果蝇杂交实验报告

果蝇杂交实验报告实验日期：9月28日-10月20日小组编号：周五5组小构组员：白坦蹊陈朱媛呼波王启明【摘要】实验运用果蝇，这一惯用的遗传学模式生物，进行杂交实验，验证了基因的分离定律、自由组合定律、伴性遗传、基因连锁交换等遗传学规律。报告对实验数据进行了卡方检查，对三隐性状中的基因遗传距离进行了计算，证明实验数据基本符合假设的。【实验原理】遗传定律基因分离定律一对等位基因在杂合状态中保持相对的独立性，在配子形成时，按原样分离到不同的配子中去，理论上配子分离比是1∶1，F2代基因型分离比是1∶2∶1，若显性完全，F2代表型分离比是3∶1。控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，用正常体色果蝇与黑体果蝇交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间互相交配，F2代产生性状分离，出现两种体现型。基因自由组合定律不同相对性状的等位基因在配子形成过程中，等位基因间的分离和组合是互不干扰，各自独立分派到配子中去，它们所决定的两对相对性状在F2代是自由组合的，在杂种第二代表型分离比就呈9∶3∶3∶1。控制体色性状的突变基因位于2号常染色体，正常体色对黑体完全显性，控制眼色性状的突变基因位于性染色体。红眼对白眼完全显性，用黑体红眼果蝇(♀)与正常体色白眼果蝇(♂)交配，得到F1代都是正常体色，F1代雌雄个体之间互相交配，F2代产生性状分离，出现四种体现型。伴性遗传位于性染色体上的基因，其传递方式与位于常染色体上的基因不同，它的传递方式与雌雄性别有关，因此称为伴性遗传。果蝇的性染色体有X和Y两种，雌蝇为XX，雄蝇为XY。红眼与白眼是一对相对性状，控制该对性状的基因(W)位于X染色体上，且红眼(W)对白眼(w)为完全显性。当红眼雌蝇与白眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇、雄性果蝇都为红眼，F2代雌性果蝇都是红眼，雄性果蝇红眼和白眼的比例为1∶1；当白眼雌蝇与红眼雄蝇杂交时，F1代雌性果蝇为红眼，而雄性果蝇为白眼，此现象又称为绞花式遗传，F2代雌性果蝇的红眼与白眼比例为1∶1，雄性果蝇的红眼与白眼比例也是1∶1。连锁与交换定律连锁是指在同一同源染色体上的非等位基因连在一起而遗传的现象；交换是指同源染色体的非姊妹染色单体之间的对应片段的交换，从而引发对应基因间的交换与重组。同一条染色体上的基因是连锁的，而同源染色体基因之间能够发生一定频度的交换，因此在子代中将发现一定频度的重组型，但普通比亲组型少得多。基因定位基因定位就是拟定基因在染色体上的位置，拟定基因的位置重要是拟定基因之间的距离和次序，而它们之间的距离是用交换值来表达的。只要精确地估算出交换值，并拟定基因在染色体上的相对位置就能够把它们标志在染色体上，绘制成图。三点测交三点测交是基因定位最惯用的办法，它是通过一次杂交和一次用隐性亲本测交，同时拟定三对基因在染色体上的位置。果蝇的生活史与雌雄识别果蝇的生活史果蝇的生活史涉及卵、幼虫、蛹、成虫四个持续的发育阶段（图1）。卵：卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，在背面的前端伸出一对触丝，它能使卵附着在柔软的食物上，不至于深陷到食物中去。幼虫：幼虫从卵中孵化出来后，通过两次蜕皮到第三龄期，体长可达4～5mm。在解剖镜下观察可见一端稍尖为头部，并且有一黑点即口器；稍后有一对半透明的唾腺，每条唾腺前有一条唾腺管向前延伸，然后会合成一条导管通向消化道。神经节位于消化道前端的上方。