制何首乌的研究进展

制何首乌的研究进展

何首乌是蓼科植物的多年生干燥部位。具有解毒消痈、润肠通便的功效。制何首乌为何首乌的炮制品,具有补肝肾、益精血、乌须发、强筋骨的功效。现代研究表明,何首乌在炮制过程中,化学成分和药理作用都发生了明显的改变,药效也随之改变,临床生用与制用功效各异,引起中药研究者的广泛关注。1何首乌的化学成就1.1大黄素co-o--d-d-glucopica、小黄素chrachrachrachi有效衍生物--d-glucopica、小黄素chrachrachrachra都、小黄素aloi-7-methol-3-菌株,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,7,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,5,大黄素(emodin),大黄素甲醚(physcion),大黄素-1,6-二甲醚(emotion-l,6-dime-thylether),大黄素-8-甲醚(questin),ω-羟基大黄素(eitreorosein),ω-羟基大黄素-8-甲醚(questinol),2-乙酰基大黄素(2-acetylemedin),大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(emodin-8-O-β-D-glueoside),大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷(Physeion-8-O-β-D-glueoside),2-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃醌(2-methoxy-6-acetyl-7-methyljuglone),大黄素-3-乙醚(emodin-3-ether),大黄酚(chrysophanol)、大黄酚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(chrysophanol-8-O-β-D-glucopyranoside),决明酮-8-O-β-D-葡萄糖苷(torachrysone-8-O-β-D-glucopyranoside),大黄酚蒽酮(chrysophanolanthrone),大黄酸(rhein),芦荟大黄素(aloeemodin)。1.2-n,3-o-吡啶糖苷,3-o-p-n-4-3-o-4-o-4-2,3-o-4-3,5-dige-5,7-dimethy苜蓿素(tricin),儿茶素((+)-catechin),表儿茶素((+)-epicatechin),1,3-二羟基-6,7-二甲基双苯吡酮-1-O-β-D-葡萄糖苷(何首乌乙素,1,3dinydroxy-6,7-dimethylxanthone),槲皮素-3-O-半乳糖苷(quereetin-3-O-galactoside),槲皮素-3-O-阿拉伯糖苷(quercetin-3-O-arabinoside)。1.3-二苯乙烯-2,3-四羟基二苯乙烯-2-o-5,4-二苯乙烯-2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-o-5,4,5,4-四羟基二苯乙烯-2-o--d-glucopyranos--d-glucopyrano-4,5,4,4,5,4,4,5,4,4,4-四羟基自2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahydroxy-stilbene-2-O-β-D-glucoside),2,3,5,4′-四羟基-二苯乙烯-2,3-二-O-β-D-葡萄糖苷(polygonimitinC),2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-(6′-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-(6′-O-acetyl)-β-D-glucopyranoside),2,3,5,4′-四羟基-二苯乙烯-2-O-(6′-O-α-D-吡喃葡萄糖)-β-D-吡喃葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahydroxystilbene-2-O-(6″-O-α-D-glucopyranosyl)-β-D-glueopyrano-side)。