生物制品效力检验

生物制品效力检验

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四、效力检验

兽医生物制品的效力检验目的在于评定制品的实际使用价值，如疫苗和类毒素的免疫力，血清的特异性抗体效价及其抗病效力，诊断试剂的特异性、灵敏性和检出率等。

（一）效力检验内容

1.免疫原性菌(毒)种的免疫原性决定疫苗的免疫力，但在疫苗制造过程中由于处理不当也会影响菌(毒)的免疫原性，从而影响疫苗的免疫效果。此外，有些疫苗株具有对多个血清型良好的免疫原性，而有些疫苗株则存在严格的特异免疫原性。

2.免疫产生期与持续期

疫苗的免疫产生期与持续期和菌(毒)株的性质、抗原性有关。一般抗原性强的疫苗株对同源动物的免疫产生期早而免疫持续期较长。如兔出血症组织灭活疫苗接种兔后3～4d即产生强免疫力，血清HI抗体滴度很高，免疫力可持续1年以上。通常可根据疫苗的免疫产生期与持续期制定出合理的免疫程序。

任何疫苗免疫动物时均需要含有一定的抗原量，才能导致机体对其产生免疫应答，从而形成免疫力，此种疫苗的抗原量即为疫苗的最小免疫量。最小免疫量通常以半数保护量(PD50)或半数免疫量(ImD50)表示。在侧定时，应以菌落单位(CFU)或空斑单位(PFU)作为疫苗分装时的剂量单位，而不是以稀释度为标准。

（二）效力检验要点生物制品的效力检验，多数采用动物、培养或免疫血清学等方法进行，少数(如诊断抗原)也可用化学方法检查。

1.动物保护力试验

动物保护力试验为兽医生物制品特别是疫苗类制品最常用的效力检验方法，疫苗的免疫原性、免疫产生期与持续期、最小免疫量等都可通过动物进行检测或测定。

各种制品所用的动物种类、标准各不相同，或用敏感的等级实验动物，或用同源动物，通常在所用的实验动物难以判定时可允许用同源动物重检。动物保护力试验方法很多，但大多采用攻毒方法，并设立对照动物。

(1)定量免疫定量强毒攻击法攻击用的强毒量，通常都是实验资料，多为最小致死量的若干倍，不同动物的强毒攻击量也不同。一般在动物经免疫后2～3周，连同对照动物用定量的强毒攻击，然后以攻击动物的存活或不感染比例判定该制品的免疫效果(即保护力)。

例如在猪丹毒弱毒菌苗效力检验时，以每只注射含有1000万个猪丹毒弱毒菌苗的小鼠5只，在免疫14d后连同3只以上对照小鼠各攻击1000个小鼠致死量的猪丹毒强毒菌，免疫鼠应活存4/5以上，对照鼠应全部死亡即可判定菌苗效力检验合格。

(2)变数免疫定量强毒攻击法

将疫苗作不同稀释度并各免疫一定数量动物，经一定时间建立免疫后，各免疫组动物连同对照动物用同一剂量强毒攻击，观察一定时间后统计存活和死亡数，以统计学处理计算PD50。

例如，在鸡新城疫油佐剂灭活疫苗效力检验时，选择3～4周龄敏感鸡35只，以1/25、1/50、1/100稀释疫苗0.5mL各皮下或肌肉注射10只鸡，另5只为对照，3～5周后各肌肉注射105EID50。的新城疫强毒，观察14d按每组的死亡数、对照组全死的结果计算出PD50。并规定该苗每一个使用剂量(0.5mL)的效价不低于50个PD50(3)定量免疫变量强毒攻击法设免疫组与对照组动物，各又分为动物数量相等的小组。免疫组动物用同一剂量制品免疫，经一定时间建立免疫后与对照组动物用不同稀释度的强毒攻击，观察、计算、比较免疫组与对照组的存活率。按LD50计算，如对照组攻击10-5稀释度强毒有50%的动物死亡，而免疫组动物攻击10-3稀释度强毒动物死亡50%，即免疫组动物对强毒的耐受力比对照组高100倍，也就是免疫组有100个LD50保护力。目前，狂犬病疫苗的效力即按此方法检验。(4)血清免疫抗体测定部分生物制品效力可用检测免疫动物血清中特异性抗体效价来衡量免疫力或效力。例如，抗炭疽血清效力检验，给8只敏感豚鼠分别注射血清0.5ml与1.0ml，各4只，24h后，连同4只对