申代码毕自然

基本信第1 男1969年02 8 0571- 基本信第1 男1969年02 8 0571- 0571-PathogenesisresearchofHereditaryexostosisviaIhhsignalingpathwayhyperactivemicemodelH1602.H1624.2017年01月--2020年1284.0000中文关键词英文关键词hereditarymultipleexostosis;sufu;Ihh;第2第2psinK(Ctsk)表达的细胞中条件性敲除Sufu基因，构建了Ihh信号通路亢进的小鼠多发性软骨RNA。同时，在CtskcreSufuF/F小鼠中分选出Sufu被敲除的细胞以及分离出骨软骨瘤组织Hereditarymultipleexostosis(HME)isanautosomaldominantgeneticdisease.ItspathogenesisismutationinEXT1/EXT2gene,causingtheactivitydecreaseoftheformatedglycosylationtransferaseenzymecomplextherebyexcessivelyactivateIhhsignallingpathway，butthe downstreammechanismisstillunknown.Wecollected5pedigreesofHMEandfoundIhhpathwaysupregulatedinthespecimens.Meanwhile，bycathepsinK(Ctsk)creSufuF/Fmice,wehaveconstructedanmultipleosteochondromamicemodelviaup-regulatedIhhsignallingpathway.Ourstudyintendsto:1.ViaRNAseqofclinicalHMEspecimens,comparedwiththenormalbonetissues,screenouttheexpressionchangedRNA.2.IsolatesufuknckoutedcellandosteochondromatissuesofCtskcreSufuF/Fmice,thenthroughRNAseqanalysisrespectively, screenouttheexpressionchangedmolecules.3.AccordingtotheRNAseqresults,identifythekeyregulatedgenesdownstreamofIhhsignallingpathways,exploretransmissiondownstreamIhhsignallingpathwaysandthemechanismsoftargetgenesactontheformationofHME,andfinallyprovideanewtheoreticalbasisforthemoleculartreatmentofHME.第391220131男042女43男024男45男66男047男第391220131男042女43男024男45男66男047男038男05项目申请号/项目批准号项目负责人：毕金额单位：万第412314(1)5(2)6(3)72项目申请号/项目批准号项目负责人：毕金额单位：万第412314(1)5(2)6(3)728394567891011预算说明书（定额补助预算说明书（定额补助第5RT-PCR相关试剂、Westernblot3.24：45 （1）DNA20×375×4；FACS（；Chip-；FACS（；Chip-2.260.86国家相关规定，按4000.5万元(400元×2×10人=8000元),四年预计总计花费约0.8（1）第6（2）（2）2篇SCI50005000元/篇×2篇＝1元/年，四年共需0.48第7正（一）立项依据与研究内容正（一）立项依据与研究内容（4000-字1．项目的立项依据（研究意义、国内外研究现状及发遗传性多发性骨软骨瘤是一种严重的遗传性疾病，下游分子机制不明遗传性多发性骨软骨瘤（hereditaryexostosesHME）呈常染色体[1]。HME患者表现为骨骼畸形、身材矮小、关节运动受限、关节脱位和周围组织受压[2,3]。5-28%的患者甚至出现恶变[4]，因此危害较大。HME在西方国家HME80％的多发性外生性骨疣8q24.11q24.13xoton1（Ext1）11p1211Ext26HMEEX1EX2蛋白是定位于内质(HepnSuft,S的合成有关[3,7IndnhdghogIhh)Ihh8Ext1Ext2基因发生突变时，会使他们所编HSHSHSIhhIhhPHPIhhPHP通12]源基因：SonicHedgehog(Shh)、IndianHedgehog(Ihh)和DesertHedgehog第8HHHHI Hh信号通路的受体为Patched(Ptc)和Smoothened(Smo)[13]Ptc对Hh信号通路起负调节作用；Smo是激活Hh信号传递必需的受体。