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苏禽96鸡胚胎生长规律的研究
为了衡量动物生长发育是否正常,通常以体重和重量稳定为标准,不注意体内组织和器官的生长发育。体内的组织和器官是动物生活活动的基本组成部分,它们的生长发育决定着动物的生长速度。早在1909年Jackson首先进行了人胚胎内脏器官的测量研究。而后Hamburger、Patten等对鸡胚胎发育过程中其形态变化的规律进行了观察分析。蒋日希东报道了鸡胚胎的喙长和第3趾长的测定结果,杨宁报道了鸡胚胎体长和胚重的结果。这些研究的主要目的是为了在不同孵化时期判定鸡胚胎发育特征而进行的。而在胚胎发育学、胚胎体外操作等研究中组织器官发育的正常与否目前尚没有判定依据和标准,即使已有的研究报道,也缺乏系统性。房兴堂等对肉鸡生长期体内组织器官生长发育的研究结果显示,体内组织器官和消化道各部分的长度随体重同步变化;健康的机体其组织器官可增强肉鸡的抗应激能力,保证肉鸡有较高的生长速度和较强的适应能力。因此,本试验旨在对鸡胚胎期的体量和部分组织器官生长发育规律进行系统的研究,以期弄清鸡胚胎发育过程中各测量的正常值,为体外判定鸡胚发育正常与否提供可靠的参照数据。1材料和方法1.1湿度:从1119d试验鸡胚来自于江苏省家禽科学研究所养禽场入孵种鸡蛋。孵化期温湿度:0~4.5d为38.3℃,湿度为50%;4.5~8.5d为38.1℃,湿度为60%;8.5~14.5d为37.8℃;14.5~17.5d为37.5℃;17.5~18.5d为37.2℃;18.5~20d为36.1℃。从11~19d湿度为60%,落盘时为65%。取正常孵化3~18d的苏禽96鸡胚胎,进行外形体重、体尺和心脏重、肝脏重、胃重、头重、后肢重、前肢重、性腺大小、后肢长、前肢长、第3趾长、胫长、头长、喙长等器官的测量,并作记录。1.2鸡胚生长生长强度的计算1)累积生长:胚胎孵化期每天测定体重或体尺,观察各个脏器的生长发育情况。2)绝对生长:计算公式为G=(W1-W0)/(t1-t0),W0为始重,即前一次测定的重量或体尺;W1为末重,即后一次测定的重量或体尺;t0为前一次测定的日龄,t1为后一次测定的日龄。3)相对生长:鸡胚生长强度的计算公式为:R={[(W1-W0)/(W1+W0)]/2}×100%。4)以日龄为统计测量单位,得到各项目的平均值及变异系数。2结果与分析2.1发育的期内由表1可见,胚胎和部分组织器官各测定指标随孵化日龄的增长而增加。体重、心脏重、肝脏重、肺脏重、前肢重、后肢重、胃重、头重等性状的标准差较大,这是由于胚胎的组织器官的形态结构及功能还不完善,处于生长发育的旺盛阶段而易发生变化。体长、前肢长、后肢长、胫长、眼泡直径、头长、喙长等性状的标准差较小,说明这些组织器官自分化后随日龄稳步增长,生长发育的快慢与日龄密切相关。2.2不同年龄的不同测量值的增加2.2.1不同组织器官的生长情况表3从相对生长分析结果可见:体重的生长强度出现在孵化3~5d,而此时恰好是各种组织器官分化的时期,说明在各个组织器官分化发育的关键阶段,胚胎整体迅速增大,代谢也最旺盛。如果胚胎在此期间,生长强度达不到最佳状态,则对以后的生长产生很大的影响,容易造成胚胎死亡。而此时正是正常孵化时胚胎死亡的第1个高峰期。