基因工程练习专题

专题一基因工程练习①②⑦⑦(3)若④过程为将目的基因导入受体细胞，则将此抗病基因导入植物细胞采用最多的措施是 抗枯萎病金茶花培育成功阐明一种生物的基因体现系统可以识别来自另一种生物的DNA的UU素基因拼接(导人细菌质粒因的质粒淋巴细胞干扰素 tt苏云金芽孢杆菌目的基因插入了染棉株细胞Bt毒蛋白基因构建基因表达载体转人农杆菌组织培养木抗虫棉Ti质粒感染(1)基因工程的操作程序重要包括的四个环节是： 方法1方法2载体d图2②c过程称为,该过程需要的原料是。③要确定获得的基因与否是所需的目的基因，可以从分子水平上运用_技术检基因体现载体d,除图中的标示部分外，还必须具有菌转化法培育出转基因烟草。T₄溶菌酶的耐热性。①B②7题图8题图(1)获取目的基因的重要途径包括从自然界已经有的物种中分离和。使目的基因进入受体细胞C.并将其插入受体细胞C₂中的上，使目的基因的 些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所具有的连接产物图1启动子质粒图2(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段，产生的末端是末端，其产物长度(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加的培养基进行培养。经检测，部分具有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正常体现，其最也许的原因10.下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈1、圈2中箭头表达有关限制酶的酶切位点.请回答问题：限制酶识别序列及切割位点(1)一种如图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别具有个游离的磷酸基团.(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越.(4)与只使用EcoRI相比较，使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同步处理质粒、外源DNA的长处在于可(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸取蔗糖能力的大肠杆菌突变11、下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中标注了有关限制酶的酶切位点，其中切割限制酶切割位点图2(3)若BanHI酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列等措施，导入羊的细胞中，通过系列操作培育转基因动物。(4)怎样检测和鉴定目的基因已被成功导入羊体内?请写出两种措施。病棉花品系.请回答问题：(1)要使运载体与该抗病基因连接，首先应使用进行切割.切割的部位是两个核苷酸之间的,假如运载体被切割后，得到的分子末端序列为，则能与该运载体连接的抗病(2)切割完毕后，采用酶将运载体与该抗病基因连接，连接后得到的DNA分子称(3)将连接得到的DNA分子导入棉花细胞常用的措施是,运用植物细胞具有的性进行组织培养.(4)为了确定抗病基因与否插入到棉花染色体DNA上，一般才用技术，并用 (5)该抗病基因在棉花细胞中体现的产物是()A.淀粉B.脂类C.蛋白质D.核酸E.抗生素 14.如图甲是目的基因EPSPS(4.0kb,1kb=1000对碱基)与pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图.图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成某种酶能将无色染料X-gal变成蓝色，最终能在含无色染料X-gal的培养基上将含该基因的菌甲落染成蓝色.(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)乙(1)将处理后的目的基因EPSPS与pUC18质粒、DNA连接酶混合后，再与某菌种混合，若要从混合物中筛选出含EPSPS基因的菌株，在图乙的培养基中必须加入.请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种颜色菌落会具有重组质粒_.(2)现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观测，若出现长度为kb和kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重构成功.(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽视不计).(3)假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有体现出抗性，分析也许的原因是 .15.转基因草莓中有能体现乙肝病毒表面抗原的基因，由此可获得用来防止乙肝的一种新型疫苗，其培育过程如图所示(①至④代表过程，A至C代表构造或细胞):③-草莓叶盘ALπ质粒④C构建筛选菌株分离②构建③筛选基因的分离基因1a提取细胞mRN①b含有抗原基因含有抗原基因的染色体DNA抗原基因②TI酶切①SmaI—重组质粒⑥MNS引物对模板图2引物对与模板结合示意图切割位点请根据以上图表回答问题.(1)在采用常规PCR措施扩增目的基因的过程中，使用的DNA聚合酶不一样于(2)图1环节③所用的DNA连接酶对所连接的DNA两端碱基序列与否有专一性规定?(3)为将外源基因转入马铃薯，图1环节⑥转基因所用的细菌B一般为(4)对符合设计规定的重组质粒T进行酶切。假设所用的酶均可将识别位点完全切开，请根据图1中标示的酶切位点和表2所列的识别序列，对如下酶切成果做出判断。要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞。技术路线如图甲所示，请据图分析回答问题。chlLchlL基因同源替换日chlL基因红霉素抗性基因基因质粒甲(2)①②过程中均使用的工具酶有酶1酶1酶2基因顾乙含chlL基重组质粒A(5)可用PCR技术对ch1L基因扩增时，需一对引物I、II,从理论上推测，该DNA分子通过PCR扩增四发运用备受关注.我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系.(1)获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用措施有农杆菌转化法和_法.(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要运用技术，该技术的关键是和(4)为了确定耐盐转基因水稻与否培育成功，既要用放射性同位素标识的做探针进行分子杂交检测，又要用措施从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性.20、运用基因工程技术培育转基因抗冻番茄，该过程需要用多种限种限制酶(1)上述限制酶在特定位点切割DNA,其实质是断开DNA分子每条链中特定部位的两个核苷酸之间的 ,切割后产生了末端。(2)运用EcoRI和NaeI酶切得某种鱼的抗冻蛋白基因，可与被EcoRI和SamI酶切后的