完整的Ci蛋白包含155Ptc抑制Smo的活性，此时，微管结合蛋白COS2与Ci蛋白结合，形成一个复Gli蛋白，分Gli1，Gli2，Gli3共3种，其中Gli1和Gli2起激活作用，而Gli3起抑制作用。Ci可以被蛋白激酶A(PKA)磷酸化，磷酸化后的Ci蛋白被泛素化连接酶相关的F-box蛋白Slimb识别，进而发生降解。分解产物Ci75是一种转录抑制因子，可以进入细胞核抑制Hh靶基因的转录。Hh蛋白可以结合Ptc受体，从而解除对Smo的抑制效应。活化的Smo一方面与Cos2、Fu结合形成复合物从而释放Ci蛋白，另一方面可以抑制PKA活性，从而抑制Ci的裂解。Fu抑制物（Suppressoroffused,SuFu）是Hh通路的负向调控者。此外，Ci可以下调iHog和CDO在细胞膜上的表达，从而抑制Hh蛋白与受体Ptc结合，SUFUHhSUFU4681-1所示。在它的CPESTNES1.SUFU蛋白结构域示意图（Fu:fused;Ci:Cubitusinterruptus;PEST:aregionrichtheaminoacidsproline(P),glutamicacid(E),serine(S)threonine(T);NES:nuclear-exportsignal号通路中通过与Ci和FuSUFU蛋白包含了484N-terminaldomain(NTD)和一个C-terminaldomain(CTD)（图2）[16]。在哺乳动物中，SuFu的缺失可以导HhPtch1的缺失，这表明，SuFuGli第9图2.SUFU蛋白三维结图2.SUFU蛋白三维结构。包括两个球状结构域，之间存在一个短的连接（氨基酸的主要抑制物。SuFuHhSufu丧失活性会导致胚胎致死及背根神经节的缺陷[17,18]。无Hh信号时，小鼠和果蝇中的Sufu都直接与Gli/Ci蛋白结合将它们保持在胞质中来抑制Hh通路活性。在哺乳动物细胞中，Sufu可能是通过的它的负调通过与GSK3结合促进GliA的形成。而且Sufu在稳Gli2和Gli3的作用中非常关键。目前Sufu被公认为肿瘤抑制基因，其失活性突变可导致成神经血管瘤和基底细胞癌等肿瘤[19,20]HMEIhh信号通路的关系也比较明确，Ext1/Ext2突变后所引起的下游分子事件研究较少，哪些关键分子受到影响发生了突变，包括新的致病突变位点一例[3]，并发现罕见关节腔内HME一例IHH蛋白在骨软骨瘤的软骨帽处表达K(CathepsinK)骨细胞介导的骨吸收中发挥重要作用。CtskCre第10的条件型基因敲除小鼠。2012年Wentian的条件型基因敲除小鼠。2012年WentianYang及其同事在Nature杂志报道，利Ctsk-CrePtpn11基因能导致“混合性软骨瘤病”。进一步研究表明Ctsk在位于Ranvier的软骨膜槽中的间充质干细胞中表表明Ctsk表达的细胞是骨软骨瘤的前体细胞或者癌症干细胞。同时，研究表明Ctsk-Cre;Ptpn11HhHh通路可以治疗此我们Ctsk-cre小鼠Sufufl/fl合笼Ctsk-CreSufufl/fl特异性基因敲除小鼠，发现出生后小鼠4周后行动出现异常。通20周大的小鼠的后肢进行µCT发现其爪子的跖骨和趾骨、胫骨、股骨存在骨软骨瘤。对胫骨和股骨进行切片，HE和番O染色发现，Ctsk-CreSufufl/fl小鼠存在骨软骨瘤和内生软骨瘤的表型Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠的软骨瘤标本的组织学上发现Ihh通路上调。Ctsk-CreSufufl/fl小鼠中，影响生长板软骨细胞增殖、分化的分子机制并不清楚。我们认为，临床上遗传性多发性骨软骨瘤和Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠的骨软骨瘤是Ihh通路上调而导致软骨瘤的发生，但其下游通路相同。因此们提出这样的假说传性多发性骨软骨瘤的发生和Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠骨软骨瘤的发生存在着Ihh通路共有的下游分子，这些分子对软骨瘤的发生起着重要的作用。我们通过希望借助该动物模型，研究小鼠产生多发性HME参考文献KimBT,KitagawaH,TamuraJ,SaitoT,Kusche-GullbergM,LindahlU,SugaharaK.Human