烟草疫霉对木霉r13的拮抗作用

烟草疫霉对木霉r13的拮抗作用

1896年，印度尼西亚的盲肠菌病（phytovamosnic-tinaetuker）发现于印度尼西亚的印度尼西亚病例。这是烟草生产中的一种重要病理疾病。由于其无性繁殖体（孢子囊）形成速度快、数量大，侵染后潜育期短、发病快，在植株生长季节可以进行多次再侵染，环境条件适宜时，短时内可大面积蔓延，造成毁灭性病害。而化学农药在防治植物病害的同时造成的3R(Residue,Resistance,Resujence）现象，影响农业的可持续发展，危及人类健康、破坏生态平衡。因此，筛选疫霉菌生防因子，开发生防制剂，建立一套完整的IPM策略很有必要。国内外对烟草黑胫病的生物防治研究较少。本研究分别通过平板对峙培养、利用烟田营养土温室盆栽对烟草黑胫病进行了木霉生防菌株的筛选。1材料和方法1.1试验中的蘑菇木霉菌株来源见表1，烟草疫霉菌由山东农业大学烟草教研室提供。1.22次培训参照BellD.K.(1982)报道的方法，记载拮抗系数。1.3悬浮液的制备包括稻草、霉水和浮游生物参照谢成颂的方法。1.4由木霉分生虱悬浮液制备参照宋桂经的方法。1.5接种法分布土选择长势大小相同，苗龄40d的烟苗，移栽。还苗10d后，采用灌根接种法，将配制好的木霉分生孢子悬浮液（107cfu/mL）均匀接种烟苗根部营养土。两天后，灌根接种烟草疫霉游动孢子悬浮液（105cfu/mL），并分别设不接木霉只接烟草疫霉和不接木霉也不接烟草疫霉的对照组,重复5次。采用俞大绂对烟草黑胫病的分级标准，计算病情指数与相对防效，统计分析。1.6浮液对烟草黑测定上述实验中防效好的TR18、TR14、TR17菌株，培养后分别配成108、107、106cfu/mL3个不同浓度级的孢子悬浮液，按照1.4中的方法分别测定其对烟草黑胫病的相对防效，每处理设3个重复。2结果与分析2.12次培训由表2看出，在平板对峙培养中TR13对烟草疫霉菌的拮抗作用最强。2.2不同菌株对烟草黑适应证病的病情指数比较从图1看出，大多数木霉菌株对烟草黑胫病有一定的防效。TR18、TR14和TR17的相对防效分别为72.6%、94.2%、97.6%,病情指数分别为12.8、2.8、1.3，从病情指数的统计分析结果（表3）来看，这3株木霉菌对烟草黑胫病的病情指数与对照相比，在α=0.05水平上显著；TR14、TR17对黑胫病的病情指数与对照相比在α=0.01水平上达到极显著，可作为烟草黑胫病的生防菌株。2.3tr17、cff、ld5的浓度级与烟草黑测定相关系数的比较，见表3从图2～4看，木霉菌株TR14、TR17、TR18皆以108cfu/mL浓度级处理效果最好，但为了更经济有效地防治烟草黑胫病，做如下分析选出最佳使用参数。木霉菌株TR14所设3个浓度级108、107、106cfu/mL与烟草黑胫病菌对照组的差异在α=0.05水平上都达到显著，108、107cfu/mL浓度级在α=0.01水平上达到极显著，106cfu/mL没有达到极显著。而3个浓度级之间在α=0.05和α=0.01水平差异不显著（见表4），所以就生产、经济角度来讲选择107cfu/mL浓度级比较理想。TR17的108、107、106cfu/mL3个浓度级处理与烟草黑胫病菌对照组的差异在α=0.05水平上都达到显著，在α=0.01水平上达到极显著，而3个浓度级之间在α=0.05和α=0.01水平上都没有达到显著差异（表5），故选择106浓度级比较理想。TR18的3个浓度级处理与烟草黑胫病菌对照组的差异在α=0.05和α=0.01水平上差异都不显著（表6），从图4来看，TR18处理的浓度越高，防效越好。但该试验与2.2中实验结果有一定的误差，说明TR18的生防效果不够稳定。3不同筛选模式的筛选结果木霉对病原真菌有多种拮抗机制。自然条件下往往多种机制协同作用，而在对峙培养筛选过程中只有部分机制起作用，所以对峙培养筛选的结果与田间测定效果并不一定完全吻合。大田筛选工作量大，周期长，影响因素复杂多变，因而不宜直接用于生防菌筛选。用烟田营养土进行温室盆栽筛选生防菌株，其结果可能更接近田间测定结果。平板对峙培养中TR13对烟草疫霉菌的拮抗作用明显好于其它菌株，拮抗系数达到最高，而在温室盆栽中其相对防效仅达40.3%;TR14与TR17在对峙培养中较其它木霉菌株生长缓慢，对烟草疫霉拮抗作用小，但在温室盆栽试验中对烟草黑胫病的防效相对较高（TR14、TR17相对防效分别为94.2%,97.6%），从而被选作烟草黑胫病的生防菌株。这充分证明不同筛选模式结果的异同性，每种筛选模式都有其内在的局限性。寻找更为接近自然条件又避免劳动量过大