蛹：幼虫生活七天左右即化蛹，化蛹前从培养基中爬出附在瓶壁上，渐次形成一种棱形的蛹。起初颜色淡黄、柔软，后来逐步硬化，变为深褐色，这就显示即将羽化了。成虫：刚羽化出的果蝇，身体狭长，翅还没有展开，身体较白嫩，此时野生型体色与黑檀体体色都是同样的，没有多大区别。很快，蝇体变为粗短椭圆形，双翅展开，体色加深，如野生型果蝇的体色成为灰褐色。图SEQ图\*ARABIC1果蝇的生活史果蝇雌雄的识别体型雌果蝇体型较大，雄果蝇较小；腹部末端雌性腹部椭圆，末端稍尖，雄性末端钝圆；腹部背面雌性有明显5条黑色条纹，雄性有三条，前两条细，后一条宽，延至腹面，肉眼看其腹部末端呈现一明显黑点。腹部腹面雌性有较明显的6个腹片，雄性有4个腹片。性梳雄性第一对足的跗节基部外侧有黑色鬃毛状性梳（图3-3），雌性则无。性梳的有无，是鉴别雌雄性果蝇的明显标志之一【实验材料与办法】实验材料用品：显微镜，麻醉瓶，培养瓶，滤纸，毛笔，标签，恒温培养箱材料：檀黑体突变型果蝇原种(e)、三隐（白眼、小翅、卷刚毛）突变型果蝇原种(m)药品：乙醚，乙醇，培养基实验环节设计杂交组合亲本：正交（m雌×e雄），反交（e雌×m雄）正交产生的F1代继续杂交，产生F2代。第二步:(9.28-9.30)收集处女蝇收集办法:1）放飞成蝇(生长好、靠近羽化蛹多者)2）去除成蝇后的10小时内收集处女蝇杂交接种(次日就要检查,如有死亡及时补救)。杂交瓶上注明:杂交组合、实验日期、实验者姓名。部分蛹变黑,F1即将孵出前，移出亲本蝇。亲本蝇冻存(为避免失败,可留存活蝇适宜时间)，配制新培养基，用于F1同胞交配。F1代果蝇的观察和交配。F1代果蝇孵出7-9d观察统计F1,并选10-20对再杂交于一种或多个新瓶。F1杂交一周后，移出F1代果蝇。亲本蝇冻存。第一只F2代果蝇出现后10天内，观察、统计F2代的成果，进行分析【实验成果及分析】杂交成果杂交获得的果蝇形状数据见表1、表2。表1果蝇杂交成果1正交（m雌×e雄）反交（e雌×m雄）F1表型正常体色、长翅、红眼、直刚毛黑檀体、小翅、白眼、卷刚毛表型正常体色、长翅、红眼、直刚毛黑檀体、小翅、白眼、卷刚毛雌雄雌雄雌雄雌雄数目232700数目150014F2表型正常体色、红眼正常体色、白眼黑檀体、红眼黑檀体、白眼雌1321083743雄97864333累计2291948076表2果蝇A与果蝇B的杂交成果2正交（m雌×e雄）反交（e雌×m雄）F1表型正常体色、长翅、红眼、直刚毛黑檀体、小翅、白眼、卷刚毛表型正常体色、长翅、红眼、直刚毛黑檀体、小翅、白眼、卷刚毛雌雄雌雄雌雄雌雄数目232700数目150014F2表型数目雌雄红眼长翅直刚毛12695白眼小翅卷刚毛6260白眼小翅直刚毛55红眼长翅卷刚毛1114红眼小翅直刚毛1515白眼长翅卷刚毛5536白眼长翅直刚毛2020红眼小翅卷刚毛1313成果分析伴性遗传与自由组合定律的检查图谱分析正交反交P:EEXwXw（正常体色、白眼、雌）×eeXWY（黑檀体、红眼、雄）eeXWXW(黑檀体、红眼、雌)×XWY（正常体色、白眼、雄）F1:EeXWXw（正常体色、红眼、雌）EeXwY（正常体色、白眼、雌）EeXWXw（正常体色、红眼、雌）EeXWY（正常体色、红眼、雌）理论：1：11：1实际：23：2715：14F2：理论：1/4EE正常体色1/2Ee正常体色1/4ee黑檀体1/4XWXw红眼、雌1/161/81/161/4XwXw白眼、雄1/161/81/161/4XWY红眼、雄1/161/81/161/4XwY白眼、雄1/161/81/16表型正常体色、红眼正常体色、白眼黑檀体、红眼黑檀体、白眼雌3/163/161/161/16雄3/163/161/161/16累计3/83/81/81/8实际：表型正常体色、红眼正常体色、白眼黑檀体、红眼黑檀体、白眼雌1321083743雄97864333累计2291948076适合度测验单从上面的分析中我们很难得出结论，因此我们再运用适合度测验来进一步分析。