半夏泻心汤不同配伍对小碱、巴马来及甘草酸的影响

半夏泻心汤不同配伍对小碱、巴马来及甘草酸的影响

半夏泻心汤是在《伤寒论》中古老的经典方剂中注册的，是泻心汤的代表方。用药具寒热、苦辛、补泻并用的特点。我们将组方分为辛温、苦寒和甘补3组,考察3组药物不同组合煎煮对黄连中小檗碱、巴马丁及甘草酸煎出量的影响。1药品制品检定所LC-10AT高效液相色谱仪,C-R6A色谱数据处理仪,SPD-10A紫外可见检测器;均为日本岛津出品。盐酸小檗碱、盐酸巴马丁、甘草酸单铵盐购自中国药品生物制品检定所。乙腈为HPLC级,戊烷磺酸钠(99%),甲醇、醋酸、磷酸为分析纯。黄芩RadixScutellariae,黄连RhizomaCoptidis,半夏RhizomaPinelliae,干姜RhizomaZingiberis,甘草RadixGlycyrrhizae,党参RadixCodonopsis,大枣FructusJujubae,购自北京同仁堂药店,本院鉴定教研室阎玉凝教授鉴定。2方法研究2.1.1流动相乙腈-水17色谱柱Shin-parkCLC-ODS(6mm×15cm,3μm);流动相乙腈-水(31∶69),含0.0034mol·L-1戊烷磺酸钠,磷酸调pH3.0;流速1.0mL·min-1;温度室温,检测波长275nm。对照品及样品分离情况见图1。2.1.2流动相甲醇-水-醋酸条件色谱柱YWG-C18(4.6mm×20cm,10μm),流动相甲醇-水-醋酸(62∶37∶1),流速1.0mL·min-1,温度室温,检测波长260nm。对照品及样品分离情况见图2。2.2工作曲线小檗碱、巴马丁、甘草酸对照品50%甲醇溶液。以峰面积对进样量回归(见表1)。2.3rsd测定按表2中10号配伍及用量取各药味,制备样品,测定。结果RSD分别为小檗碱2.9%、巴马丁2.4%(n=5)。甘草酸RSD为0.4%～3.9%。3样品测定3.1组合将组成半夏泻心汤的7味药分成辛温组,包括半夏和干姜;苦寒组,包括黄芩和黄连;甘补组,包括党参、甘草和大枣。3.2小碱、巴至甘草酸含量测定按表2配伍称取各药味于烧杯中,加水250mL,冷浸30min,煎煮微沸30min,倾出药液,清洗药渣3次,再加水250mL,煎煮30min,倾出药液,清洗药渣3次,合并各药液及洗涤液,水定容至1000mL,再将此药液稀释5倍,过0.45μm滤膜,进样5μL,测定小檗碱、巴马丁、甘草酸含量(见表2)。4方中干扰不同成分含黄芪苷的制备4.1与药材中小檗碱、巴马丁含量相应,各组合中小檗碱含量高于巴马丁。4.2与甘补组共煎,小檗碱、巴马丁含量最高,而全方中含量最少。这与同组黄芩苷的煎出情况有类似趋势,似乎与甘补组共煎有利于主要成分的煎出;而全方中干扰煎出的因素影响似乎更大,以至全方中3种成分(含黄芩苷)均煎出最少或较少。4.3与辛温组共煎,黄连生物碱的含量居中,而黄芩苷煎出最少。4.4与单煎相比,黄连、黄芩共煎时小檗碱、黄芩苷含量降低。有文献报道黄连、黄芩配伍会发生沉淀反应,在文献中我们认为黄芩苷可与黄连中生物碱生成不溶物,但巴马丁煎出量反而增加。4.5与甘草单煎相比,甘补组中党参对甘草酸煎出有明显促进作用。辛温组对甘草酸煎出也有一定促进作用,当甘补组与辛温组共煎时,甘草酸煎出量最高。4.6甘补组与苦寒组共煎,甘草酸煎出量降低。全方共煎,煎出量最低。4.7尽管党参与甘补组对甘草酸煎出的促进作用远大于苦寒组的不利影响,但全方共煎的结果却不是这些作用的简单加和。5分组对各成分的可合理合作实验结果对中药方剂进行拆方研究,以往常见对药方的各药味进行各种组合,这样分析的局限性是只适合3～4味药的小方剂的研究,5～6味药以上的方剂,如此组合,其工作量是难以想象的。我们在实验中,以中药理论为指导,按药物性味对方中各药进行分组,考察各组间的相互影响,对一般及复杂中药方剂的研究具可行性。在此思想指导下,我们将半夏泻心汤分为苦寒组、辛温组和甘补组,在各组中选择含量较高,方便测定的有效成分,考察组合变化对这些成分煎出量的影响,除本文提到的3种成分外,我们还测定了黄芩苷,桉叶素及其他干姜挥发成分,并总结了这些成分的变化。在分组测定的基础上,对一些重要的或难以解释的结果应再进行分组配伍,进一步测定其变化,确定是那种配伍、药味的影响。如本实验证明,甘补组有促进各成分煎出的作用,可以进一步将各组与甘补组中3味药分别配伍,判断三者的作用。本系列实验测定的只是药材中含量较高有效成分,测定结果基本符合中药用药理论,辛温组辛开而温,以散脾气之寒;苦寒组苦泻而寒,以降胃气之热;甘补组甘温调补,和脾胃、补中气,以复中焦升降功能,此即辛开苦降甘调之法:全方中难于水中煎出的干姜挥发成分大大增加,方足以起到辛散之功;而原本煎出量较大的水溶性成分,则由于相反药性的组间制约,煎出量减少,以适于寒热错杂的复杂病情。甘补组对各成分煎出都有促进作用,不知是否即所谓调和作用。但中药成分复杂,组