1.4化合物的合成古巴烯(copaene),(反,反)2,4-癸二烯醛(E,E)-2,4-decadienal),己酸Hexanoicacid),二十碳烷(eicosane),6,10,14-三甲基-2-十五烷酮(6,10,l4-trimethyl-2-pentadecanone),十六碳烷酸甲酯(hexadecanoicacidmethylester),十六碳烷酸乙酯(hexadecanoicacidethylester),二十碳酸甲酯(octadecanoicacidmethylester),二十碳酸乙酯(octadecanoicacidethylester),二十二酸乙酯(docosanoicacidethylester)。1.5正十二碳二烯酰-3-o-磷脂酸-o--d-葡萄糖苷l-o-steariol-3-o,5-o-b-glucosica以及1-o-b-d-glucosical-o-b-d-glucosica磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺,磷脂酸,磷脂酰甘油,双磷脂酰甘油,卵磷脂,磷脂酰肌醇,脑磷脂,N-溶离脑磷脂,神经鞘磷脂,1-O-正十八烷酰-2-O-△4′,7′-正十二碳二烯酰-3-O-磷脂酸-O-β-D-葡萄糖苷(l-O-stearoyl-2-O-△4′,7′-dedecenoyl-3-O-phosphatidicacid-O-β-D-glucoside),1-O-正十八烷酰-2-O-△4′,7′-正十二碳二烯酰-3-O-磷脂酸-O-(6”-o-a-D-葡萄糖)-β-D-葡萄糖苷(l-O-stearoyl-2-O-△4′,7′-dodecenoyl-3-O-phosphatidicacid-O-(6”-O-a-D-glucoside)-β-D-glucoside)。1.6酰胺类及酰胺类化合物1,2-二羟基十九酮-3,五味子素,没食子酸甲酯,没食子酸,胡萝卜苷,β-谷甾醇,各种微量元素Zn、Mn、Cu、Fe、Mg、Si、Ni、V、AI、Co、sr、Cr、Ti、Ba、Ca、Pb、K、Na,酰胺类穆坪马兜铃酰胺(N-trans-feruloyltyramine),N-反式阿魏酰基-3-甲基多巴胺(N-transferuloyl-3-methyldopamine)和吲哚类化合物吲哚-3-(L-α-氨基-α-羟基丙酸)甲酯(Indole-3-(L-aamino-a-hydroxypropronicacid)methylester)。2功能分离和表征陈万生等从广东德庆产制首乌的氯仿部分中分离得到12个单体化合物,鉴定了其中7个化合物。分别为大黄素、大黄素甲醚(Ⅱ)、大黄素-3-乙醚(Ⅲ)、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(2,3,5,4′-tetrahy-droxystilbene-2-O-β-D-glucoside,Ⅳ)、五味子素(schizandrin,Ⅴ)、β-谷甾醇(β-sitosterol,Ⅵ)、胡萝卜苷(β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranoside,Ⅶ)。其中,Ⅲ为新化合物,命名为大黄素-3-乙醚;Ⅴ是首次从蓼属中药中分得,为首乌保肝活性成分之一。从制首乌正丁醇萃取部分中的化学成分分离纯化,应用理化常数测定和光谱(IR,MS,1H-NMR,13C-NMR,2D-NMR)分析技术鉴定结构。分离并鉴定了2个磷脂类单体化合物:1-O-正十八烷酰-2-O-Δ4′,7′-正十二碳二烯酰-3-O-磷脂酸-O-β-D-葡萄糖苷(1-O-stearoyl-2-O-Δ4′,7′-dodecenoyl-3-O-phosphatidicacid-O-β-D-glucoside)、1-O-正十八烷酰-2-O-Δ4′,7′-正十二碳二烯酰-3-O-磷脂酸-O-(6″-O-α-D-葡萄糖)-β-D-葡萄糖苷[1-O-stearoyl-2-O-Δ4′,7′-dodecenoyl-3-phosphatidicacid-O-(6″-O-α-D-glucose)-β-D-glucoside]。