首先分析眼色的伴性遗传：表2眼色伴性遗传的适合度测验红眼白眼累计正交F1表型雌雄雌雄实得数23002750预期数25002550χ20.160P0.841(>0.05)F2表型雌雄雌雄累计实得数169150151119579预期数144.8144.8144.8144.8579χ24.532P0.209(>0.05)反交F1表型雌雄雌雄累计实得数15140029预期数14.514.50029χ20.018P1.000(>0.05)分析:通过适合度测验，能够发现，针对正反交F1代，正交F2代所做的3次适合度测验所得P值均不不大于0.05，且F1代的P值很高，阐明我们得到的实验的数据与理论比率之间差别不明显，假设成立，实验数据能够反映出眼色的伴性遗传规律。接着对控制眼色的基因与控制体色的基因间的自由组合定律做适合度检查：表3眼色、体色基因自由组合定律的适合度测验表型累计正交F2正常体色、红眼正常体色、白眼黑檀体、红眼黑檀体、白眼实得数2291948076579预期数217.1217.172.472.4579χ22.138P0.544(>0.05)分析:通过适合度检查，能够发现P值不不大于0.05，阐明实验值与理论值差别不明显，假设成立，即实验中控制眼色和体色的基因服从自由组合定律。基因的连锁与交换三点测交成果见表4：A红眼长翅直刚毛（+++）B白眼小翅卷刚毛（wmsn）表4三点测交数据统计体现型实验数据雌雄累计+++12695221wmsn6260122wm+5510++sn111425+m+151515w+sn553691w++202040+msn131326累计292258550由上表可知，表型++sn和wm+个体数目最少，应是双交换产物。由此能够推论，基因sn位于w和m中间，三个基因的相对次序为wsnm。因此，计算w-m交换率时，应考虑双交换产物。计算得到的重组率见下表：表5基因重组率计算成果实验值理论值重组率图距雌雄累计w-sn16.8%20.2%18.4%18.419.5m-sn29.5%27.1%25.6%25.615.1w-m46.2%47.3%44.0%44.034.6并发系数1.11.31.4干涉-0.01-0.02-0.02由实验得到的连锁图以下：wsnm18.425.644.0理论连锁图wsnm15.119.634.6分析:实验得到了w、sn、m的相对位置，与理论相符合，但基因的遗传距离与理论值有较大的偏差,另外，得到的并发系数不不大于1，显然不符合实际状况。分析因素可能是：1)实验过程中对果蝇的性状辨识不够精确；2）统计性状时可能出现了漏记或重复；3）样本数量也可能影响交换率的计算。【总结与讨论】果蝇要麻醉要适度，用毛笔等温和的工具挑取果蝇，以免对果蝇造成伤害；果蝇麻醉后应及时观察，以免果蝇苏醒后飞走；培养基干湿度适中，避免果蝇粘在培养基上，麻醉后的果蝇应轻轻倒回培养瓶，避免沾上培养基；观察性状时要认真，特别是小翅和长翅的分辨要明确；及时收集处女蝇，避免处女蝇在杂交实验前已交配；小组内分工合作，高效地进行实验和数据统计。【参考文献】贺竹梅《当代遗传学教程》中山大学出版社当我被上帝造出来时，上帝问我想在人间当一种如何的人，我不假思考的说，我要做一种伟大的世人皆知的人。于是，我来临在了人间。我出生在一种官僚知识分子之家，父亲在朝中做官，精读诗书，母亲知书答礼，温柔体贴，父母给我去了一种好听的名字：李清照。小时侯，受父母影响的我饱读诗书，聪颖伶俐，在朝中享有“神童”的称号。