辽宁省丹东市六校2022-2023学年高二下学期期中试生物试题（解析版）

高级中学名校试卷PAGEPAGE1辽宁省丹东市六校2022-2023学年高二下学期期中试试题一、单项选择题1.下列有关果酒果醋发酵条件的控制，下列叙述错误的是（）A.果酒发酵的最适温度要低于果醋发酵的最适温度B.发酵的装置可用洗洁精和无水乙醇进行清洗和消毒C.进行果酒发酵时，每隔12h左右需要拧松瓶盖排放CO2D.酒精发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以生存〖答案〗B〖祥解〗1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30~35°C。【详析】A、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18~25°C，而醋酸菌最适生长温度是30~35℃，故果酒发酵的最活温度要低于果醋发酵的，A正确；B、果酒、果醋发酵的装置可用洗洁精和70%酒精进行清洗和消毒，B错误;C、进行果酒发酵时，每隔12h左右需要拧松瓶盖排放CO2，即使将CO2排出，C正确；D、在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，同时形成CO2，CO2溶于水会使pH降低，因此酒精发酵液呈酸性，且酒精浓度较高，杂菌难以生存，D正确。故选B。2.制作泡菜的过程中，会有亚硝酸盐产生（与杂菌有关），人体摄入过多亚硝酸盐，会发生中毒，甚至死亡。某兴趣小组探究泡菜制作过程中不同浓度的食盐对亚硝酸盐产生的影响，结果如图。下列相关叙述错误的是（）A.发酵早期，5％NaCl组内产生亚硝酸盐的微生物活性较强B.发酵中期，发酵液pH降低，抑制了其它微生物的生长C.该实验的无关变量有发酵温度、腌制方法和时间长短等D.制作过程中检测亚硝酸盐含量，为最佳取食时间提供依据〖答案〗C〖祥解〗泡菜制作的原理是乳酸菌发酵。由于在泡菜制作过程中，微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐含量会逐渐升高，发酵后期亚硝酸盐又会被某些微生物氧化成硝酸盐，亚硝酸盐含量又会逐渐下降，因此在泡菜制作过程中要检测亚硝酸盐的含量，确定合适的取食时间。【详析】A、发酵早期，5％NaCl组内的食盐添加量低，对产生亚硝酸盐的微生物的抑制作用最弱，即这些微生物的活性较强，A正确；B、发酵中期因为缺氧和酸性环境抑制杂菌生长，使亚硝酸盐的产生量降低，同时产生的亚硝酸盐会被分解，最终导致亚硝酸盐含量下降，B正确；C、该实验的无关变量有发酵温度、腌制方法，但时间长短为自变量，C错误；D、亚硝酸盐含量最低时，为取食的最佳时间，制作过程中检测亚硝酸盐含量，为最佳取食时间提供依据，D正确。故选C。3.在实验室进行微生物的培养过程中，无菌技术发挥了重要的作用。下列关于无菌技术的说法，正确的是（）A.配制培养基、倒平板、接种都需要在酒精灯火焰旁进行B.配制好选择培养基后将其分装到培养皿中，再进行湿热灭菌C.煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物细胞和所有芽孢、孢子D.紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可加强对超净工作台的消毒效果〖答案〗D〖祥解〗微生物实验室的培养的关键是无菌操作，无菌操作主要包括：①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。【详析】A、在酒精灯火焰附近进行接种或倒平板，目的是造成一个无菌环境，避免操作过程中受到杂菌的污染，倒平板、接种都需要在酒精灯火焰旁进行，而配制培养基无需，因为配制完成之后还需要利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌，A错误；B、配制好选择培养基后先进行湿热灭菌，再将其分装到培养皿中，B错误；C、煮沸消毒法中100℃煮沸5-6分钟可以杀死微生物的营养细胞和一部分芽孢、孢子，C错误；D、可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，紫外线照射前，适量喷洒石炭酸等消毒液，可加强对超净工作台的消毒效果，D正确。故选D。4.水污染是全球性的环境问题，微生物降解是水污染治理的有效手段之一。聚乙烯醇（PVA）是存在于化工污水中的一种难以降解的大分子有机物，PVA分解菌能分解PVA，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解后蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑。下列相关叙述错误的是（）A.鉴别PVA分解菌的培养基中只需加入唯一碳源PVA、碘液、其他各种营养物质即可B.实验中还应设置加入完全培养液的对照组，对照组的菌落数明显多于选择培养基C.要测定PVA分解菌的数目，可在显微镜下用细菌计数板直接计数D.对PVA分解菌计数时，应选择菌落数为30―300的平板〖答案〗A〖祥解〗虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐。