2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体-高二生物下学期情境教学优质课件（人教版2019选择性必修3）

第二节动物细胞工程二动物细胞融合技术与单克隆抗体1.什么是动物细胞融合技术？2.单克隆抗体是如何制备的？在临床上有哪些应用？问题情境1.视频中了解到针对新冠肺炎真正的特效药是什么？2.这种特效药有着怎样的特点呢？旧知回顾【思考】（1）什么细胞能产生抗体？（2）能产生抗体的细胞能否大量增殖？（3）什么细胞具有无限增殖的能力？（4）能否培养出一种能分泌抗体且增殖能力强的细胞？浆细胞浆细胞没有增殖能力肿瘤细胞动物细胞融合技术动物细胞融合技术实例1：自然条件受精作用1970年人工条件下的人-鼠细胞融合实验实例2：人工诱导实例3：多核细胞患肺结核病人的病理组织中观察到多核细胞动物细胞融合技术使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。形成具有原来两个或多个细胞的遗传信息的杂交细胞

细胞膜具有一定的流动性1.概念：4.结果：2.原理：3.诱导方式物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法与植物原生质体融合的方法相同——动物细胞融合特有动物细胞融合技术病毒颗粒灭活的病毒颗粒粘附于细胞表面细胞膜融合细胞核融合形成杂交细胞在病毒的作用下细胞膜打开灭活病毒诱导细胞融合的原理【拓展】灭活：指用物理或化学手段使病毒失去感染能力（不感染细胞），但是并不破坏病毒的抗原结构（诱导细胞融合）。动物细胞融合技术5.过程：动物细胞融合动物细胞培养细胞膜的流动性细胞增殖杂种细胞经第一次有丝分裂两个核才融合细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核动物细胞融合技术6.意义：7.应用：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。至今，种间、属间、科间，甚至动物和植物之间的细胞融合都已获得成功。研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。为制造单克隆抗体开辟了新途径。动物细胞融合技术植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较动物细胞融合过程植物体细胞杂交过程去壁融合植物组织培养原理融合前处理诱导融合的方法意义和用途单克隆抗体及其应用任务：尝试构建制备新冠病毒单克隆抗体的流程问题1：如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？注射特定抗原（新冠病毒）抗原不纯抗体不纯缺陷：产量低、纯度低，

且抗体的特异性差、灵敏度低。不能无限增殖产生大量抗体动物体内抗原刺激浆细胞抗体筛选单一B细胞增殖分化单克隆抗体及其应用解决方案1975年，米尔斯坦和科勒设计了一个极富创造性的试验方案：米尔斯坦【英国】科勒【德国】可大量增殖的融合细胞可大量增殖的骨髓瘤细胞B淋巴细胞单克隆抗体(由克隆细胞产生的单一抗体）单克隆抗体一个B淋巴细胞细胞群抗体克隆单克隆抗体及其应用注射特定抗原免疫小鼠培养小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞多种细胞多种杂交瘤细胞能分泌所需抗体的杂交瘤细胞选择培养基筛选克隆化培养专一抗体检测注射到小鼠腹腔内增殖体外培养单克隆抗体融合单克隆抗体及其应用目的是获得能产生特定抗体的B淋巴细胞

从脾脏中获取B淋巴细胞几种细胞类型？单克隆抗体及其应用骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合选择培养基杂交瘤细胞B淋巴细胞骨髓瘤细胞（A）合成DNAD途径S途径D途径氨基喋呤A、B、AA、BB、AB1、AB2、AB3既能迅速大量增殖，又能产生抗体单克隆抗体及其应用怎样筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞？克隆化培养抗体检测第二次筛选(抗原-抗体杂交技术)能分泌所需抗体的杂交瘤细胞阳性细胞杂交瘤细胞(多种)多孔细胞培养板阳性孔单克隆抗体及其应用体外培养体内或体外培养能分泌所需抗体的杂交瘤细胞注射到小鼠腔易于控制培养条件（如无需提供无菌环境等），操作简单，成本较低规模小，产量少可大规模培养，大量生产需要人为控制培养条件，成本相对较高单克隆抗体及其应用单克隆抗体筛选二杂交细胞杂交瘤细胞体外或体内培养筛选一骨髓瘤细胞

诱导融合分泌特异抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞群提取已免疫的B淋巴细胞动物细胞融合技术动物细胞培养技术既能大量繁殖又能产生专一抗体特异性强灵敏度高可大量制备注射抗原单克隆抗体及其应用（1）作为诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如利用同位素标记的单克隆抗体，可定位诊断肿瘤、心血管畸形等）单克隆抗体及其应用（2）运载药物生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）(“生物导弹”—单抗导向，药物为弹头)优点：位置准确、疗效高、副作用小单克隆抗体及其应用（3）直接用于治疗疾病实例：利妥昔单抗(美罗华)是一种针对CD20抗原