小时候的我天真活泼，才思敏捷，小河畔，花丛边撒满了我的诗我的笑，无可置疑，小时侯的我愉快无虑。“兴尽晚回舟，误入藕花深处。争渡，争渡，惊起一滩鸥鹭。”青春的我犹如一只小鸟，自由自在，没有约束，少女纯净的心灵常在朝阳小，流水也被自然洗礼，纤细的手指拈一束花，轻抛入水，随波荡漾，发髻上沾着晶莹的露水，双脚任水流轻抚。身影轻飘而过，留下一阵清风。可是晚年的我却生活在一片黑暗之中，家庭的衰败，社会的变化，消磨着我那柔弱的心。我几乎对生活绝望，每天在痛苦中消磨时光，一切都好象是灰暗的。“寻寻觅觅冷冷清清凄凄惨惨戚戚”这千古叠词句就是我当时心情的写照。最后，香消玉殒，我在痛苦和哀怨中凄凉的死去。在天堂里，我又见到了上帝。上帝问我过的怎么样，我摇摇头又点点头，我的一生有欢乐也有坎坷，有笑声也有泪水，有鼎盛也有衰落。我始终无法客观的评价我的一生。我原觉得做一种着名的人，一生应当是被欢乐荣誉所包围，可我发现我错了。于是在下一轮回中，我选择做一种平凡的人。我来到人间，我是一种平凡的人，我既不着名也不出色，但我拥有一切的幸福：我有温馨的家，我有可亲可爱的同窗和老师，我每天平凡而愉快的活着，这就够了。天儿蓝蓝风儿轻轻，暖和的春风带着春的气息吹进明亮的教室，我坐在教室的窗前，望着我拥有的一切，我甜甜的笑了。我拿起手中的笔，不禁想起曾经作诗的李清照，我即使没有横溢的才华，但我还是拿起手中的笔，用最朴实的语言，写下了一时的感受：人生并不总是完美的，每个人都会有不如意的地方。这就需要我们静下心来阅读自己的人生，体会其中无尽的愉快和与众不同。“富不读书富很快，穷不读书终究穷。”为什么从古到今都那么看重有学识之人？那是由于有学识之人可觉得社会做出更大的奉献。那时由于读书能给人带来愉快。自从看了《丑小鸭》这篇童话之后，我变了，变得开朗起来，变得乐意同别人交往，变得自信了……由于我懂得：即使现在我是只“丑小鸭”，但只要有自信，总有一天我会变成“白天鹅”的，并且会是一只世界上最美丽的“白天鹅”……我读完了这篇美丽的童话故事，深深被丑小鸭的自信和乐观所折服，并把故事讲给了外婆听，外婆也对童话带给我们的深刻道理而惊讶不已。还吵着闹着多看几本名着。于是我给外婆又买了几本名着故事，她起先自己读，读到不认识的字我就告诉她，如果这一面生字较多，我就读给她听整个一面。渐渐的，自己的语文阅读能力也提高了不少，与此同时我也发现一种人读书的乐趣远不及两个人读的乐趣大，而两个人读书的乐趣远不及全家一起读的乐趣大。于是，我便发展“业务”带动全家一起读书……现在，每每碰到好书大家也不分男女老少都一拥而上，争先恐后“抢书”，当我说起我最小应当让我的时候，却没有人搭理我。最后还把书给撕坏了，我愤怒地哭了，妈妈一边安慰我一边对外婆说：“孩子小，应当让着点。”外婆却不服气的说：“我这一把年纪的了，怎么没人让我呀？”大家人你一言我一语，谁也不肯相让……读书让我明白了善恶美丑、悲欢离合，读一本好书，犹犹如智者谈心、谈抱负，教你分辨善恶，教你弘扬正义。读一本好书，如品一杯香茶，余香回绕。读一本好书，能使人心灵得到净化。书是我的老师，把知识传递给了我；书是我的伙伴，跟我诉说心里话；书是一把钥匙，给我敞开了知识的大门；书更是一艘不会沉的船，引领我航行在人生的长河中。其实读书的真真乐趣也就在于此处，不是一种人闷头苦读书；也不是读到好处不与别人分享，独自品位；更不是一种人如痴如醉地沉醉在书的海洋中不能自拔。而是懂得与朋友，家人一起分享其中的乐趣。这才是读书真正之乐趣呢！这全部的一切，不正是我从书中受到的教益吗？我阅读，故我美丽；我思考，故我存在。我从内心深处真切地感到：我从读书中受到了教益。