另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性，培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。【详析】A、根据题干信息可知，PVA与碘作用时能产生蓝绿色复合物，当PVA被分解后蓝绿色复合物消失，形成白色透明斑，所以鉴别PVA分解菌的培养基中除需加入唯一碳源PVA、碘液和其他各种营养物质外，还需加入琼脂，A错误；B、实验中还应设置加入完全培养液的对照组，对照组没有淘汰不能分解聚乙烯醇（PVA）的细菌，菌落数明显多于选择培养基，从而说明选择培养基具有筛选作用，B正确；C、要测定土壤稀释液中微生物的数目，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，C正确；D、若平板上菌落数过多，说明稀释度过低，菌体的密度大，就会出现更多的两个或两个以上的菌体形成的菌落，结果不准确，且计数较困难。若平板上菌落数过少，菌落形成的偶然性大，结果也不准确，因此对PVA分解菌计数时，应选择菌落数为30—300的平板，D正确。故选A。5.由于发酵工程生产条件温和、原料来源丰富、价格低廉等，在食品工业、医药工业、农牧业等许多领域得到了广泛的应用，下列有关发酵工程的描述，正确的是（）A.分离、提纯获得微生物细胞本身或其代谢产物是发酵工程的中心环节B.啤酒的工业化生产中，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成C.将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵，可生产乙型肝炎疫苗D.可通过发酵工程从微生物细胞中提取单细胞蛋白，制成微生物饲料〖答案〗C〖祥解〗啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和代谢物的生成在主发酵完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能获得澄清、成熟的啤酒。【详析】A、发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、火菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面，发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，A错误；B、啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中酵母菌的繁殖大部分糖的分解和代谢物的生成在主发酵完成，B错误；C、乙肝疫苗的主要成分是乙肝病毒表面的抗原蛋白，将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，可生产乙型肝炎疫苗，C正确；D、用单细胞蛋白制成的微生物饲料，其中的单细胞蛋白是微生物菌体，并不是通过发酵工程从微生物细胞中提取获得，D错误。故选C。6.下列有关植物细胞工程技术及应用的叙述，正确的是（）A.植物组织培养时，诱导愈伤组织期间一般需要光照B.利用植物组织培养技术培育脱毒苗，获得抗病毒的新物种C.利用植物组织培养技术产生突变体，不需筛选即可获得具有优良性状新品种D.利用植物细胞培养技术获得紫草宁，实现了细胞产物的工厂化生产〖答案〗D〖祥解〗植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。【详析】A、植物组织培养时，诱导愈伤组织期间不需要光照，A错误；B、利用组织培养技术获得脱毒苗可以获得不含病毒的新植株，但单纯的植物组织培养属于克隆不能获得新性状；抗病毒新品种的产生需要通过变异获得，B错误；C、植物组织培养结合人工诱变容易获得变异个体，但变异具有不定向性，所以突变体需要经过筛选才能培育出具有优良性状的新品种，C错误；D、紫草宁使是紫草细胞中的一种药物和色素，可利用植物细胞培养技术获得紫草宁，实现细胞产物的工厂化生产，D正确。故选D。7.科学家将番茄（二倍体）和马铃薯（二倍体）细胞利用图示技术获得了“番茄—马铃薯”植株。下列有关叙述错误的是（）A.番茄—马铃薯杂种植株相对于番茄和马铃薯而言发生了染色体数目变异，理论上不可育B.④过程为脱分化，过程中杂种细胞失去了其特有的结构和功能C.过程④⑤需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等D.f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同〖答案〗A〖祥解〗植物体细胞杂交过程：先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，借助物理或化学方法诱导原生质体融合，得到的杂种细胞再经过诱导形成愈伤组织，并进一步发育成完整植株。【详析】A、番茄—马铃薯杂种植株相对于番茄和马铃薯而言发生了染色体数目变异，两者均为二倍体，杂种植株在减数分裂时能正常联会，因此理论上可育，A错误；B、④过程为脱分化，过程中杂种细胞失去了其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞，B正确；C、过程④为脱分化，过程⑤为再分化，需提供无机营养成分、有机营养成分和植物激素等给细胞进行分裂分化，C正确；D、生长素用于诱导根的分化，细胞分裂素促进从愈伤组织中分化出不定芽，通过调整植物激素的比例可以诱导脱分化和再分化，因此f培养基中生长素与细胞分裂素的配比与e培养基中的不同，D正确。