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文档简介

第二章抗原和抗体及其结合反应医学技术学院免疫教研室

教学目的掌握:抗原抗体结合力、抗原抗体结合反应特点熟悉:影响抗原抗体结合反应的因素第一节抗原一、抗原的特性免疫原性、免疫反应性特异性二、用于免疫测定的抗原分类天然、合成多肽、基因重组第二节抗体一、抗体的特性特异性、多样性、免疫原性二、用于免疫测定的抗体分类多克隆、单克隆、基因工程三、抗体产生的规律初次应答、再次应答第三节抗原抗体结合反应的原理抗原抗体反应:指抗原与相应抗体之间所发生的特异性结合反应。抗原表位与抗体高变区间的结构互补抗原表位与抗体高变区的紧密接触抗原抗体之间的结合力亲水胶体转化为疏水胶体物质基础一、抗原抗体结合力静电引力范德华引力氢键疏水作用力抗原抗体结合力示意图1.静电引力(electrostaticforces)抗原和抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。又称为库伦引力2.范德华引力(VonderWaalsforces)

抗原和抗体相互接近时,由于分子的极化作用而出现的引力。

范德华引力<静电引力3.氢键结合力供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力供氢体:羧基、氨基和羟基受氢体:羧基氧、羧基碳和肽键氢键具有高度的方向性4.疏水作用力(疏水键)

两个疏水基团在水溶液中相接触时,由于对水分子排斥而趋向聚集力。二、抗原抗体的亲和力和亲合力抗原抗体亲和力示意图抗原抗体亲合力示意图三、液相中抗原抗体的结合反应抗原抗体复合物

(疏水胶体)可见反应电解质

抗原

(亲水胶体)抗体﹢四、固相表面抗原抗体的结合反应1.抗原抗体结合反应时间2.反应体积3.解离速度4.固相化抗原或抗体的构象第四节抗原抗体结合反应的特点特异性可逆性比例性阶段性

亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体疏水胶体可见反应一、特异性抗原抗体反应特异性示意图特异性示意图交叉反应(crossreactions)抗原抗体交叉反应示意图二、可逆性可逆性:抗原与相应抗体结合成复合物后,在一定条件下又可解离为游离抗原与抗体的特性影响因素:抗体对相应抗原的亲合力环境因素对复合物的影响

【Ag】+【Ab】【Ag-Ab】

解离后抗原抗体仍保持原有特性。一定条件:低pH、高浓度盐等。Ab1比例性:抗原与抗体发生可见反应需遵循一定的量比关系最适比:沉淀物最多时的抗原抗体的浓度比或量比等价带:

抗原与抗体分子比例合适范围前带:

抗体过量后带:

抗原过量三、比例性

抗原抗体反应比例性示意图四、阶段性第一阶段:特异性结合阶段第二阶段:反应可见阶段第五节影响抗原抗体结合反应的因素抗原抗体本身因素反应基质因素实验环境因素一、抗原抗体本身因素抗原:理化性状、表位种类和数目抗体:来源、特异性、亲和性、效价来源R型Ab:等价带宽,易出现可见反应。H型Ab:等价带窄,易出现前带或后带McAb:不宜用于凝集和沉淀反应。浓度:是相对Ag而言,比例要合适,

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