当看见有些同窗宁可买玩具亦不肯买书时，我便想到培根所说的话：“世界上最庸俗的人是不读书的人，最吝啬的人是不买书的人，最可怜的人是与书无缘的人。”许许多多的作家、伟人都十分喜欢看书，例如毛泽东主席，他半边床上都是书，一读起书来便进入忘我的境界。书是我生活中的好朋友，是我人生道路上的航标，读书，读好书，是我无怨无悔的追求。一种人的谈吐有无“味道”，完全要看他的读书办法。如果读者获得书中的“味”，他便会在谈吐中把这种风味体现出来；如果他的谈吐中有风味，他在写作中也免不了会体现出风味来。因此，我认为风味或嗜好是阅读一切书籍的核心。这种嗜好跟对食物的嗜好同样，必然是有选择性的，属于个人的。吃一种人所喜欢吃的东西终究是最合卫生的吃法，由于他懂得吃这些东西在消化方面一定很顺利。读书跟吃东西同样，“此人吃来是蜜糖，别人吃来是砒霜”。教师不能以其所好强迫学生去读，父母也不能但愿儿女的嗜好和他们同样。如果读者对他所读的东西感不到趣味，那么全部的时间全都浪费了。因此，永远记得，这世间上没有什么一种人必读的书，只有在某时某地，某种环境，和生命中的某个时期必读的书。读书和婚姻同样，是命运注定的或阴阳注定的。纵使某一本书，如《圣经》之类，是人人必读的，读这种书也一定应当在适宜的时候。当一种人的思想和经验还没有达成阅读一本杰作的程度时，那本杰作只会留下不好的滋味。孔子曰：“五十以学《易》。”便是说，四十五岁时候尚不可读《易经》。孔子在《论语》中的训言的冲淡温和的味道，以及他的成熟的智慧，非到读者自己成熟的时候是不能观赏的。四十学《易》是一种味道，到五十岁，看过更多的人世变故的时候再去学《易》，又是一种味道。因此，一切好书重读起来都能够获得益处和新乐趣。多读书，能够让你觉得有许多的写作灵感。能够让你在写作文的办法上用的更加好。在写作的时候，我们往往能够运用某些书中的好词好句和生活哲理。让别人觉得你更富有文采，美感。

多读书，能够让你全身都有礼节。俗话说：“第一印象最重要。”从你留给别人的第一印象中，就能够让别人看出你是什么样的人。因此多读书能够让人感觉你知书答礼，颇有风度。

多读书，能够让你多增加某些课外知识。培根先生说过：“知识就是力量。”不错，多读书，增加了课外知识，能够让你感到浑身充满了一股力量。这种力量能够激励着你不停地迈进，不停地成长。从书中，你往往能够发现自己身上的局限性之处，使你不停地改正错误，摆正自己迈进的方向。因此，书也是我们的良师益友。

多读书，能够让你变聪颖，变得有智慧去战胜对手。书让你变得更聪颖，你就能够勇敢地面对困难。让你用自己的办法来解决这个问题。这样，你又向你自己的人生道路上迈出了一步。

多读书，也能使你的心情便得愉快。读书也是一种休闲，一种娱乐的方式。读书能够调节身体的血管流动，使你身心健康。因此在书的海洋里遨游也是一种无限愉快的事情。用读书来为自己放松心情也是一种十分明智的。

读书能陶冶人的情操，给人知识和智慧。因此，我们应当多读书，为我们后来的人生道路打下好的、扎实的基础！

“书籍是全世界的营养品,生活里没有书籍,就好象没有阳光;智慧里没有书籍,就好象鸟儿没有翅膀。”（[英]莎士比亚）。“一本新书象一艘船,带领着我们从狭隘的地方,驶向生活的无限广阔的海洋。”（[瑞士]凯勒）。“不读书就没有真正的学问,没有也不可能有观赏能力、文采和广博的见识。……不读书的人就不是一种完人。”（[俄]赫尔岑）。多读书,能够开阔视野,增加见识,启迪智慧,能够使自己在工作中有所发明,有所成就;多读书,能够丰富自己的知识宝库,进一步懂得生活,能够提高自己的文采和对艺术的观赏能力,能够变“下里巴人”为“阳春白雪”,从而使自己的生活更加丰富多采,充满情趣。“书是随时在近旁的顾问,随时都能够供应你所需要的知识,并且能够按照你的心意,重复这顾问的次数。”