高效液相色谱法-使用高效液相色谱仪(仪器分析课件)_第1页
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文档简介

一、分析流程二、主要部件一、分析流程1.储液器

储液器一般由玻璃、不锈钢或氟塑料制成,容量为1到2L,用来贮存足够数量、符合要求的流动相。2.流动相脱气

吹氦脱气法、加热回流法、抽真空脱气法、超声波脱气法、在线真空脱气装置、实时在线脱气。二、主要部件3.高压输液泵高压、高速是高效液相色谱的特点之一。应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性。

高压输液泵主要有恒流泵(往复泵)和恒压泵(气动泵)两种。二、主要部件低压梯度法(外梯度):

利用一台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。高压梯度法(内梯度):

两台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。4.梯度洗脱装置二、主要部件(1)微量注射器(2)六通阀进样装置(3)自动进样器5.进样装置二、主要部件分析型色谱柱:内径为2~6mm,柱长为10~30cm。制备型色谱柱:内径为10~25mm,柱长为15~50cm。

柱形多为直形;内部充满微粒固定相;柱温一般为室温或接近室温。6.色谱柱分类:二、主要部件

对检测器的要求是:灵敏度高,重复性好、线性范围宽、死体积小以及对温度和流量的变化不敏感等。7.检测器

常用的检测器有:紫外吸收检测器、示差折光检测器、荧光检测器。二、主要部件7.1紫外检测器—应用最广泛的检测器基本原理:试样组分对特定波长的紫外光具有选择性的吸收,吸光度与试样组分浓度之间的定量关系符合郎伯-比耳定律。优点:灵敏度高,线性范围宽;死体积小;波长可选;对流速和温度变化不敏感;可用于梯度洗脱。二、主要部件(a)可变波长紫外检测器(b)二极管阵列检测器二、主要部件7.2示差折光检测器—通用型检测器基本原理:连续检测参比池和样品池中流动相之间的折光系数差值,该值

与试样池流动相中的组分浓度成正比。二、主要部件7.3荧光检测器—专用型检测器基本原理:在一定的条件下,荧光强度与流动相中的组分的浓度成正

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