藤茶中二氢杨梅素对小鼠高尿酸血症模型的降尿酸作用

藤茶中二氢杨梅素对小鼠高尿酸血症模型的降尿酸作用

藤茶是一种代茶饮料，历史悠久。在藤系，属于青桃科蛇口甘注射液（had.maya）w.t.wang。茎叶加工的有效组成是黄酮类物质，包括二羟杨梅素、二羟杨梅素、藤茶素和柠檬素。二羟杨梅素约占黄酮的80%。藤茶味甘,淡,性凉,藤茶全株入药用于治慢性肾炎、肝炎、小便涩痛、治胃热呕吐、感冒、咽喉肿痛等症。高尿酸血症是痛风病临床表现之一,近年来,据国内外文献报道高尿酸血症与糖尿病、高血压、高脂血症、冠心病等心血管疾病发生率也有相关性。目前用于治疗痛风的药物副作用比较大,大量研究表明:二氢杨梅素可影响高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,可做为治疗痛风药物的备选材料。调查发现,饮用藤茶能降低血清尿酸含量,本试验利用小鼠高尿酸血症模型,探讨二氢杨梅素对高尿酸血症小鼠血清尿酸水平的影响,为治疗痛风药物的开发和利用提供理论依据。1材料和方法1.1藤茶和藤茶试材藤茶植株采自贵州省江口县和平镇,由贵州大学生命科学学院植物教研室廖海民教授鉴定为葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang。试验用藤茶由贵州江口梵净山云峰野生植物开发有限公司提供。试验动物昆明种小鼠,雄性,体重(20±2g),由重庆腾鑫生物技术有限公司提供[许可证号:SCXK(渝)2012-006],实验前在实验室正常饲养一周,实验过程中自由饮水和颗粒饲料喂养。1.2方法1.2.1氢杨树叶片的制备取藤茶200g,采用沸水提取,浓缩乙醇除杂,丙酮提取,浓缩加水沉淀结晶及重结晶的方法制备二氢杨梅素(DM),用HPLC检测纯度为纯度89.87%。1.2.2灌胃水处理的单次用药剂量模型将60只昆明种小鼠随机分为6组,分正常对照组,模型组、别嘌呤醇组、二氢杨梅素高剂量组、中剂量组、低剂量组,其中二氢杨梅素高、中、低剂量分别为0.752g/kg、0.376g/kg、0.187g/kg,别嘌呤醇按0.04g/kg剂量给药。除空白对照组灌胃给予相应体积的生理盐水。其余各组全部建模。模型组(上午按腺嘌呤:200mg/kg,乙胺丁醇:250mg/kg的剂量给药,下午灌胃等体积生理盐水),别嘌呤醇组、二氢杨梅素高,中,低剂量组上午建模,下午分别按剂量给药,每天一次,直至14天。1.2.3测定血尿酸值、尿酸氮、胱酶法各组给药连续14天,分别于实验14天后,小鼠摘除眼球取血(取血前禁食12小时),以测定血尿酸值(尿酸酶法)、尿酸氮(脲酶法)、肌酐(苦味酸法)。静止1h,低温离心,3500r/min离心12min以分离血清,-20℃冰箱冷冻保存。待测。数据用SPSS20.0统计软件分析,两组间均数比较采用t检验,多组间均数比较采用单因素方差分析。2结果与分析2.1不同剂量别县的脏器色如图所示;正常对照组(图1):肾脏色泽红润,模型组(图2):肾脏增大明显,颜色苍白,肉眼可见大量白色结晶;别嘌呤醇组(图3):肾脏轻微增大,颜色苍白,肉眼可见少量白色结晶;二氢杨梅素高、中剂量组(图4-5):肾脏轻微增大,颜色微红,肉眼可见少量白色结晶;二氢杨梅素低剂量组(图6):肾脏增大明显,颜色苍白,肉眼可见大量白色结晶;对小鼠肾脏重量的变化,与正常对照组相比各组都有显著差异,与模型组相比有显著差异(表1)。2.2小鼠血清ua、高尿酸相关系数法血清ua模型组小鼠血清UA水平为(294.8±25.31)μmol/L,与正常组血清UA水平(161.7±10.53)μmol/L有显著差异,说明成功地复制了小鼠高尿酸血症模型(表2)。2.3血清ua与模型组的比较别嘌呤组、二氢杨梅素高、中剂量组的血清UA与模型组相比有明显的降低;二氢杨梅素高、中剂量组的血清UA与别嘌呤组相比差异显著(表2)。2.4不同剂量bun及cr的比较模型组BUN及Cr比正常组升高;二氢杨梅素高、中、低剂量组BUN及Cr均低于模型组;别嘌呤组与模型组无显著差异;二氢杨梅素高、中剂量与别嘌呤醇组相比有明显降低(表2)。3藤茶和二氢杨素的相互作用随着人民生活水平有进一步的提高,高尿酸血症的患病率也逐渐上升,因此,临床上对高尿酸和痛风病的药物治疗也倍受关注,药物治疗主要重视安全有效性,模拟与临床上相似的高尿酸血症动物模型是研究防治高尿酸血症药物药效的基础。据现有资料显示,藤茶植物中化学成分丰富,研究表明,藤茶有消炎,止咳、祛痰、镇痛、抗氧化、护肝、降血糖,降血脂抗高血压、抗菌、抗癌等药理作用[8,9,10,11,12,13,14],藤茶资源丰富,二氢杨梅素含量高,本实验主要探讨二氢杨梅素对动物模型的降尿酸作用,进一步深入对二氢杨梅素药理的研究,可为藤茶资源的综合开发利用提供依据。同时也为高尿酸血症和痛风病的新药研发提供理论依据。本试验结果显示;别嘌呤对高尿酸血症模型虽有极明显的降尿酸作用,但对肾脏损害的副作用较为明显,不容忽视。而二氢杨梅素能够