微生物检验方法验证方案

第第1014页微生物限度检查方法〔平皿法〕验证方案目 录三、微生物限度检查方法〔平皿法〕验证方案验证目的和原理验证方法步骤试验实施试验前的预备验证试验操作试验结果验证结果评价分析附件微生物限度检查方法〔平皿法〕验证文件验证工程名称编号验证工程名称编号微生物限度检查方法〔平皿法〕验证VF-PR-17-A验证小组组员步骤实施日期验证方案组织实施进度成员职务姓名主要工作职责组长副组长方案设计责任人方案实施负责人组员操作人操作人验证工程名称编号验证工程名称编号VF-PR-17-A日日日起草部门起草人签名起草部门起草人签名日期生产部年月质控部年月2．验证方案的审核与批准验证方案审核人：审核日期：年月验证方案批准人：批准日期：年月三、微生物限度检查方法〔平皿法〕验证方案验证目的和原理验证目的时，应报验证委员会批准。原理组中试验菌的恢复生长结果来评价整个检验方法的准确性、有效性和重现性。验证方法步骤验证前的预备 都应当严格依据相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没有影响。试验菌应包括G-G+酵母菌和霉菌类微生物以根本掩盖样品中可能存在的微生物。3个不同批号产品依据微生物限度检测方法进展平行试验，通过计算回收率来推断微生物限度检查方法是否对产品有影响。试验结果可承受标准 用标准菌株评价方法“尿素维生素E乳膏的微生物检品中微生物的抑制性，试验结果应显示3次独立的平行试验中，稀释剂比照组的菌回收率应不小于70%，试验组的回收率也不低于70%。3．试验实施试验前的预备主要仪器设备：高压蒸汽灭菌器、恒温烘干箱、净化工作台、生物安全柜、恒温培育箱、霉菌培育箱。10000级，局部干净度为100级〔或防置同等级净化工作台。操作间或净化工作台的干净空气应当保4.9pa。试验样品：尿素维生素E乳膏：批号 批号 批号稀释液和试剂：PH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 无菌十四烷酸异丙酯器具 无菌培育皿〔直径90mm〕无菌移液管〔5ml〕菌株名称内控编号大肠埃希菌菌株名称内控编号大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉编号由菌名首字母—传代代数—制备日期组成培育基名称培育基脂培育基验证试验操作

生产商 培育基批号 配制日期 有效期试验菌的制备和稀释将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌接种至10ml的无菌养分肉23～28℃24～4823～5～70.9%1ml菌落数为50～100cfu的菌悬液。用不同类别的微生物考察供试液及检验程序的抑菌性，将试验分为4组样品试验组准确取供试品PH7.0100ml，5～101：1050～100cfu2测定其菌数。的菌数。数。ml菌落数。培育将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌在30～50℃下培育4823～28℃721。试验结果尿素维生素尿素维生素〔cfu/皿〕接入菌种 回收率E乳膏批号 稀释剂比照组 菌液组大肠埃希菌平均值球平均值枯草芽孢杆枯草芽孢杆菌白色念珠菌平均值黑曲霉平均值表中：回收率=稀释剂比照组的平均菌落数÷菌液组的平均菌落数×100%。〔cfu/皿〕〔cfu/皿〕接入菌种尿素维生素E乳膏批号回收率试验组供试品比照组大肠埃希菌平均值金黄色葡萄球枯草芽孢杆菌白色念珠菌平均值平均值黑曲霉平均值表中：回收率=〔试验组的平均菌落数－供试品比照组的平均菌落数的值〕÷菌液组的平均菌落数×100%。验证结果评价分析价〔2，起草验证报告〔3〔4〕〔附5。对验证结果的评审应包括：验证试验是否有遗漏？过批准？验证记录是否完整？需进一步补充试验？附件1产品试验组的微生物生长检查记录：大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉

产品试验组计数结果〔cfu/皿〕 平均值供试品比照组的微生物生长检查记录大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉

供试品比照组计数结果〔cfu/皿〕 平均值稀释剂照组的微生物生长检查记录大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉菌液组大肠埃希菌枯草芽孢杆菌白色念珠菌黑曲霉

阳性比照计数结果〔cfu/皿〕 平均值阳性比照计数结果〔cfu/皿〕 平均值测试人/测试日期： 复核人/复核日期：2

验证结果评价表验证名称

微生物限度检查方法〔平皿法〕验证

编号 VF-PR-17-A评价评价确认验证小组：年月日3

验证报告年月日至年月日，验证小组依据批准的编号为“VF-PR-17-A”的微生物限度检查方法〔平皿法〕验证文件对微生物限度检查法进展了相关的一系列验证工作，到达了预期效果，滋将有关事项说明如下：验证方案在实施过程中未做修改；验证方案各项性能指标在验证中未作变动，误差在允许范围内；验证过程中结果符合规定要求，记录完整属实；验证结果符合设计要求和GMP原则要求，可以投入使用。以上状况，请验证委员会审批！验证小组年 月 日4

试验报告审批表验证名称

微生物限度检查方法〔平皿法〕验证

编号 VF-PR-17-A验证内容质质批阅量会签部审核人：年月日验证委员会意见：批准