（凯勃司）。知识就是力量,科学技术就是生产力。要想建设一种含有高度精神文明的社会主义强国,没有一定的科学技术水平是不行的;科学技术仅为少数人所掌握,也是不行的,特别是在科学技术高度发达的今天,更是如此。而要想让全部的人都上学学习,是不可能的。那么,就只有在工作中学习,运用一切能够运用的时间和条件自学。在自学过程中,不可能人人都能得到指导老师,那么,最佳的老师就是书籍。“书籍蜿蜒伸入我们的心灵,诗人的诗句在我们的血流里舒缓地滑行。我们年轻时诵读它们,年老时仍然铭记它们。我们读到别人的遭遇,却感到身历其境。书籍到处可得,并且价廉物美。我们就象呼吸空气中的氧同样吸取书中的营养。”([英]哈慈利特)。读书有这样多的好处,而书籍又可随时随处买到,并且花钱不多;时间,工作之余也是足够的;精力,20岁左右的小伙子和姑娘们是充沛的。这种年纪,记忆力旺盛,分析判断能力也已达成一定程度,且无家室之累,正是集中精力学习知识的黄金时代,千万不要白白地浪费掉。中国有句古话:“少壮不努力,老大徒伤悲”。待到自己在波折的人生中悟出应当多学本领的道理,想学的时候,由于年纪的增加,记忆力衰退,由于家庭的重负,精力集中不起来,那时想学也学不好了。与其那时后悔终身,倒不如现在就努力学习。“学海无涯勤是岸,云程有路志是梯”,“勤奋能点燃智慧的火苗,懒惰是埋葬天才的坟墓”。“业精于勤,荒于嬉;行成于思,毁于随。”（[唐]韩愈）。成功的喜悦,永远都是只属于那些勤奋好学,勇于攀登的人们。“如果你们,年轻的人们,真正但愿过‘很宽敞,很美妙的生活’,就发明它吧,和那些正在英勇地建立空前未有的、宏伟的事业的人手携手地去工作吧。”（[苏]高尔基）。为了能够工作得更加好和生活得更美妙,读书学习吧,年轻的朋友!古人云：“书中自有黄金屋，书中自有颜如玉。”可见，古人对读书的情有独钟。其实，对于任何人而言，读书最大的好处在于：它让求知的人从中获知，让无知的人变得有知。读史蒂芬?霍金的《时间简史》和《果壳中的宇宙》，畅游在粒子、生命和星体的处境中，感受智慧的光泽，犹如攀登高山同样，瞬间眼前呈现出仿佛九叠画屏般的开阔视野。于是，便像李白在诗中所写到的“庐山秀出南斗旁，屏风九叠云锦张，影落明湖青黛光”。对于坎坷波折的人生道路而言，读书便是最佳的润滑剂。面对苦难，我们苦闷、彷徨、悲哀、绝望，甚至我们低下了曾经高贵骄傲的头。然而我们可否想到过书籍能够予以我们但愿和勇气，将慰藉缓缓注入我们干枯的心田，使黑暗的天空再现光辉？读罗曼?罗兰创作、傅雷先生翻译的《名人传》，让我们从伟人的生涯中汲取生存的力量和战斗的勇气，更让我们明白：唯有真实的苦难，才干驱除罗曼谛克式幻想的苦难；唯有克服苦难的悲剧，才干协助我们担当起命运的磨难。读海伦?凯勒一种个真实而动人肺腑的故事，感受遭受不济命运的人所含有的自强不息和从容豁达，从而让我们在并非一帆风顺的人生道路上越走越勇，做命运真正的主宰者。在书籍的带领下，我们不停磨炼自己的意志，而我们的心灵也将渐渐充实成熟。读书能够荡涤浮躁的尘埃污秽，过滤出一股沁人心脾的灵新之气，甚至还能够营造出一种超凡脱俗的娴静氛围。下午13：00—17：00B．实施不定时工作制的员工，在确保完毕甲方工作任务状况下，经公司同意,可自行安排工作和休息时间。3．1．2打卡制度3.1.2.1公司实施上、下班指纹录入打卡制度。全体员工都必须自觉恪守工作时间，实施不定时工作制的员工不必打卡。3.1.2.2打卡次数：一日两次，即早上上班打卡一次，下午下班打卡一次。3.1.2.3打卡时间：打卡时间为上班到岗时间和下班离岗时间；3.1.2.4因公外出不能打卡：因公外出不能打卡应填写《外勤记录表》,注明外出日期、事由、外勤起止时间。