acetylglucosaminyltransferasesthatlikelyareinvolvedinheparansulfate/heparinbiosynthesis[J].ProcNatlAcadSciUSA,2001,98(13):7176-7181.DOI:10.1073/pnas.131188498.CiavarellaM,CocoM,BaordaF,StanzialeP,ChettaM,BiscegliaL,PalumboP,BengalaM,RaiteriP,SilengoM,CaldariniC,FacchiniR,LalaR,CavaliereML,DeBrasiD,PasiniB,ZelanteL,GuarnieriV,D'AgrumaL.20novelpointmutationsandonelargedeletioninEXT1andEXT2genes:reportofdiagnosticscreeninginalargeItaliancohortofpatientsaffectedbyhereditarymultipleexostosis[J].Gene,2013,515(2):339-348.DOI:10.1016/j.gene.2012.11.055.CaoL,LiuF,KongM,FangY,GuH,ChenY,ZhaoC,ZhangS,BiQ.NovelEXT1mutationidentifiedin第11pedigreewithhereditarymultipleexostoses[J].OncolRep,2014,31(2):713-KiviojaA,ErvastiH,KinnunenJ,KaitilaI,Wolfpedigreewithhereditarymultipleexostoses[J].OncolRep,2014,31(2):713-KiviojaA,ErvastiH,KinnunenJ,KaitilaI,WolfM,BohlingT.Chondrosarcomainafamilywithmultiplehereditaryexostoses[J].JBoneJointSurgBr,2000,82(2):261-266.JennesI,ZuntiniM,MeesK,PalaganiA,PedriniE,DeCockG,FransenE,VandenBergheW,SangiorgiL,WuytsW.IdentificationandfunctionalcharacterizationofthehumanEXT1promoterregion[J].Gene,2012,492(1):148-159.DOI:10.1016/j.gene.2011.10.034.WuytsW,VanHulW,DeBoulleK,HendrickxJ,BakkerE,VanhoenackerF,MollicaF,LudeckeHJ,BS,PazzagliaUE,MortierG,HamelB,ConradEU,MatsushitaM,RaskindWH,WillemsPJ.MutationsintheEXT1andEXT2genesinhereditarymultipleexostoses[J].AmJHumGenet,1998,62(2):346-354.DOI:S0002-9297(07)63500-9[pii].KangZ,PengF,LingT.MutationscreeningofEXTgenesinChinesepatientswithmultipleosteochondromas[J].Gene,2012,506(2):298-300.DOI:10.1016/j.gene.2012.07.006.KozielL,KunathM,KellyOG,VortkampA.Ext1-dependentheparansulfateregulatestherangeofStickensD,ClinesG,BurbeeD,RamosP,ThomasS,HogueD,HechtJT,LovettM,EvansGA.TheEXT2multipleexostosesgenedefinesafamilyofputativetumoursuppressorgenes[J].NatGenet,1996,14(1):25-32.DOI:10.1038/ng0996-25.BornemannDJ,ParkS,PhinS,WarriorR.AtranslationalblocktoHSPGsynthesispermitsBMPsignalingintheearlyDrosophilaembryo[J].Development,2008,135(6):1039-1047.BornemannDJ,DuncanJE,StaatzW,SelleckS,WarriorR.AbrogationofheparansulfatesynthesisinDrosophiladisruptstheWingless,HedgehogandDecapentaplegicsignalingpathways[J].Development,2004,131(9):1927-1938.DOI:10.1242/dev.01061.BishopJR,SchukszM,EskoJD.Heparansulphateproteoglycansfine-tunemammalianphysiology[J].Nature,2007,446(7139):1030-1037.BeachyPA,HymowitzSG,LazarusRA,LeahyDJ,SieboldC.InteractionsbetweenHedgehogproteinsandtheirbindingpartnerscomeintoview[J].GenesDev,2010,24(18):2001-2012.DOI:10.1101/gad.1951710.TaipaleJ,CooperMK,MaitiT,BeachyPA.PatchedactscatalyticallytosuppresstheactivityofSmoothened[J].Nature,2002,418(6900):892-897.DOI:10.1038/nature00989.EhlenHW,BuelensLA,VortkampA.Hedgehogsignalinginskeletaldevelopment[J].BirthDefectsResCEmbryoToday,2006,78(3):267-279.DOI:10.1002/bdrc.20076.ZhangY,FuL,QiX,ZhangZ,XiaY,JiaJ,JiangJ,ZhaoY,WuG.StructuralinsightintotherecognitionandregulationbetweenSuppressorofFusedandGli/Ci[J].NatCommun,2013,4:2608.DOI:CooperAF,YuKP,BruecknerM,BraileyLL,JohnsonL,McGrathJM,BaleAE.CardiacandCNSdefectsinamousewithtargeteddisruptionofsuppressoroffused[J].Development,2005,132(19):4407-4417.DOI:SvardJ,Heby-HenricsonK,Persson-LekM,RozellB,LauthM,BergstromA,EricsonJ,ToftgardR,S.GeneticeliminationofSuppressoroffusedrevealsanessentialrepressorfunctioninthemammalianHedgehogsignalingpathway[J].DevCell,2006,10(2):187-197.DOI:10.1016/j.devcel.2005.12.013.TaylorMD,LiuL,RaffelC,HuiCC,MainprizeTG,ZhangX,AgatepR,ChiappaS,GaoL,LowranceA,HaoA,GoldsteinAM,StavrouT,SchererSW,DuraWT,WainwrightB,SquireJA,RutkaJT,HoggD.MutationsinSUFUpredisposetomedulloblastoma[J].NatGenet,2002,31(3):306-310.DOI:PastorinoL,GhiorzoP,NastiS,BattistuzziL,CusanoR,MarzocchiC,GarreML,ClementiM,Scarra第12IdentificationofaSUFUgermlinemutationinafamilywithGorlinsyndrome[J].AmJMedGenetA,2009,149A(7):1539-1543.DOI:10.1002/ajmg.a.32944.]KongM,CaoLI,ZhangQ,FangY,ZhaoC,GuH,IdentificationofaSUFUgermlinemutationinafamilywithGorlinsyndrome[J].AmJMedGenetA,2009,149A(7):1539-1543.DOI:10.1002/ajmg.a.32944.]KongM,CaoLI,ZhangQ,FangY,ZhaoC,GuH,ZhangS,ChenYU,WuJ,BiQ.Identificationofararecaseofintra-articularosteochondromamanifestingasthreeloosebodiesinapatientwithhereditarymultipleosteochondromas:Acasereport[J].OncolLett,2015,10(2):798-804.DOI:10.3892/ol.2015.3284.]YangW,WangJ,MooreDC,LiangH,DoonerM,WuQ,TerekR,ChenQ,EhrlichMG,QuesenberryPJ,NeelBG.Ptpn11deletioninanovelprogenitorcausesmetachondromatosisbyinducinghedgehogsignalling[J].Nature,2013,499(7459):491-495.DOI:2．