溴敌隆对小鼠免疫反应的初步研究

溴敌隆对小鼠免疫反应的初步研究

rattusnivivet主要生活在山区和山区的各种林区和灌木丛中，也生活在农田和杂草的中间。它可以在洞穴、倒木和树上筑巢，并在中国北方广泛分布。此外，社大鼠的习性非常多样。主要以谷物、植物种子、水果和草籽为食。它对中国的农业和林业行业造成了重大影响，并传播了许多疾病，成为鼠病预防体系中的主要研究对象。但是,对社鼠的研究目前仅限于生理、生态、染色体核型及体外寄生虫等方面,对抗凝血剂灭鼠剂敏感性的研究报道极为少见。为此,本研究于2009年6—9月进行了社鼠对溴敌隆的敏感性测定,旨在为将来进行抗药性检测提供科学依据。1材料和方法1.1溴敌隆毒种的制备溴敌隆原粉由农业部药检所提供,纯度达99%。毒饵的配制参照湿润法:用精确度0.0001g的天平称取原药,先用少量无水乙醇水浴溶解,待完全溶解后加入适量温水混合,倒入一定量的诱饵(小麦),并充分混匀,平铺于盘中,在鼓风干燥箱中50℃烘干,即得浓度为0.0005%的溴敌隆毒饵。1.2电子天平法样品处理试验器材包括:不锈钢鼠笼(ZH-B3),饮水瓶(250mL),饵料盒(70mm×40mm×30mm),培养皿(Φ90mm),电子天平(精确至0.0001g和0.01g),镊子,解剖剪等。1.3诱捕生境调查以隰县下李乡为社鼠捕获区。根据以往调查及主要农田害鼠的生态特性,诱捕生境主要选在果园、荒草坡、退耕还林地、耕地、沟底等。社鼠的捕获采用笼捕法。社鼠的饲养以小麦、水果为饵料,室内单笼饲养观察1周,选取健康、无外伤、无孕的成年鼠供试。1.4单次吃毒种试验采用无选择性摄食试验方法,先供给试鼠无毒饵2d,每天称耗饵量,并更换新饵,第2天食饵量少于全部试鼠平均摄饵量1/5者被淘汰。随后,按体质量大小(雌雄分开)随机分成5组,雌雄各1/2,分别饲喂毒饵1,2,3,4,6d,每天称耗饵量,并更换新饵,第1天吃毒饵太少(不及试验前1d毒饵消耗量的1/10)者被淘汰。食毒期结束后,存活鼠移至干净饲养笼正常饲养观察,试验总期限为30d。每天观察,记录出血症状(出血及部位)及死亡日期。死亡鼠,没有外出血症状或内出血病变者被淘汰。1.5死亡率的关系采用Bliss法,先将雌雄鼠分开计算食毒期与对应死亡率的关系,然后性别之间对药物敏感性进行显著性检验,如果无显著性差异则将数据合并,求得回归方程和LFP50,LFP95,LFP99及其95%置信限。2结果与分析2.1食毒期对溴敌隆的敏感性试鼠共53只,其中雌鼠27只,雄鼠26只,测定结果列于表1。供毒第2天开始出现死鼠,最后1只死于第15天,死亡高峰为开始攻毒后5~8d。试验最低食毒期为1d,雌鼠死亡率为20%,雄鼠死亡率为0;最高食毒期为6d,雌鼠死亡率为100%,雄鼠死亡率为80%。通过食毒期与其对应死亡率之间的统计学分析可知,雌雄鼠对溴敌隆的敏感性无显著差异(Pb>0.05,PLFP50>0.05,表2)。故将雌雄鼠数据合并,统计出敏感基数,得到LFP50,LFP95,LFP99及其95%置信限(表3)。2.2食毒试验效果最敏感的个体为1d食毒期组的雌鼠,体质量41.8g,食毒第2天死亡,致死剂量为0.51mg/kg;而最耐药的个体是4d食毒期组的雄鼠,体质量91.0g,存活剂量1.84mg/kg,其剂量为最敏感个体致死剂量的3.6倍。2.3死亡时间在53只试验鼠中,死亡26只,存活27只,死亡时间为2~15d,死亡高峰时间为5~8d,平均死亡时间为6.85d。2.4出血部位及患儿出血死亡鼠全部解剖观察出血病变,符合抗凝血剂杀鼠剂的毒理作用,死亡鼠主要以内出血为主,占到总死亡鼠的85%,出血病变部位主要是脾、肝、胃、肾、心脏等,其次可见肠出血及睾丸充血现象,外出血以鼻、口为主,亦有少数四肢充血情况。个别存活鼠在观察期曾出现站立不稳、走路摇摆等中毒症状,随后又逐渐恢复正常。3溴敌隆毒种根据表3中的LFP50,LFP95,LFP99以及95%置信限区间,并按WHO新修订的用LFP99取整天数作为抗药性检验食毒期,故山西隰县下李乡的社鼠对0.0005%溴敌隆毒饵食毒