因公外出需事先申请，如因特殊状况不能事先申请，应在事毕到岗当天完毕申请、审批手续，否则按旷工解决。因停电、卡钟（工卡）故障未打卡的员工，上班前、下班后要及时到部门考勤员处填写《未打卡补签申请表》，由直接主管签字证明当天的出勤状况，报部门经理、人力资源部同意后，月底由部门考勤员据此上报考勤。上述状况考勤由各部门或分公司和项目文员协助人力资源部进行管理。3.1.2.5手工考勤制度3.1.2.6手工考勤制申请：由于工作性质，员工无法正常打卡（如外围人员、出差），可由各部门提出人员名单，经主管副总同意后，报人力资源部审批备案。3.1.2.7参加手工考勤的员工，需由其主管部门的部门考勤员(文员)或部门指定人员进行考勤管理，并于每月26日前向人力资源部递交考勤报表。3.1.2.8参加手工考勤的员工如有请假状况发生，应恪守有关请、休假制度，如实填报有关表单。3.1.2.9外派员工在外派工作期间的考勤,需在外派公司打卡统计;如遇半途出差,持出差证明,出差期间的考勤在出差地所在公司打卡统计;3.2加班管理3.2.1定义加班是指员工在节假日或公司规定的休息日仍照常工作的状况。A．现场管理人员和劳务人员的加班应严格控制，各部门应按月工时原则，合理安排工作班次。部门经理要严格审批员工排班表，确保员工有效工时达成规定。但凡达成月工时原则的，应扣减员工本人的存休或工资；对超出月工时原则的，应阐明理由，报主管副总和人力资源部审批。B．因员工月薪工资中的补贴已涉及延时工作补贴，因此延时工作在4小时（不含）下列的，不再另计加班工资。因工作需要，普通员工延时工作4小时至8小时可申报加班半天，超出8小时可申报加班1天。对主管(含)以上管理人员，普通状况下延时工作不计加班，因特殊状况经总经理以上领导同意的延时工作，可按以上原则计加班。3.2.2.2员工加班应提前申请，事先填写《加班申请表》，因无法拟定加班工时的，应在本次加班完毕后3个工作日内补填《加班申请表》。《加班申请表》经部门经理同意，主管副总经理审核报总经理同意后有效。《加班申请表》必须事前当月内上报有效，如遇特殊状况，也必须在一周内上报至总经理同意。如未推行上述程序，视为乙方自愿加班。3.2.2.3员工加班，也应按规定打卡，没有打卡统计的加班，公司不予承认；有打卡统计但无公司总经理同意的加班，公司不予承认加班。3.2.2.4原则上，参加公司组织的多个培训、集体活动不计加班。3.2.2.5加班工资的赔偿：员工在排班休息日的加班，能够以倒休形式安排补休。原则上，员工加班以倒休形式补休的，公司将根据工作需要统一安排在春节前后补休。加班可按1：1的比例抵冲病、事假。3.2.3加班的申请、审批、确认流程3.2.3.1《加班申请表》在各部门文员处领取，加班统计周期为上月26日至本月25日。3.2.3.2员工加班也要按规定打卡，没有打卡统计的加班，公司不予承认。各部门的考勤员(文员)负责《加班申请表》的保管及加班申报。员工加班应提前申请，事先填写《加班申请表》加班前到部门考勤员(文员)处领取《加班申请表》，《加班申请表》经项目管理中心或部门经理同意，主管副总审核，总经理签字同意后有效。填写并推行完审批手续后交由部门考勤员(文员)保管。3.2.3.3部门考勤员（文员）负责检查、复核确认考勤统计的真实有效性并在每月27日汇总交人力资源部，逾期未交的加班统计公司不予承认。下午13：00—17：00度。全体员工都必须自觉恪守工作时间，实施不定时工作制的员工不必打卡。3.1.2.2打卡次数：一日两次，即早上上班打卡一次，下午下班打卡一次。3.1.2.3打卡时间：打卡时间为上班到岗时间和下班离岗时间；3.1.2.4因公外出不能打卡：因公外出不能打卡应填写《外勤记录表》,注明外出日期、事由、外勤起止时间。