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文档简介
几种增加小鼠骨髓染色体中期细胞数方法的比较【摘要】目的:探索提高小鼠骨髓染色体中期分裂相的获得的方法。方法:小鼠随机分成3组,对照组、两次注射秋水仙素组和酵母组秋水仙素组,每组分别用注射冲洗法、剪碎静置法和剪碎震荡法收集骨髓细胞。结果:与对照组相比,两次注射秋水仙素组和酵母组秋水仙素组中期细胞有明显增加;与注射冲洗法相比,剪碎法获得的中期细胞数有明显增加。【关键词】小鼠染色体中期细胞染色体的结构和数目是研究生物体遗传、变异、发育的基础,而动物的骨髓细胞具有分裂旺盛、数量多等的特点,可以直接进行染色体标本的制备,不需体外培养和无菌操作,还可以真实反映完整机体所受的环境影响[1]。染色体是生物体遗传信息的载体,在细胞分裂时期(体细胞的有丝分裂和生殖细胞的减数分裂)特定存在,对处于分裂期的细胞经秋水仙素处理,阻断其纺锤丝微管的组装,使细胞分裂停止于中期,此时染色体达到最大收缩,具有典型的形态。染色体制备对人类遗传病、血液病的研究和诊断有着重要的临床意义,在医学细胞生物学和医学遗传学中是经典的实验项目之一。在教学中用,学生可以通过实验了解小鼠染色体的数目及形态特征,掌握中期染色体制备的实验原理和方法。该实验操作步骤简单,但容易出现中期分裂相少、染色体过于短小、染色体分散不好、染色体边缘发毛等情况[2],另外该实验需要实验前预处理,且耗时时间长,不利于在教学中推广。本文参考比较各种改进方法,先总结如下。1材料与方法1.1实验动物昆明种小鼠45只,体重(22±2)g,由新乡医学院实验动物中心提供。1.2实验仪器解剖盘;眼科剪;低速台式离心机(上海手术器械厂);电子天平(上海衡平仪器仪表厂);双目光学显微镜;电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械厂);隔水式培养箱(上海跃进医疗器械厂);震荡器(常州国宇仪器制作有限公司)。1.3实验试剂秋水仙素(上海抚生生物科技有限公司);酵母粉;葡萄糖粉;甲醇;冰醋酸(国药集团化学试剂有限公司);低渗液(0.075mol/LKcl)、生理盐水;Giemsa体标本制备中的失误与对策[J].生物学通报,2003,38(6):53-54.[3]崔向清,马鑫,李丽
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