分离并鉴定了5个单体化合物:大黄素甲醚-8-O-β-D-葡糖苷、大黄素-8-O-D-葡糖苷、决明蒽酮-8-O-β-D-葡糖苷、6-甲氧基-2-乙酰基-3-甲基-1,4-萘醌-8-O-β-D-葡糖苷、2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-(2″-O-乙酰基)-β-D-葡糖苷(V)。采用气相色谱-质谱法(GC-MS),结合计算机检索及标准图谱对照对制首乌醇浸膏的石油醚溶解部分的油状物进行分析,共分离了33种化合物,鉴定了其中的27种,主要为脂肪酸脂。刘振丽等主要研究了何首乌炮制后化学成分的变化及中药中的Maillard反应,通过大孔树脂、聚酰胺和C18柱层析分离技术,从中分离得到16个化合物,通过物理化学及波谱数据测定,分别鉴定为:2,3-二氢-3,5-二羟基-6-甲基-4氢-吡喃-4-酮(1)、5-羟甲基糠醛(2)、3,5-二羟基-2-甲基-4氢-吡喃-4-酮(3)、琥珀酸(4)、对苯二酚(5)、对羟基苯甲醛(6)、没食子酸(7)、ω-羟基大黄素(8)、ω-羟基大黄素-8-甲醚(9)、2,3,5,4,-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷(10)、大黄素-8-0-β-D-葡萄糖苷(11)、大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖昔(12)、大黄素-8-甲醚(13)、2-甲氧基-6-乙酰基-7-甲基胡桃醌(14)、大黄素(15)、大黄素甲醚(16)。化合物1~5为首次从该植物中分离得到,化合物1~4为炮制产生。3不同制剂对治疗形成品中游离成分的影响张艳君等考察了不同炮制方法对何首乌成分的影响。黑豆汁制、黑豆汁蒸制、黑豆汁煮制、甘草煮制不同方法对何首乌中主要成分二苯乙烯苷、游离蒽醌等都有影响。甘草制何首乌中二苯乙烯苷含量较高,其他略低于生品,游离蒽醌含量均降低。结论得出制何首乌的炮制方法以黑豆蒸或煮8h及甘草煮为好。范世明等做了炖制和蒸制何首乌的质量比较,经薄层色谱定性鉴别和HPLC含量测定,结果发现炖制法炮制的何首乌中游离大黄素及二苯乙烯苷的含量均高于蒸制法炮制的何首乌药材。刘振丽等对制首乌的炮制工艺进行了研究,比较了不同炮制方法对何首乌有效成分二苯乙烯苷、没食子酸、儿茶素、总游离蒽醌、结合蒽醌含量的影响。最后确定了制首乌的炮制工艺:取何首乌块(边长约1cm)置非铁质的适宜容器内,加入定量黑豆汁,拌匀,中间上下翻动几次,待汁吸尽,装非铁质密闭容器内,照炖法,水加热,或用蒸汽加热,每天炖足8h,焖过夜,翌晨上下翻动1次,再炖,如此反复蒸4d(32h),放凉,取出,低温干燥或阴干。每100kg净何首乌,加入25kg黑豆汁。黑豆汁制法:取黑豆10kg,加入8倍水,煮4h,熬汁约15kg,豆渣再加水6倍,煮3h,熬汁约10kg,合并得黑豆汁约25kg。4养肝养肾以养肝制何首乌性温味苦涩,苦能补肾,温能补肝,能收敛精气,所以能养血益肝、固精益肾,为滋补良药;可以延缓衰老、调节血脂、抗动脉粥样硬化、抗心肌缺血、提高记忆、改善骨质疏松和增强免疫。4.1抗衰老、调节免疫作用4.1.1治疗老龄大鼠nk细胞活性检测徐富一等研究发现制何首乌能增加骨多孔症白鼠的脊椎骨密度和骨无机质成分的含量。熊平源等采用溶血素测定法检测何首乌对老龄大鼠溶血素抗体产生的影响;参照LDH法检测何首乌对老龄大鼠NK细胞活性的影响;采用3H-TdR掺入法检测何首乌对老龄大鼠淋巴细胞增殖活性的影响;采用姬姆萨染色法检测老龄大鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。结果表明,药物实验组与老龄对照组比较,溶血素抗体产生水平明显增加(P<0.01);NK细胞的细胞毒活性明显增强(P<0.01);T、B淋巴细胞的转化增殖活性增强(P<0.05;P<0.01);腹腔巨噬细胞吞噬功能也明显增强。4.1.2功能上的活性吕丽爽从何首乌中分离纯化得到二苯乙烯苷晶体,纯度达到99.8%,并通过X衍射验证为针状晶体,NMR鉴定了其结构式。同时对照白藜芦醇对其抗氧化清除自由基性能进行了测定。包括还原能力、亚油酸体系抗氧化性能以及清除DPPH自由基、清除羟基自由基、清除超氧阴离子能力。结果表明:其对几种自由基清除表现出了不同的效能,排序为超氧阴离子IC50>羟基自由基IC50>DPPH自由基IC50>组织过氧化脂质IC50。通过与白藜芦醇对照,在分子结构上二苯乙烯苷在苯环2位多一个酚羟基,并形成了糖苷。而在功能上,实验证实二苯乙烯苷抗氧化性能较白藜芦醇明显突出。