因公外出需事先申请，如因特殊状况不能事先申请，应在事毕到岗当天完毕申请、审批手续，否则按旷工解决。因停电、卡钟（工卡）故障未打卡的员工，上班前、下班后要及时到部门考勤员处填写《未打卡补签申请表》，由直接主管签字证明当天的出勤状况，报部门经理、人力资源部同意后，月底由部门考勤员据此上报考勤。上述状况考勤由各部门或分公司和项目文员协助人力资源部进行管理。3.1.2.5手工考勤制度3.1.2.6手工考勤制申请：由于工作性质，员工无法正常打卡（如外围人员、出差），可由各部门提出人员名单，经主管副总同意后，报人力资源部审批备案。3.1.2.7参加手工考勤的员工，需由其主管部门的部门考勤员(文员)或部门指定人员进行考勤管理，并于每月26日前向人力资源部递交考勤报表。3.1.2.8参加手工考勤的员工如有请假状况发生，应恪守有关请、休假制度，如实填报有关表单。3.1.2.9外派员工在外派工作期间的考勤,需在外派公司打卡统计;如遇半途出差,持出差证明,出差期间的考勤在出差地所在公司打卡统计;3.2加班管理3.2.1定义加班是指员工在节假日或公司规定的休息日仍照常工作的状况。A．现场管理人员和劳务人员的加班应严格控制，各部门应按月工时原则，合理安排工作班次。部门经理要严格审批员工排班表，确保员工有效工时达成规定。但凡达成月工时原则的，应扣减员工本人的存休或工资；对超出月工时原则的，应阐明理由，报主管副总和人力资源部审批。B．因员工月薪工资中的补贴已涉及延时工作补贴，因此延时工作在4小时（不含）下列的，不再另计加班工资。因工作需要，普通员工延时工作4小时至8小时可申报加班半天，超出8小时可申报加班1天。对主管(含)以上管理人员，普通状况下延时工作不计加班，因特殊状况经总经理以上领导同意的延时工作，可按以上原则计加班。3.2.2.2员工加班应提前申请，事先填写《加班申请表》，因无法拟定加班工时的，应在本次加班完毕后3个工作日内补填《加班申请表》。《加班申请表》经部门经理同意，主管副总经理审核报总经理同意后有效。《加班申请表》必须事前当月内上报有效，如遇特殊状况，也必须在一周内上报至总经理同意。如未推行上述程序，视为乙方自愿加班。3.2.2.3员工加班，也应按规定打卡，没有打卡统计的加班，公司不予承认；有打卡统计但无公司总经理同意的加班，公司不予承认加班。3.2.2.4原则上，参加公司组织的多个培训、集体活动不计加班。3.2.2.5加班工资的赔偿：员工在排班休息日的加班，能够以倒休形式安排补休。原则上，员工加班以倒休形式补休的，公司将根据工作需要统一安排在春节前后补休。加班可按1：1的比例抵冲病、事假。3.2.3加班的申请、审批、确认流程3.2.3.1《加班申请表》在各部门文员处领取，加班统计周期为上月26日至本月25日。3.2.3.2员工加班也要按规定打卡，没有打卡统计的加班，公司不予承认。各部门的考勤员(文员)负责《加班申请表》的保管及加班申报。员工加班应提前申请，事先填写《加班申请表》加班前到部门考勤员(文员)处领取《加班申请表》，《加班申请表》经项目管理中心或部门经理同意，主管副总审核，总经理签字同意后有效。填写并推行完审批手续后交由部门考勤员(文员)保管。3.2.3.3部门考勤员（文员）负责检查、复核确认考勤统计的真实有效性并在每月27日汇总交人力资源部，逾期未交的加班统计公司不予承认。下午13：00—17：00度。全体员工都必须自觉恪守工作时间，实施不定时工作制的员工不必打卡。3.1.2.2打卡次数：一日两次，即早上上班打卡一次，下午下班打卡一次。3.1.2.3打卡时间：打卡时间为上班到岗时间和下班离岗时间；3.1.2.4因公外出不能打卡：因公外出不能打卡应