项目的研究内容、研究目标，以及拟解决的关键科学问题（部分为重点阐述内容2.1研究目通过临床上HME标本、Sufu条件性基因敲除小鼠中敲除细胞和肿瘤组织分析，筛选出Ihh通路调控的关键下游分子，并通过体内外试验研究关键下游分子与Ihh构建Ext1基因突变的载体转染软骨细胞并注入裸鼠皮下，构建骨软骨瘤HME2.2研究内（1）HME手术标本中Ihh通路上调取骨软骨瘤手术标本，分离出骨软骨瘤的软骨部分，提取总RNA，通过RNAseq技术，得出骨软骨瘤标本的RNA表达谱。通过人类正常骨组织的RNAseq选得出表达改变的基过构建的EXT1基因突变载体，转染软骨干细胞过表达EXT1突变基因，在体外验证Ihh通路下游受（2）Ctsk-CreSufufl/fl产生混合型软骨肿瘤的分子机制。Ctsk-Sufufl/f小鼠多发性软骨观察其表通过组织学和qPCR检测确定Ihh第13;（3）寻找出软骨肿瘤形成过;（3）寻找出软骨肿瘤形成过程中，Ihh通路下游受调控的关键分子，并在内外试验上验证关键下游分子与Ihh信号通路的关系，并提出分子治疗HME新策略。通过Ctsk- Sufufl/flmice敲除细胞和骨软骨瘤组织标本中RNAseq的结果，结合临床HME标本RNAseq改变的表达谱，挑选出Ihh通路下游受调控的分化。提取Ctsk-;分化而来的软骨细胞，通过SiRNA下调关键基因、关键基因突变体转染或者通过加这通路下游受调控的关键基因的激动剂或者抑制剂，观察软骨细胞的Ext1RiRNA技术或者关键基因的激动剂、抑制剂来上调或者下调Ihh通路，观察细胞的增殖和IhhCtsk-2.3拟解决的关键问题（1）Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠产生混合型软骨瘤的分子机制。SUFU是如何调控Ihh通路的下游分子产生混合型软骨肿瘤；ctsk前体条件性敲除Sufu基因如何影第143．拟采取的研究方案及可行性分析（包括研究方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明3.1研究方3．拟采取的研究方案及可行性分析（包括研究方法、技术路线、实验手段、关键技术等说明3.1研究方案：1.收集临床HME标本，通RNAseq，寻Ihh通路调控的分子。IhhIhh，Gli1RNAseq模型，探究小鼠产生多发性混合型软骨瘤的分子机制。;sufu通过Ctsk-Cmice进行交配，被Cre切除的细胞膜会表达提取Ctsk-C小鼠的骨软骨瘤组织的总并进行RNAseq分析。Ctsk-Cre;Sufufl/fl第15Ctsk-CreSufufl/flsufucKOMSC，Ctsk-Cre;Sufufl/flqPCR检测RNAseqsufuqPCR根据以上结Ctsk-CreSufufl/flsufucKOMSC，Ctsk-Cre;Sufufl/flqPCR检测RNAseqsufuqPCR根据以上结果，阐明Ctsk-小鼠产生多发性混合型软骨瘤的分3.寻找出Ihh通路下游受调控的关键分子，并在体内外试验验证。IhhIhh通路下游受调控的关键基因对Ext1突变载体转染的软骨细胞细胞功影响及分子机构建突变载的软骨细胞并培养。通过RiRNA、关键基因突变体转染技术或者关键基因的激抑制剂来上调或者下调Ihh通路;子机制。Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠的骨髓干细胞，诱导其分化成软骨细胞后培养用Ihh通路下游受调控的关键分子的激动剂或者抑制剂对Ctsk-第16技术路线临床样动物模肿瘤Ctsk-Sufufl/fl小流式分选出f条件性敲除的细胞体内软骨瘤标本分体外分子机制第17信号通路技术路线临床样动物模肿瘤Ctsk-Sufufl/fl小流式分选出f条件性敲除的细胞体内软骨瘤标本分体外分子机制第17信号通路分析，靶基因调控细胞发育的作软骨相关基因变化骨软骨瘤中IHH通路下游受调控的关键基因路在软骨发育及软骨瘤细胞形成RNARNA测序寻找 通路相关Maker3.3项目可行性分析目前我们已经收集了遗传性多发性骨软骨瘤的临床标本和正常组织标本各5例，并提取了总RNA。实验室已经有Ctsk-Cre;条件性敲除小鼠可3.3项目可行性分析目前我们已经收集了遗传性多发性骨软骨瘤的临床标本和正常组织标本各5例，并提取了总RNA。实验室已经有Ctsk-Cre;条件性敲除小鼠可以对（1）立论的可行性Sufufl/fl条件性敲除小鼠表型上发现了混合型软骨肿瘤。sufuIhh抑制基因，可以推断sufu基因的敲除会引起Ihh通路上调，从而形成多发性软骨软骨肿瘤标本的组织学上都发现了Ihh通路上调，我们希望从（2）研究设计与工作基础的可行性5RNACtsk-Cre;Sufufl/fl软骨肿瘤标RNAseq相关分我们还通过显微切割分离Ctsk-Cre;骨软骨瘤Sufufl/fl筛出骨软骨瘤中表达改变的基因。最后我们将根据临床上 Ctsk-第18制剂或激动剂来rescue（3）研究队伍与技术的可行性（4）研究环境制剂或激动剂来rescue（3）研究队伍与技术的可行性（4）研究环境与研究设备的可行性等）4．本项目的特色与创新之处；（2）临床病例和动物实验相结合是研究软骨肿瘤的常见方法。