故选A。8.如图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，已知肾脏上皮细胞属于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞，下列叙述错误的是（）A.甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理B.丙过程会出现细胞贴壁和接触抑制现象C.细胞培养丙、丁都要在无菌无毒的环境下进行D.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中传代培养〖答案〗D〖祥解〗原代培养：将动物机体的各种组织从机体中取出,经各种酶(常用胰蛋白酶)、化学试剂或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养；传代培养：细胞在培养瓶长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代，即将分瓶之后的培养称为传代培养。【详析】A、甲→乙过程表示将组织块分散成单个细胞，需要用用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，A正确；B、丙过程表示原代培养，对于需要贴附于某些基质表面才能生长增殖的细胞而言，在培养过程中会出现细胞贴壁和接触抑制现象，B正确；C、细胞培养丙（原代培养）、丁（传代培养）均需要营造无菌、无毒的培养环境，C正确；D、丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养，丁才是分瓶之后的传代培养，D错误。故选D。9.如下图为诱导多能干细胞（iPS细胞）用于治疗糖尿病的示意图，下列相关叙述错误的是（）A.干细胞存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等B.iPS细胞分化成胰岛细胞的过程中，遗传物质和蛋白质种类都发生了变化C.除图中的成纤维细胞，已分化的T细胞和B细胞等也能被诱导为iPS细胞D.将分化得到的胰岛细胞移植回病人体内治疗，理论上可避免免疫排斥反应〖答案〗B〖祥解〗动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，干细胞存在于早期胚胎、骨髓和脐带血等多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等。【详析】A、动物和人体内少数具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞，存在于多种组织和器官中，包括胚胎干细胞和成体干细胞等，A正确；B、诱导iPS细胞分化的实质是基因选择性表达的结果，遗传物质没有变化，B错误；C、iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞和B细胞等均能被诱导为iPS细胞，C正确；D、用患者自己的体细胞通过体外诱导成胰岛细胞，并将胰岛细胞细胞移植回病人体内，由于移植的细胞是由病人自身细胞得到的，理论上可以避免免疫排斥反应，D正确。故选B。10.下列关于动物核移植技术的叙述错误的是（）A.动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植B.去核其实去除的是细胞中的纺锤体—染色体复合物C.核移植时，提供细胞核和去核卵母细胞的动物都应为雌性D.需用物理或化学方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程〖答案〗C〖祥解〗1、动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。2、利用核移植技术克隆动物时，其基本操作为获取去核卵细胞、构建重构胚、激活重构胚、胚胎移植、获得克隆个体。【详析】A、哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，由于胚胎细胞的全能性高于体细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植，A正确；B、减数分裂II中期（MII期）卵母细胞中的“核”其实是纺锤体一染色体复合物。因此所说的“去核”是去除该复合物，B正确；C、核移植时，提供细胞核的一方可以是雄性或雌性，C错误；D、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇和蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D正确。故选C。11.下列有关哺乳动物受精和早期胚胎发育的叙述正确的是（）A.在自然条件下，受精在子宫中完成B.精子需要获能才能与卵子结合，而卵子一经排出就具备受精能力C.胚胎发育的早期有一段时间是在透明带内进行的D.精子入卵后，卵细胞膜外的透明带迅速发生生理反应，阻止后来的精子进入透明带〖答案〗C〖祥解〗受精是精子与卵子结合形成合子（即受精卵）的过程，包括受精前的准备阶段和受精阶段。在自然条件下，哺乳动物的受精在输卵管内完成。