12-03-15高二生物《DNA的粗提取与鉴定》()省公开课一等奖全国示范课微课金奖课件

1.生物体遗传物质是什么？讨论第1页2.真核生物遗传物质存在于哪里？1.生物体遗传物质是什么？讨论第2页2.真核生物遗传物质存在于哪里？1.生物体遗传物质是什么？3.怎样才能将真核细胞内遗传物质

分离来？讨论第3页DNA粗提取与判定第4页用什么材料提取DNA？为何？(一)试验材料选取：第5页(一)试验材料选取：鸡血细胞做试验材料。原因：1.鸡血细胞核DNA含量丰富，材料易得2.鸡血细胞极易吸水胀破3.植物细胞外有细胞壁，其它动物细胞制取

DNA有时需匀浆和离心，对设备要求较高，

操作繁琐，历时较长。第6页(二)破碎细胞，获取含DNA滤液1.若是动物细胞，怎样获取DNA滤液？第7页2.若是植物细胞，怎样获取DNA滤液？(二)破碎细胞，获取含DNA滤液1.若是动物细胞，怎样获取DNA滤液？第8页加入洗涤剂和食盐作用分别是？假如研磨不充分，会对试验结果产生什么影响？第9页加入洗涤剂和食盐作用分别是？假如研磨不充分，会对试验结果产生什么影响？洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解第10页加入洗涤剂和食盐作用分别是？假如研磨不充分，会对试验结果产生什么影响？洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响试验结果，造成看不到丝状沉淀物、用二苯胺判定不显示蓝色等第11页滤液中杂质可能有哪些细胞成份？(三)去除滤液中杂质第12页可能有核蛋白、多糖和RNA等杂质。(三)去除滤液中杂质滤液中杂质可能有哪些细胞成份？第13页依据DNA理化性质，能够用哪些方法来去除滤液中杂质？(三)去除滤液中杂质第14页为何重复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液浓度和作用)(三)去除滤液中杂质第15页(三)去除滤液中杂质为何重复地溶解与析出DNA，能够除去杂质？(注意：两种食盐溶液浓度和作用)用高浓度盐溶液能除去高盐中不能溶解杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去在低盐溶液中杂质。所以，重复溶解与析出DNA，就能除去与DNA溶解度不一样各种杂质。第16页析出：滤液+同体积95%冷却酒精白色丝状物(四)DNA析出第17页(五)DNA判定怎样判定？对比反应是为了证实什么？原理？第18页DNA＋二苯胺蓝色物沸水浴(五)DNA判定怎样判定？对比反应是为了证实什么？原理？第19页三、操作提醒1.以血液为试验材料，每100ml加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。第20页2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子断裂，造成DNA分子不能形成絮状沉淀。三、操作提醒1.以血液为试验材料，每100ml加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。第21页2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子断裂，造成DNA分子不能形成絮状沉淀。3.二苯胺试剂要现配现用，不然会影响判定效果。三、操作提醒1.以血液为试验材料，每100ml加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。第22页试验第23页第24页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固第25页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂第26页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

第27页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀释至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

第28页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀释至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物尽可能多溶解于溶液中第29页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀释至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物尽可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA滤液中杂质第30页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀释至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物尽可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA滤液中杂质⑧提取DNA第31页①加入柠檬酸钠溶液目标是预防血凝固②加速血细胞破裂

③溶解DNA

④使2mol/LNaCl溶液稀释至0.14mol/L使得

DNA最大程度地析出

⑥使含DNA黏稠物尽可能多溶解于溶液中⑦除去含DNA滤液中杂质⑧提取DNA⑨A出现蓝色B无改变第32页讨论此试验过程中有几次过滤，几次析出？

分别在哪一步？第33页答:整个试验共“两次过滤，两次析出”此试验过程中有几次过滤，几次析出？

分别在哪一步？讨论第34页两次过滤第35页两次过滤第一次：DNA存在于滤液里第一步第二次：DNA存在于滤液里第六步第36页过滤时使用纱布层数与需用滤液或

黏稠物相关，第二次要用其滤出黏稠物

相关，所以要使用多层纱布，第一次和第

三次均要用其滤液，使用纱布为1－2层两次过滤第一次：DNA存在于滤液里第一步第二次：DNA存在于滤液里第六步第37页③两次析出第38页③两次析出第一次：用0.14mol／LNaCI溶液第39页③两次析出第一次：用0.1