研究表明HME成是因为HS合成不足，造成Ihh通路中配体－受体结合发生错乱而影响到配Ihh信号通路发生异常激活。而Ctsk-Cre;小鼠的软骨肿瘤在理论上是由于抑制Ihh通路的sufu第195．年度研究计划及预期研究结果（包括拟组织的重要学术交流活动、国5．年度研究计划及预期研究结果（包括拟组织的重要学术交流活动、国际合作与交流计划等年度研究（1）20171月至2017年12）2（2）20181月至2018年121）通过Ctsk-Cre;micemT/mGmice进行交配，被Cre切除的细胞膜会表达GFP，通过流式细胞分选出Cre敲除的细胞。对sufu条件性敲除RNAseq2）Ctsk-Cre;Sufufl/fl3）取sufucKO小鼠的成骨细胞、破骨细胞和软骨细胞培养，观察其分化和形sufu敲除是否调控成骨细细胞和软骨的功能。用qPCR检测RNAseq的筛选出的表达改变的分子。上调sufu基因后，观察这些分子的改检测并（3）2019年1月至2019年12月2)Ihh骨干细胞和Ctsk-Cre;Sufufl/fl小鼠的软骨细通过过表达或者抑制该基因的表Ihh第203）用Ihh通路下游受调控的关键基因的激动剂或者抑制剂饲养在（4）2020年1月至20203）用Ihh通路下游受调控的关键基因的激动剂或者抑制剂饲养在（4）2020年1月至2020年12月;3)预期研究结果3)（二）研究基础与工作条件1．研究基础（与本项目相关的研究工作积累和已取得的研究工（1）临床样本的收集，免疫组化得出骨软骨瘤中Ihh通路相关蛋白高表达。血。先证者(III22)在2岁左右发现双肘关节骨疣，约2*3cm；双膝关3*3cm大小；随年龄增大肿块逐步增大，到16岁左右肿块生长停止，X线示：双5第21图3.EXT1和EXT2图4已发现的HME家系图之一：∕已死亡，箭头所示为先证者第22图3.EXT1和EXT2图4已发现的HME家系图之一：∕已死亡，箭头所示为先证者第22c.115G>T;5HMEX线表现：①白色箭头示双侧尺骨缩短畸形；②双膝关节正位片显示关节5HMEX线表现：①白色箭头示双侧尺骨缩短畸形；②双膝关节正位片显示关节6RNA6HME手术标本的免疫组化表现。IHH(2)Ctsk-Ctsk-Cre;Sufufl/f小鼠软骨肿瘤模型的建立与表型观察的小鼠出生后耳周之后行动异后肢爪子变厚，图第23;7CtskcreSufuF/FA;7CtskcreSufuF/FActsk条件性敲除sufu小鼠耳朵变小，脊柱弯曲。B：手掌增厚。C：阿尔新蓝-茜素红整体染色表明其胸肋骨发育异常 Hindlimb ACtsk-第24BC20Ctsk-图 Ctsk条件性敲除sufu小鼠存在混合型软骨瘤病。Sufufl/fl的腿骨进行microCT疣产生。B:BC20Ctsk-图 Ctsk条件性敲除sufu小鼠存在混合型软骨瘤病。Sufufl/fl的腿骨进行microCT疣产生。B:HE、番红O染色和Col2α1IHC染色显cKOmice的股骨近关节处有骨软骨瘤产生。C：番红O染色显示在cKOmice胫骨的生长板附近有内生性软骨瘤的产生9IhhCtsk-CreSufufl/fl小鼠骨软骨瘤软骨帽处IHH蛋白表达较野生型增高。第25（3）SufuF/F小鼠的关节软骨（3）SufuF/F小鼠的关节软骨细胞体外试验CRE病毒进行knockdown10:C(Aggrecan)均上调（10:B可能抑制了软骨细胞的分化A：SufuF/F软骨细胞分别加EGFP和Cre病毒图10.进行分化，然后进行阿尔新兰染色B：Knockdownsufu引起软骨分化的marker—col10上 (Aggrecan)也上调，说明软骨细胞分化增强。C：sufu表达下调，Gli1和第262．工作条件（包括已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟2．工作条件（包括已具备的实验条件，尚缺少的实验条件和拟浙江省人民医院骨科浙江省胃肠病学重点实验室FluorChemHD2，ProteinSimple，美国）、荧光倒置显微镜日本）中国科学院上海生物化学与细胞生物学研究所第273．正在承担的与本项目相关的3．正在承担的与本项目相关的科研项目情况（申请人和项课题负责人：毕擎，起止年限药卫生平台研究计划重点项目，编号：2012ZDA003，起止年限2016.124．完成国家自然科学基金项目情况（对申请人负责的前一摘要（限500字）和相关成果的详细目录无（三）其他需要说明的问题.申无2.具有高级专业技术职务（职称的申请人或者主要参与者是否存在同年申请或者参与申请国家自然科学基金项目的单位不一致第28无3.