地处东部沿海城市青岛,其潮湿的气候使学生的足癣患病情况较为严重,而防治的前提则需全面了解该地区致病真菌的流行病学特点,包括发病率、致病菌种类及分布等。由于足癣病原真菌感染性强,采集标本时为防止操作者被感染,应用镊子采取皮屑,严禁用手直接拿取。鉴定足癣病原菌的方法主要有KOH消化后镜检法和病原菌分离培养法。本实验中,KOH消化直接镜检检出阳性标本47例,分离培养法检出阳性标本54例,两者结果一致性较好。真菌培养法用时较长,步骤繁琐,KOH消化后镜检快速简单,是目前临床常用的方法,而培养法方便进行药敏试验,指导用药,具有显著临床意义,所以真菌培养法依然无法取代。KOH消化后镜检以组织细胞为背景,可清楚地观察到真菌的菌丝及孢子。若观察到假菌丝为白色念珠菌的鉴定依据。消化的时间应控制在10min左右,时间过短组织消化不完全,时间过久组织会被破坏,这样都会破坏镜检观察背景,影响检出结果。目前,抗真菌药物有限,且耐药趋势有所增长,因此,加强真菌感染的控制及耐药监测,有效防治真菌感染及提高治愈率已成为目前医学领域中的一个重要问题。治疗足癣常用的抗真菌药物包括:唑类、丙烯胺类、硫脲类、吗啉类、吡酮类等,其中丙烯胺类和唑类药物临床应用最广。为了更好地结合临床,笔者选用了皮肤科临床常用的制霉菌素、酮康唑、氟康唑、传统抗真菌药二性霉素B,此外,本实验特选取了抗细菌性药物甲氧苄啶做比较。从表2可以看出白色念珠菌对二性霉素B、制霉菌素、氟康唑、酮康唑都敏感,而其他4种菌对这几种抗真菌药的敏感程度不一:红色毛癣菌对酮康唑、氟康唑、二性霉素B敏感,而对制霉菌素耐药;须癣毛癣菌则主要对酮康唑敏感;石膏样小孢子菌除对酮康唑表现中介外,其余均耐药;孢子丝菌对酮康唑、制霉菌素敏感,对二性霉素B中介,而对其他均显示耐药。亦可见酮康唑对这5种菌均有较好的抑制作用,而其他几种药对各菌的抑制程度差异较大;而抗细菌性药物甲氧苄啶的药敏试验结果显示各种真菌对甲氧苄啶均耐药。需要指出的是:体外药物敏感试验的结果可以为临床上选择用药提供参考,但是由于药物的抗菌活性还会受到体内多种因素的影响,如药物吸收代谢的个体差异等,因此体外药物敏感试验的结果有时并不能够完全反映体内的真实抗菌情况。因此还需要加大样本量及更多地结合临床疗效进行分析研究。用取菌针取皮屑少许,接种于沙氏葡萄糖蛋白胨琼脂斜面培养基上,用取菌针尖端稍向下穿刺,将皮屑带入培养基内部,置于25℃孵箱培养,于10d后观察菌落。1.3.2.2普通平板分离和培养将斜面培养基上生长的菌落转种于沙氏平板培养基上,于25℃孵箱中培养4d后,观察菌落特点,并对培养基正反面拍照,初步确定真菌菌种。1.3.2.菌株的制备和鉴定制作小培养基,挑取普通平板上的菌穿刺接种于小培养基上,于25℃孵箱中培养4d后,直接镜检,观察菌丝与孢子的特点,典型者用乳酸酚棉兰染色后镜检,进一步观察其特点,确定菌种。挑取SDA斜面或平板上菌落置于0.9%NaCl溶液中,反复吹吸混匀,用0.9%NaCl溶液将菌液浓度比浊调至5×105/ml(生长旺盛的菌落用研钵或无菌玻璃珠研细)。用无菌棉签蘸取菌悬液从3个不同的方向均匀涂布于MH琼脂平板培养基,5~10min后贴上药敏纸片,25℃孵育4d后测其抑菌环。FTC、NYS参考NC-CLS认可的纸片扩散法判定标