【详析】A、在自然情况下，受精是在雌性的输卵管内完成的，A错误；B、精子需要获能才能与卵子结合，而卵子只有发育到MII中期才具备与精子受精的能力，B错误；C、胚胎发育早期，有一段时间是在透明带内进行分裂，细胞的数量不断增加，胚胎的总体积并不增加，C正确；D、精子入卵后，卵细胞膜会发生卵细胞膜反应阻止其它精子的进入，D错误。故选C12.下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（）A.进行胚胎移植时，需要对供体和受体进行免疫检查B.进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力C.在进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚D.在实际胚胎工程操作时，常以观察到两个极体或雌、雄原核作为受精的标志〖答案〗A〖祥解〗胚胎移植的基本程序主要包括：①对供、受体的选择和处理（选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体。用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理）；②配种或人工授精；③对胚胎的收集、检查、培养或保存（对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹胚或囊胚阶段）；④对胚胎进行移植；⑤移植后的检查。【详析】A、受体对移入子宫的外来胚胎不发生免疫排斥反应，因此胚胎移植时不需要对供体和受体进行免疫检查，A错误B、进行胚胎移植的优势是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，B正确；C、在进行胚胎分割时，应选择发育良好形态正常的桑椹胚或囊胚，在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，C正确；D、多数哺乳动物的第一极体不进行减数第二次分裂，因而不会形成两个第二极体。在实际胚胎工程操作中，常以观察到两个极体或者雄、雄原核作为受精的标志，D正确。故选A。13.下列关于DNA的提取和DNA片段的扩增及电泳鉴定的叙述，正确的是（）A.利用DNA和蛋白质在冷酒精中溶解性的差异可以初步分离DNA与蛋白质B.在提取白色丝状物时双向搅拌比单向搅拌更有利于获得结构完整的DNAC.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水和移液器等在使用前都必须进行高压蒸汽灭菌处理D.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相同的电极移动的原理〖答案〗A〖祥解〗电泳法：利用分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速率，从而实现样品中各种分子的分离。原理：在一定的pH下，多肽、核酸等生物大分子的可解离基团会带上正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。【详析】A、DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精，可利用这个特性将DNA与蛋白质分离，A正确；B、在提取白色丝状物时用玻璃棒轻轻单向搅拌更有利于获得结构完整的DNA，B错误；C、PCR实验中使用的微量离心管、枪头、蒸馏水在使用前都必须进行高压蒸汽灭菌处理，移液器不需要进行高压蒸汽灭菌处理，C错误；D、电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，D错误。故选A。14.下图为利用大肠杆菌重组表达系统生产HPV疫苗的过程，质粒中lacZ基因可使细菌利用培养基中的物质X-gal，从而使菌落呈蓝色，若无该基因，则菌落呈白色。下列有关叙述错误的是（）A.为了使重组质粒中目的基因正常表达，还需要插入启动子和终止子B.作为受体的大肠杆菌不应含氨苄青霉素抗性基因，以便于筛选C.筛选含重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入X-gal和青霉素D.在选择培养基上筛选出含重组质粒的大肠杆菌，应挑选蓝色菌落〖答案〗D〖祥解〗基因工程基本操作顺序：目的基因获取、表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。过程①是基因表达载体构建，过程②是目的基因导入受体细胞。【详析】A、基因表达载体必须含有目的基因、标记基因外，启动子、终止子等元件。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终表达出人类需要的蛋白质，因此为了使重组质粒中目的基因正常表达，还需要插入启动子和终止子，A正确；B、作为受体的大肠杆菌不应含氨苄青霉素抗性基因，质粒上的氨苄青霉素抗性基为标记基因，含重组质粒的大肠杆菌才可以在含青霉素得培养基上生存，没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不含青霉素抗性基因，不能在含青霉素得培养基上生存，进而筛选出含重组质粒的大肠杆菌，B正确；C、筛选含重组质粒的大肠杆菌，应在培养基中加入X-gal和青霉素，质粒中lacZ基因可使细菌利用培养基中的物质X-gal，从而使菌落呈蓝色，若无该基因，则菌落呈白色，由题意可知，需将目的基因插到lacZ基因的内部，导致lacZ基因被破坏，因此含重组质粒的大肠杆菌菌落显白色；若大肠杆菌菌落显蓝色，说明导入的是不含目的基因的空白质粒；没有导入任何外源DNA的大肠杆菌不含青霉素抗性基因，不能在该培养基上生存，进而筛选出含重组质粒的大肠杆菌，C正确；D、由题意可知，需将目的基因插到lacZ基因的内部，导致lacZ基因被破坏，因此含重组质粒的大肠杆菌菌落显白色，故应挑选自色菌落，D错误。