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文档简介

项目四酶抑制法测农药残留农药残留（Pesticideresidues），是指农药使用后一定时期内没有被分解而残留于生物体、收获物、土壤、水体、大气中的微量农药原体、有毒代谢物、降解物和杂质的总称。农药残留的测定意义检测原理在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，胆碱酯酶(ChE)催化神经传导代谢产物类似物（碘化硫代乙酰胆碱ATCI或碘化硫代丁酰胆碱BTCI）水解，其水解产物与显色剂（二硫代二硝基苯甲酸DTNB）发生反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度的变化值（△A），计算出抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药残留的存在。仪器与试剂仪器紫外-可见分光光度计；水浴锅；离心机；烧杯；试管；剪刀等。试剂胆碱酯酶；底物；显色剂。检测步骤——样品处理叶菜剪成1cm左右见方的碎片，块茎类取横截面样品或取其表皮取2g果蔬样品，块茎类取4g，放入三角瓶中，加入10mL缓冲液，振荡1～2min倒出提取液，静置2min，待测。若提取液混浊或杂质太多可过滤后再测。检测步骤——对照测试反应瓶中加入5mL缓冲液，再分别加入200μL酶液和显色剂，混匀，静置静置反应10min后加入200μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖，调零。记录三分钟后显示屏显示的吸光度，此值记为△A0。检测步骤——样品测试于反应瓶中加入5mL待测液，再分别加入200μL酶液和显色剂，混匀，10min后加入200μL底物，摇匀并立即倒入比色杯中，及时放入仪器的测量室第1通道，合上盖，调零记录三分钟后显示屏显示的吸光度，此值记为△At。数据处理及判断抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt)/ΔΑ0]×100%若样品抑制率≥50%，表示样品农残超标，为阳性结

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