具有高级专业技术职务（职称）的申请人或者主要参与者无其他第291.2005/9–2008/5，温州医科大学，外科学，硕士，导师：王跃东2.1987/9–1992/7，遵义医学院，临床医学，学士，导师：无1.2010/92.2008/12-2010/93.2003/12-2008/114.1997/12-2003/115.1992/8-1997/11主持或参加科研项目（课题）及人才计划项目情况（按时间倒序排序3、浙江省自然科学基因项目，Y2100731分子机理研究》，2010-2015，经费5万，已结题，主持代表性研究成果和学术奖励情况（每项均按时间倒序排序1.BIQing，ZHANGQiong，MAJun，XUMing，ZHANGShui-Bin-song，XIABing，GUHai-feng，HONGJian-fei,，ZHAOChen，ZHUDan-jie(*)，Effectofcombinationtherapywithalginatedressingandmouseepidermalgrowth第30factoronepidermalstemcellsinpatientswithrefractorywounds.，Chinesemedicaljournal，2012，125（2）：257-261。2.（勿与第一作者论文重复MingxiangKongfactoronepidermalstemcellsinpatientswithrefractorywounds.，Chinesemedicaljournal，2012，125（2）：257-261。2.（勿与第一作者论文重复MingxiangKong，JianWu Qdeniicaio ofagermlineSMARCB1nonsensemutationinafamilymanifestingbothschwannomatosisandunilateralvestibularschwannoma，JournalofNeuro-Oncology，2015，125（2）：439-441MINGXIANGKONG，LICAO，QIONGZHANG，YONGFANG，CHENGU，SHUIJUNZHANG，YUCHEN，JINHUAWU，Bi，diiinofararecaseofintra-articular osteochondromamanifestingasthreeloosebodiesinapatientwithhereditarymultipleosteochondromas:Acasereport，OncologyLICAO，FEILIU，MINGXIANGKONG，YONGFANG，HAIFENGCHEN，CHENZHAO，SHUIJUNZHANG，QINGBI(*)，NovelEXT1mutationidentifiedinapedigreewithhereditarymultipleexostoses，Oncologyreports，2014，31（2）：WEIWEIRUAN，LICAO，MINGXIANGKONG，QIONGZHANG，YONGXU，SHUIJUNZHANG，QINGBI(*)，NovelEXT2mutationidentifiedina pedigreewithKongMX，Zhang Faahpehoe terolaemiawithtuberousandtendinousxanthomas:casereportandmutationanalysis，Clinicalandexperimentaldermatology，2015，40（7）：765-769。3.Fang ，BarberaAJ，XuY，RutenbergM，LeonorT，BiQ，LanP，YuanGC，LianC，PengJ，ChengD，SuiG，KaiserUB，ShiY，ShiYG(*)，HumanLSD2/KDM1b/AOF1regulatesgenetranscriptionbymodulatingintragenicH3K4me2methylation，MolCell，2010，39（2）：222-233。第31参与者简历参与者简历2003/09-2010/06，2013/9-2015/6美国罗切斯特大学骨肌研究中心博士后研究员，导师：解超无无代表性研究成果和学术奖励情况（每项均按时间倒序排序页码（摘要论文请加以说明；③对会议论文：应按照论文发表时作者顺序列一作者均加注上标“#”字样，通讯作者及共同通讯作者均加注上标“*”字样，ChenY,HallabNJ,LiaoYS,NarayanV,SchwarzEM,XieC.Antioxidantimpregnatedultra-highmolecularweightpolyethyleneweardebrisparticlesdisplayincreasedboneremodelingandasuperiorosteogenic:Osteolyticprofilevs.conventionalUHMWPEparticlesinamurinecalvariamodel.JOrthopRes.2015Oct第32陈宇Dynesys报》陈宇Dynesys报》XieC,LiY,LiQ,ChenY,YaoJ,YinG,BiQ,O'KeefeRJ,SchwarzEM,TylerW.IncreasedInsulinmRNABindingProtein-3ExpressionCorrelatesw