故选D。15.葡萄糖异构酶在工业上应用广泛，为提高葡萄糖异构酶的热稳定性，科学家拟利用蛋白质工程技术对其进行改造。下列相关叙述错误的是（）A.利用蛋白质工程技术改造葡萄糖异构酶的过程遵循中心法则B.需要根据预期的蛋白质功能，设计蛋白质的空间结构和氨基酸序列C.蛋白质工程和基因工程的根本区别是操作对象的差异D.对葡萄糖异构酶的改造需通过改造或合成相应的基因来完成〖答案〗C〖祥解〗蛋白质工程的目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求，对蛋白质的结构进行设计改造。由于基因决定蛋白质，因此要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造或合成基因来完成。天然蛋白质合成的过程是按照中心法则进行的：基因→表达(转录和翻译)→形成具有特定氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能。而蛋白质工程却与之相反，它的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。【详析】A、蛋白质工程的基本思路是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。利用蛋白质工程技术改造葡萄糖异构酶的过程遵循中心法则，A正确；B、需要根据预期的蛋白质功能，设计蛋白质的氨基酸序列和空间结构，B正确；C、科学家改造葡萄糖异构酶的过程必须通过改造或合成基因来完成，操作对象没有差异，C错误；D、对葡萄糖异构酶的改造需通过改造或合成相应的基因来完成，D正确。故选C。二、不定项选择题16.圆褐固氮菌可独立固定空气中的氮气，且能够分泌生长素。巨大芽孢杆菌可将有机磷降解为可溶性磷。二者组合可将有机厨余垃圾迅速分解为水和二氧化碳。为制备分解有机厨余垃圾的微生物菌剂，某科研小组对两菌种进行了最佳接种量比例的探究实验，得出如图实验结果。下列说法错误的是（）A.圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌在生长过程中都需要培养基中的氮源B.实验统计的菌落数往往比活菌的实际数目多C.本实验中处理该厨余垃圾废液，两菌种的最佳接种量比例为1：1D.两菌种的组合菌剂还可制成微生物肥料施用到土壤中，提高农作物的产量〖答案〗AB〖祥解〗该题目中自变量是圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌的最佳接种比例；因变量是有机垃圾的分解量（以二者的有效菌落数为指标），对照组是只接种一种菌，实验组是两种菌的接种比例。【详析】A、虽然培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，圆褐固氮菌的氮源来自于空气中的氮气，巨大芽孢杆菌的氮源来自于培养基，A错误；B、在活菌计数法中，由于两个或多个细菌聚集在一起时长成的是一个菌落，因此统计的菌落数往往比活菌的实际数目少，B错误；C、实验的因变量是有机垃圾的分解量（以二者的有效菌落数为指标），接种量比例为2:1的有效菌落数小于接种量为1:1的有效菌落数，故接种量比例1:1时分解有机厨余垃圾的能力强，C正确；D、植物在生长的过程中要吸收一定量的含N、P的无机盐和二氧化碳等营养物质，圆褐同氮菌可独立固定空气中的氮气，且能够分泌生长素。巨大芽孢杆菌可将有机磷降解为可溶性磷，二者能为植物提供含N、P的无机盐和二氧化碳等营养物质，故两菌种的组合菌剂还可制成微生物肥料施用到土壤中，提高农作物的产量，D正确。故选择AB。17.紫罗兰和油菜均为二倍体植物，紫罗兰具有改变油菜花色，提高油菜抗虫性，改善油菜品质等优良基因资源。实验小组利用紫罗兰和油菜通过体细胞杂交技术培育新品种，下图表示不同浓度的PEG作用下原生质体两两融合和多（三个或三个以上）原生质体融合的比率。下列说法中正确的是（）A.原生质体的融合依赖于细胞膜的流动性B.图中诱导原生质体两两融合的最佳PEG浓度为40％左右C.两两融合的细胞有三种类型，均含有四个染色体组D.最终得到的杂种植株一定具有上述两种植物的特性〖答案〗ABC〖祥解〗植物体细胞杂交过程：先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，借助物理或化学方法诱导原生质体融合，得到的杂种细胞再经过诱导形成愈伤组织，并进一步发育成完整植株。【详析】A、原生质体的融合涉及膜融合过程，依赖于细胞膜的流动性，A正确；B、图中在20%-40%浓度的PEG之间，融合率逐渐提高，超过40%，融合率逐渐下降，因此最佳PEG浓度在40％左右，B正确；C、两两融合的细胞有紫罗兰-紫罗兰、油菜-油菜、油菜-紫罗兰共三种类型，因为紫罗兰和油菜均为二倍体植物，所以两两融合的细胞均含有四个染色体组，C正确；D、最终得到的杂种植株基因不一定表达，因此不一定具有上述两种植物的特性，D错误。