可见酚羟基的数目及在苯环的位置对其抗氧化性能有很大影响。巨噬细胞是机体固有免疫的重要组成细胞,是执行固有免疫的效应细胞,同时在特异性免疫应答的各个阶段也起重要作用。其主要功能是通过吞噬作用清除体内衰老损伤或凋亡的细胞,以及免疫复合物和病原体等抗原性异物。活化巨噬细胞可以通过分泌多种细胞因子如IL-1β、TNF-α、IL-6等参与免疫调节。熊平源等研究发现何首乌能增强小鼠腹腔巨噬细胞介导的细胞毒活性、IL-1β的分泌活性及吞噬功能,提示何首乌不仅能增强机体的特异性免疫,还能促进机体的固有免疫。4.2造血功能的评价黄志海等分离何首乌水提液的不同药效部位,评价其对造血功能的影响。用陶瓷微滤膜分离何首乌水煎液药效部位,取膜分离所得上清液作受试液,从外周血象变化、红系祖细胞(BFU-E)和粒单细胞集落形成细胞(CFU-GM)角度评价其对造血功能的影响。结果何首乌水煎液和膜分离所得上清液对造血障碍动物外周血象、红系祖细胞(BFU-E)均有不同程度的改善。何首乌膜分离所得上清液有改善动物造血功能障碍的作用,其改善造血功能的作用优于水煎液。4.3防止动脉斑块破裂,预防心源性ld魏雪梅等发现何首乌总苷能通过抑制胶原纤维降解而使动脉粥样硬化斑块稳定,从而防止动脉粥样硬化斑块的破裂,预防心源性猝死和急性冠状动脉事件。4.4对二甲苯所致耳壳水肿的抗炎作用徐正哲等采用二甲苯、巴豆油致小鼠耳壳发炎肿胀,再测定不同蒸制时间的制首乌对小鼠耳壳肿胀的影响,计算肿胀度,并与生理盐水组、消炎痛组进行比较。结果黑豆汁制各组与生理盐水组进行比较二甲苯、巴豆油致小鼠耳壳肿胀度明显减少,且随着蒸制时间的延长,抗炎作用增强。其中黑豆汁制8h、10h与消炎痛组比较对二甲苯所致耳壳肿胀的抗炎作用相当,说明黑豆汁制首乌各组均有抗炎作用,且以黑豆汁制10h为抗炎作用最佳蒸制时间。张又枝研究了二苯乙烯苷的抗炎作用及其机制,得出以下结论:(1)THSG有抗小鼠耳廓急性炎症作用,此作用可能与抑制急性期小鼠耳局部血管扩张和毛细血管通透性增加的非特异性炎症反应有关。(2)THSG有抗大鼠足趾肿胀的作用,此作用可能与抑制大鼠足趾局部炎症介质如前列腺素和5-羟色胺的释放有关。(3)经过MTT法检测THSG在100μmol/L时对细胞存活率没有明显作用,表明THSG对细胞没有毒性。(4)THSG1μmol/L,10μmol/L,100μmol/L能够浓度依赖性地减少内源性AA代谢生成的PGE2产量,表明THSG能够直接抑制PGE2产量,此作用可能与抑制基因水平COX-2表达或者是直接抑制COX-2酶活性有关。4.5不同剂量有关四氧吡啶性糖的检测糖尿病(diabetesmellitus,DM)是一种慢性代谢紊乱性疾病,其治疗仍然是一个世界性的难题。童妍等研究了炮制对峨眉何首乌降糖作用的影响,随机选100只健康小鼠,10只为正常对照组,其余腹腔注射四氧嘧啶生理盐水注射液(120mg/kg),建立四氧嘧啶性糖尿病模型,用葡萄糖氧化酶法检测血糖值,选取血糖值>20mmol/L者为造模成功小鼠,随机分为8组,即模型对照组,生何首乌高、中、低剂量组,酒制何首乌高、中、低剂量组,二甲双胍组,连续给药7d取血测血糖。结果表明酒制何首乌组对糖尿病模型小鼠的降糖作用明显。4.6抗肝纤维化的作用靳文杰进行了制何首乌抗四氯化碳致大鼠肝纤维化的实验研究。结果发现制何首乌煎液可以提高四氯化碳致慢性肝损害大鼠的血清白蛋白,减轻肝组织纤维化程度,减少腹水的发生,有一定抗肝纤维化作用,可能是作为一个复合的抗氧化剂而起作用,但作用有限,可能是煎液中有效浓度较低的缘故,临床上难以单用制何首乌单方来治疗肝纤维化。4.7gxhsraq-1对肺癌放射性增敏作用细胞机制的影响刘瑛研究了广西产何首乌中蒽醌类化合物GXHSWAQ-1单体对鼻咽癌的放射增敏作用和机制,发现无细胞毒浓度的GXHSWAQ-1对乏氧人鼻咽癌CNE-1细胞具有放射增敏作用,其增敏作用呈剂量依赖性。GXHSWAQ-1对鼻咽癌放射增敏作用的分子机制可能为:降低乏氧诱导因子(HIF-1α)mRNA的表达,抑制DNA双链断裂修复基因(KU70/KU80)、凋亡抑制基因(Survivin)和端粒酶逆转录酶hTERTmRNA表达;改变细胞周期分布,使细胞阻滞在对射线敏感的G2/M期;提高细胞内活性氧的含量,诱导凋亡发生。4.8降脂提高血脂心脑血管疾病是老年的多发病和常见病,高脂血症是动脉粥样硬化的首要危险因素。而何首乌能有效降低血脂,抗动脉粥样硬化。二苯乙烯