DB34-T 1363-2022 饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法

ICS

65.120CCS

B

4634 DB34/T

1363—2022代替DB34/T

1363-2011饲料中喹烯酮的测定 高效液相色谱法Determination

of

quinocetone

—High

performance

chromatography

发布

实施安徽省市场监督管理局 发

布DB34/T

1363—2022 本文件按照GB/T

1.1—2020《标准化工作导则

第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件代替

DB34/T

1363-2011《饲料中喹烯酮的测定-术变化如下：a)

增加方法检出限、定量限；b)

修改了原理（见第

4

章）；c)

修改了试剂和材料内容（见第

5

章）；d)

增加了仪器设备（见第

6

章）；e)

更改了样品制备（见第

7

章）；f)

修改“色谱条件”（见第

8

章）；g)

修改了结果计算与表述（见第

章）。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由安徽省兽药饲料监察所提出。本文件由安徽省农业农村厅归口。农业科学院畜牧兽医研究所。敏、吴昊、许世富、邵颖、潘孝成、宋亚伟。——2011

年首次发布为

1363-2011，2022

年第一次修订。DB34/T

1363—2022 1 范围本文件规定了饲料中喹烯酮含量的高效液相色谱测定方法。本文件适用于配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料中喹烯酮含量的测定。本方法检出限为

0.5

，定量限为

mg/kg。2 规范性引用文件文件。GB/T

6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T

20195 动物饲料

试样的制备3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4 原理测定，外标法定量。5试剂和材料除特殊说明外，本方法所用试剂均为分析纯，水为符合

GB/T

6682

规定的一级水。甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。二甲基甲酰胺。磷酸。0.025

mol/L

磷酸溶液：称取

％

的磷酸（5.5）

2.88

g

，加水稀释至

mL。流动相：乙腈-甲醇-（

mol/L）磷酸溶液，按体积比

25：20：55（v/v）。标准品：喹烯酮标准品（

81810-66-4），纯度

≥

98.0喹烯酮标准溶液的制备如下：a)

0.5

50

mg

mL

二甲基甲酰胺溶解后，加入甲醇定容至

100

mL

棕色容量瓶，配制成浓度为

mg/mL

的标准储备液，于4℃冰箱中保存，有效期二个月。DB34/T

1363—2022b)

标准工作溶液：分别吸取储备液（5.9-a））1

、2

mL、5

mL、10

mL、20

于

mL

棕色容量瓶，用流动相溶液（5.7）定容，标准工作溶液系列浓度分别为

5

μg/mL、10

μg/mL、25

μg/mL、50

μg/mL、100

μg/mL。6 仪器和设备高效液相色谱仪：配紫外检测器。分析天平：感量

0.1

g、

mg、0.01

mg。离心机：≥

8000

r/min。超声波仪。分析筛：孔径

0.42

mm。粉碎机。微孔滤膜：孔径

0.45

μm

有机滤膜。7 试样的制备按GB/T

20195的规定制备，磨碎，全部通过分析筛（6.5），混匀，装入磨口瓶中备用。8 分析步骤试样的提取称取试样适量（配合饲料

5.0

g、浓缩饲料

g、预混合饲料

1.0

g），精确至

g，置于100

具塞锥形瓶中，准确加入流动相

50

mL，超声提取

30

，移取

10

mL

至离心管，以

r/min

离心

10

min，取离心上清液过

0.45

μm

有机滤膜，滤液供高效液相色谱仪测定，同时进行平行试验。参考色谱条件色谱柱：色谱柱：C18柱（

250

mm×

mm，5

μm

）或相当者；检测波长：260

nm；流动相：乙腈-甲醇-（

mol/L）磷酸溶液，按体积比

25：20：55（v/v）；流速：1.0

mL/min；柱温：25进样体积：10

μL。测定以保留时间定性，峰面积定量。喹烯酮标准工作溶液色谱图参见附录A中图。结果的计算与表述8.4.1 计算公式结果按式（1）计算：式中：𝑋

=

𝐶×𝑓×1000

DB34/T

1363—2022

(1)式中：X

——

试样中喹烯酮含量，单位为毫克每千克（）；C

——

试液色谱峰对应的喹烯酮浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；m

——

试样质量，单位为克（g）；f

——

稀释倍数。8.4.2 结果表示测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，测定结果保留三位有效数字。9 精密度在重复性条件下获