故选ABC。18.一种杂交瘤细胞只能产生一种抗体，抗体由两条相同的重链和两条相同的轻链构成。科研人员通过动物细胞融合技术将两种不同的杂交瘤细胞（A和B）融合形成双杂交瘤细胞AB，双杂交瘤细胞能够悬浮在液体培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB如图所示。下列相关说法正确的是（）A.将杂交瘤细胞A、B混合并诱导融合后，利用选择培养基筛选出双杂交瘤细胞ABB.双杂交瘤细胞无需识别α、β抗原，就能产生双特异性抗体C.对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，无需使用胰蛋白酶处理D.双杂交瘤细胞产生的抗体可与α、β两种抗原同时结合，说明该抗体不具备特异性〖答案〗BC〖祥解〗据题意分析：抗原α、β分别注射到小鼠体内，小鼠分别产生的α、β的两种单克隆抗体；双杂交瘤细胞产生的双特异性抗体。【详析】A、单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第一次利用选择培养基筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞本身就是由两个杂交瘤细胞融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB，A错误；B、杂交瘤细胞是由以免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生抗体，B正确；C、杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C正确；D、双杂交瘤细胞产生的抗体可与α、β两种抗原同时结合，但不能与其他抗原结合，因此该抗体仍具备特异性，D错误。故选BC。19.甲型流感病毒的抗原性与感染性与其表面的R蛋白（血凝素蛋白）密切相关，现利用基因工程的方法生产相关疫苗。图甲为构建R蛋白基因表达载体的过程，图乙为重组质粒被相关酶切后的电泳结果。下列相关叙述错误的是（）A.电泳技术可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定B.图甲过程中至少需要应用到逆转录酶、限制酶、DNA连接酶C.通过PCR技术从1个cDNA分子中特异性扩增出R蛋白基因时，在第四轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的R蛋白基因D.构建好的重组质粒长度共2000bp，据图乙可推测BamHⅠ在重组质粒上有3个酶切位点〖答案〗C〖祥解〗1、图甲中①是逆转录过程，②是经过复制形成双链cDNA，③是将R蛋白基因和质粒结合形成基因表达载体，图乙是用限制酶切割后形成的电泳图。2、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3＇端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5＇端自3端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3＇端延伸DNA链。3、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。【详析】A、不同生物的DNA切割后长度不同，切割后再进行电泳，可以用于人类亲子鉴定、生物间亲缘关系的鉴定，A正确；B、图甲获得重组质粒过程，需要逆转录、形成双链cDNA分子以及R蛋白基因与质粒的重组，所以至少需要应用到逆转录酶、DNA聚合酶、限制酶、DNA连接酶，B正确；C、通过PCR技术将cDNA分子扩增成双链DNA后，若要从中特异性扩增出完整的R蛋白基因，循环3次可获得2个不含黏性未端的R蛋白基因，循环4次可获得8个不含黏性未端的R蛋白基因，循环5次可获得22个不含黏性末端的R蛋白基因，C错误；D、用HindIII将质粒2000bp切割后形成了200bp、400bp和1400bp共3个片段，说明HindIII在重组质粒上有2个酶切位点，而用HindIII和BamHl将质粒切割后形成了200bp、420bp、560bp的片段，2000=420×2+560+200×3，所以一共形成了6个片段，因此共有5个酶切位点，因此BamHI在重组质粒上有5-2=3个酶切位点，D正确。故选C。20.利用重叠延伸PCR技术进行定点突变可以实现对纤维素酶基因进行合理性改造，其过程如下图所示。下列分析正确的是（）A.PCR1过程中的产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结果B.引物c和引物b上均含有与模板链不能互补的碱基C.①过程需要先加热至90℃以上后再冷却至50℃左右D.②过程需要利用引物a和引物d获得突变产物AD〖答案〗ABC〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4中游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端向3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。