健脾化瘀方HPLC指纹图谱的研究

健脾化瘀方HPLC指纹图谱的研究【摘要】目的：建立健脾化瘀方HPLC指纹图谱及多成分含量测定方法。方法：采用ThermoHypersilGoldC18柱（250×4.6mm，5µm），CH3OH-0.05%H3PO4为流动相，梯度洗脱；检测波长283nm，211nm；流速1.0mL/min；柱温30℃；进样量5μL。建立10批健脾化瘀方HPLC指纹图谱，并进行相似度评价。同法测定该复方中的8种成分含量。结果：建立健脾化瘀方HPLC指纹图谱，27个共有峰被确定并对其进行药材归属，通过对照品指认出绿原酸、香草酸、对香豆酸、阿魏酸、橙皮苷、槲皮素、佛手柑内酯、苦参碱共8个成分；方法学考察结果RSD值均小于3.00%，10批样品与对照图谱相似度均大于0.90。结论：该研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法可为健脾化瘀方的质量控制研究提供参考。【关键词】健脾化瘀方；HPLC；指纹图谱；含量测定

StudyonHPLCFingerprintofJianpiHuayuFormula[Abstract]Objective:Toestablishthehighperformanceliquidchromatography(HPLC)fingerprintandmulticomponentcontentdeterminationmethodforJianpiHuayuFormula.Methods:TheHPLCcolumnwasThermoHypersilGoldC18(250×4.6mm,5µm)withmethanol-0.05%phosphoricacidsolutionasthemobilephaseforgradientelution,thedetectionwavelengthwassetat283nmand211nm,theflowratewas1.0mL/min,thecolumntemperaturewas30℃andinjectionvolumewas5μL.EstablishtheHPLCfingerprintsof10batchesofJianpiHuayuFormulaandevaluatingthesimilarity.Determinethecontentof8componentsinthecompoundformulabyusingthesamemethod.Results:TheHPLCfingerprintofJianpiHuayuformulawasestablished,27commonpeakswereidentifiedandtheirmedicinalmaterialswereassigned.Eightcomponents,namelychlorogenicacid,vanillicacid,p-coumaricacid,ferulicacid,hesperidin,quercetin,bergamotlactoneandmatrine,wereidentifiedbyreferencesubstance.ThemethodologicalstudyresultsshowedthattheRSDvalueswerealllessthan3.00%,andthesimilaritybetweenthe10batchesofsamplesandthecontrolspectrawasgreaterthan0.90.Conclusion:TheHPLCfingerprintandcontentdeterminationmethodestablishedinthisstudycanprovideareferenceforthequalitycontrolresearchofJianpiHuayuFormula.[Keywords]JianpiHuayuFormulaHPLCFingerprintContentdetermination[26]。总之，上述成分药理作用与健脾化瘀方发挥的药效相关。故而为保证健脾化瘀方的质量，对上述成分的含量进行了测定。样品含量测定结果显示绿原酸、香草酸、对香豆酸、阿魏酸、橙皮苷、槲皮素、佛手柑内酯、苦参碱8种成分的含量分别为0.0021%~0.0061%、0.0025%~0.0034%、0.0116%~0.0295%、0.0006%~0.0062%、0.0014%~0.0053%、0.0017%~0.0026%、0.0014%~0.0027%、1.4052%~2.4114%。十批药材中成分含量存在差异，可能与不同批次药材生产厂家不同、提取过程中所用的电热套设备不同，加热温度有所差异、贮藏时间长短不一等因素有关。苦参碱的含量大于1.2%，可作为健脾化瘀方的指标性成分，为控制该方质量安全有效提供参考。但在本次实验条件下未能指认出茯苓的成分，对此有待进一步研究。

参考文献曹霞,窦倩如,粘惠瑜,等.海南省居民肝癌死亡与期望寿命损失情况分析[J].实用肿瘤杂志,2023,38(02):117-122.单天昊,安澜,徐梦圆,等.2020年全球肝癌和胆囊癌发病死亡分析[J].肝癌电子杂志,2022,9(04):46-51.ZengH,ChenW,ZhengR,etal.ChangingcancersurvivalinChinaduring2003-15:apooledanalysisof17population-basedcancerregistries.LancetGlobHealth.2018May;6(5):e555-e567.

袁声贤,周伟平.原发性肝癌转化治疗的进展和体会[J].肝胆外科杂志,2022,30(03):161-164+168.Yang,J.D.,Hainaut,P.,Gores,G.J.

,etal.

Aglobalviewofhepatocellularcarcinoma:trends,risk,preventionandmanagement.

NatRevGastroenterolHepatol

16,589–604(2019).国家卫生健康委员会.原发性肝癌诊疗规范（2019年版）[J].中国实用外科杂志,2020,40(02):121-138.游丽萍,孔晓妮,高月求,等.基于文献的中药治疗肝癌实验研究现状分析[J].中医杂志,2023,64(01):77-82.魏巍,王冰瑶.莪术及其主要成分的药理作用研究进展[J].药物评价研究,2022,45(10):2154-2160.魏海涛,方秋华,张炳顺,等.白术有效成分及药理作用研究进展[J].广东畜牧兽医科技,2022,47(06):40-44+51.许燕芳,曹辉琼,贾靖,等.健脾化瘀方治疗胃癌前病变的疗效及相关机制探讨[J].中国中西医结合消化杂志,2023,31(02):132-135.覃玉冰,林炜基,曾广必,等.基于网络药理学预测白花蛇舌草治疗肝癌的分子机制[J].广州中医药大学学报,2019,36(08):1236-1241.王昌俊,廖子君,陈庆强,等.中药960合剂配合肝动脉栓塞化疗治疗晚期肝癌[J].中国中西医结合消化杂志,2002,(04):211-214.林泳欣,王昌俊.健脾化瘀方对肝癌HepG-2细胞生理活性的影响[J].西部中医药,2018,31(11):11-13.谭为,赵优雅,黄旭晖,等.健脾化瘀方对肝细胞癌术后患者早期生活质量的影响[J].现代医院,2017,17(07):1050-1052+1056.王昌俊,刘友章,许鑫梅.健脾化瘀复方药物血清对人肝癌细胞BEL7402增殖的影响[J].中医药通报,2006(03):54-56.王昌俊,李建军,陈祖兵,等.健脾化瘀中药提高胞嘧啶脱氨酶/单纯疱疹病毒胸苷激酶基因治疗肝细胞癌的实验研究[J].现代生物医学进展,2008(09):1605-1607.张永昕,李莎恩,段付军,等.补中益气丸(水丸)的中药指纹图谱研究[J].中国药业,2019,28(23):4-9.康福忠,张立新,高木珍,等.中药色谱指纹图谱技术及应用前景[J].中国兽药杂志,2005,(09):37-40.徐妍,杨华蕊,杨永寿,等.中药指纹图谱研究现状及展望[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(76):91-94.赵娟,谢世静,赵兴华,等.中药指纹图谱质控方法研究进展[J].云南中医中药杂志,2020,41(01):82-86.王鹏飞,王京辉,段秀梅,等.HPLC法同时测定复方苦参注射液中7个成分含量及指纹图谱研究[J].药物分析杂志,2022,42(07):1101-1109.管西芹,毛近隆,唐迎雪,等.对香豆酸的药理作用研究进展[J].中草药,2018,49(17):4162-4170.魏静,宋若兰,陈翔,等.新甲基橙皮苷二氢查耳酮及合成前体药理作用研究进展[J].食品工业科技,2022,43(23