本试验在进行鸡胚胎体外培养时发现,此期是第1个关键时期,大量胚胎往往在孵化6d时死亡,究其因可能是在孵化3~5d时体重达不到继续发育的要求所致。在孵化7~9d时,心脏、肝脏、卵巢、头重、前肢、后肢重等以及性腺长、第3趾长、后肢长度、胫长的生长强度最大,说明在此期,这些组织器官代谢旺盛,生长发育速度达到最高峰,这一生长趋势与孵化期出现的第2个死亡高峰期相呼应,从本试验的观察结果看,此时各个组织器官均处于强烈的生长发育期,如果内外环境稍有不适,都可能造成胚胎的死亡。第3趾长在孵化10d时相对生长强度最大,孵化10d之前因其长度过小而没有测量,到孵化10d时达到了生长的最高峰,此后随着胚龄的增长而减弱。相对生长显示,肺脏在孵化13d时开始生长加速,与19d开始肺呼吸相一致,为出壳前的肺呼吸做好充分准备,这一点对鸡胚胎体外培养至关重要。这一结果提示,无论是正常孵化还是体外培养,在此时肺脏发育出现缓慢时,则会导致在20d落盘时胚胎因肺呼吸量不足而夭折,从而影响孵化率。这也是在进行鸡胚胎体外培养时经常遇到的问题之一,即鸡胚胎培养安全度过了前2个死亡高峰期后,出壳前因肺脏生长发育没有达到应有的高度而不能正常的启动,导致胚胎死亡。即使是正常孵化,胚胎在此期也容易死亡。本试验这一观察结果为分析孵化期出现的第3个死亡高峰期的原因提供了科学依据,明确了与孵化13d肺脏的发育程度有密切关系。从相对生长的整体上看,各器官的增长对后期鸡胚继续发育有制约关系,如13d的肺脏发育对19d的肺脏呼吸影响很大,这种制约关系决定了孵化率的高低和出壳后生长发育的状况。2.2.2孵化期累积生长从各个组织器官的累积生长分析可见,体重、肝脏重、肺脏重、性腺大小、第3趾长、头重、喙长随孵化胚龄的增大而平缓增加,在孵化期间没有出现生长减缓的拐点,说明它们从分化后一直持续到出壳后的某一时期达到某一程度时才减缓生长。孵化期累积生长表现为:胚胎体长、心脏、头长、前肢重、后肢重、前肢长、后肢长、胫长、眼泡直径等组织器官随胚龄的增大而增大,在孵化5~6d时生长速度开始加快,一直持续到孵化16d时达到高峰,到17~18d时开始减缓,此为出壳前出现的第1个生长拐点,说明这些组织器官在孵化期,生长达到一定程度时,趋于一段缓慢期,出壳后累积生长加快,达性成熟时又减缓,于是出现了第2个生长拐点。孵化期胚胎组织器官生长的这一表现与出壳后雏鸡生长的情况比较相似一致。从累积生长可见,同一天各个组织器官生长速度是不一致的,可能与其功能需要有关,这也客观地反映各个组织器官生长发育的不平衡性。2.2.3发育的非均匀性从胚胎生长变化可见,其体重、心脏重、肝脏重、前肢重、后肢重、胫长、喙长等器官在孵化10~11d时,绝对生长速度开始加快,到16d时达到生长高峰期,而后生长速度出现减缓下降趋势,说明这些器官在这一阶段内的生长非常迅速。在此期间,一方面胚胎从尿囊循环吸收部分卵白以及从卵黄囊循环取得营养,另一方面胚胎又从消化道吸收的卵白,使得胚胎的绝对体重增加极为迅速,体长、头长的绝对生长在孵化5d时出现第1次生长高峰,此后缓慢增长;孵化8d时出现第2次生长高峰,此后又缓慢增长;孵化16d时出现第3次高峰,此后再次缓慢增长。体长、头长的特殊生长发育的不均匀性,与正常孵化生长的关键时期相呼应。从整个胚胎生长发育的过程可见,在孵化5d时,整个卵黄的血管迅速发育,羊膜中出现羊水,营养物质丰富,体长增长大大加快。在孵化8d时,尿囊迅速发育,胚胎由卵黄囊呼吸开始逐渐转变为尿囊呼吸,体长增长第2次进一步加快。在孵化16d时,由于尿囊呼吸和消化道呼吸的双重营养吸收,体长达到第3次增长高峰期。头重、前肢长、后肢长在孵化7d时,开始快速生长,到15~16d时达到生长高峰期,此后生长速度减缓。眼泡直径在孵化4时开始快速生长,到6d时达到增长最高峰,此后减缓生长。第3趾长在孵化11d时出现第1次快速生长,到15~16d时出现第2次快速生长,17d时出现第3次快速生长。本试验观察结果表明,不同器官绝对生长速度出现的时间不同,尤其在孵化的过程中,体重、体长和部分组织器官生长速度的高峰期,与胚外膜发育的同步性非常密切(胚外膜是这些器官发育时营养物质的主要供应通道和器官),应注意调节孵化条件,以对确保这些重要组织器官正常生长发育。3讨论3.1组织器官的发育累积生长理论变化规律表现为:开始时生长上升很慢,以后迅速提高,而且各个组织器官生长速度不一,经过一段时间后又趋于缓慢,最后生长速度一直随孵化日龄平缓增长。本试验观察结果表明,各测量值的变化规律与理论分析基本吻合,说明孵化期胚胎各组织器官的生长也遵循累积生长规律,只不过各组织器官出现的生长高峰期不同而己。这与各个组织器官分化的时间有密切关系,分化早的组织器官发育高峰期出现相对较早,分化晚的组织器官发育高峰期出现相对较迟。例如眼泡在孵化3d时出现,4d开始快速生长,因此在孵化时它被作为鉴别胚胎早期发育正常与否的一个非常重要的指标,也是鸡胚胎体外培养前5d发育好坏判定指标之一。弄清其生长发育规律对鸡胚胎体外操作提供依据。但是,有些器官分化较晚,例如肺脏在孵化4d时还仅仅是气管芽末端的小块组织,在6d时才出现明显的左右肺叶。此时肺脏组织中尚无空气,肺泡被液体填充。到13d时,肺脏发育达到高峰期,为19d开始肺呼吸打好基础。这说明器官的生长发育速度与其功能的发挥息息相关。相对生长强度分析表明,各个器官随孵化日龄而下降,与理论规律也基本吻合。这一结果显示,各组织器官在孵化开始时,均处于分化阶段,新陈代谢最旺盛,生长发育最强烈,待各组织器官分化结束转化为生长期时,生长强度趋于稳定上升态势。绝对生长量分析表明,各组织器官呈钟状对称正态曲线,其最高点对应于累积生长的转折点。各组织器官的生长观察结果显示,大部分组织器官的生长势重点在7d之后,尤其是心脏、肝脏、肺脏等器官均属于机体重要的功能器官。此时,这些器官因快速生长,使它们处于高度“脆弱”的境地。在进行鸡胚胎体外培养时,要把握好它们的发育规律,有针对性地施加外界条件,使鸡胚胎的内脏器官健康发育,增强其抗应激能力,提高孵化率。3.2鸡种的测定值每一时间鸡胚体重、体长变化情况,蒋日希东、杨宁等作过描述,心脏、肝脏仅有孵化11、15、18d的增重记录。而本试验首次系统地测量、分析了体重、体长和部分组织器官的生长情况,为鸡胚体外培养提供依据,为今后进一步研究奠定基础。在本试验中,所测心脏重、肝脏重、肺脏重与前人所测定值差异不显著。而体重、体长均比前人测定值高,究竟是鸡种不同还是其他因素造成的尚需进一步研究。因为前人在研究中没有说明是什么鸡种,而本试验以苏禽96地方品种鸡作为试验对象。此外,鸡胚胎
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