【详析】A、PCR技术中DNA单链延伸的方向是沿着引物的5'端向3'端延伸的，据此可分析，PCR1过程中的产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结果，A正确；B、根据突变位点的产生可推知，引物c和引物b上均含有与模板链不能互补的碱基，B正确；C、①过程是双螺旋解开的过程，即氢键断裂可通过先加热至90～95℃完成，而后再冷却至55～60℃使氢键形成，为子链的延伸做准备，C正确；D、②过程为子链延伸的过程，该过程需要利用AB上链和CD下链之间的互补配对实现子链的延伸过程，D错误。故选ABC。三、非选择题21.中央电视台《舌尖上的中国》栏目介绍了我国各地的美食，其中利用发酵技术制作的各类特色食品，如果醋、腐乳、泡菜等，很好地展现了广大人民群众的智慧。请回答下列问题：（1）“天地一号”苹果醋是我国著名的果醋。工业上酿制苹果醋通常有两条途径，一条途径是向捣碎的苹果汁中直接接种___________（微生物名称），经过一次发酵制成，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入___________；另一条途径需先接种___________（填微生物名称）制得___________后再向其中接种相应菌，进一步获得果醋。（2）“王致和”腐乳是我国的著名品牌，腐乳制作有多种微生物参与，其中起主要作用的是________，在发酵过程中，豆腐中的营养物质如蛋白质会被分解成____________。（3）在我国的泡菜品种中，东北酸菜和四川泡菜都非常有名，它们的制作过程基本类似，都是利用________（微生物名称）发酵在制作泡菜过程中，向泡菜坛中注入盐水前，煮沸所用盐水的目的是___________。在泡菜坛盖边沿的水槽中注满水的作用是___________。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量的陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是________________。〖答案〗（1）①.醋酸菌②.无菌空气③.酵母菌④.苹果酒（2）①.毛霉②.小分子肽和氨基酸（3）①.乳酸菌②.杀灭杂菌③.保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境④.增加乳酸菌数量〖祥解〗1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。3、腐乳的制作原理：参与豆腐发酵的微生物有青霉、曲霉、毛霉等多种，其中起主要作用的是毛霉，其代谢类型为异养需氧型，适宜温度为15℃～18℃；毛霉能够产生蛋白酶和脂肪酶，将蛋白质和脂肪分别水解成小分子的肽和氨基酸、甘油和脂肪酸。4、泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【小问1详析】工业上酿制苹果醋通常有两条途径，一条途径是向捣碎的苹果汁中直接接种醋酸菌，即当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸，经过一次发酵制成，醋酸菌是好氧菌，在发酵过程中需要经常向发酵液中通入无菌空气；另一条途径需先接种酵母菌制得苹果酒后再向其中接种相应菌进一步获得果醋，即当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【小问2详析】在腐乳发酵过程中，起主要作用的是毛霉，毛霉能够分泌蛋白酶和脂肪酶，将豆腐中的营养物质如蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪分解为甘油和脂肪酸，所以腐乳的口感十分细腻。【小问3详析】泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。向泡菜坛中注入盐水前，盐水需煮沸这是因为加热煮沸是为了杀灭杂菌。乳酸菌发酵需要无氧条件，在泡菜坛盖边沿的水槽中注满水的作用是保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量的陈泡菜液，陈泡菜液中含有乳酸菌，故加入陈泡菜液的目的是增加乳酸菌数量。22.氮素污染物是造成水体污染和富营养化的主要原因之一，水体中氮素的去除对清洁水体有重要意义、异养硝化细菌能降解硝酸铵产生氨，科研工作者从污水中筛选出异养硝化细菌ZW2和ZW5菌株，并研究其去氮能力。回答下列问题：（1）进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用______法或______法进行接种。初步筛选时，样品中含有多种微生物，培养后，一般依据______来区分不同的微生物。（2）从污水中分离ZW2和ZW5菌株时，培养基中需要加入硝酸铵等营养物质、琼脂和酚红指示剂。培养后，这两种细菌都能生长并形成菌落，结果如图所示。______（填“ZW2”或“ZW5”）菌株的去氮能力更强，判断依据是______。（3）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为106的样品液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为168、171、165、178和168。则每毫升样品中的细菌数量______个、与此方法相比，用血细胞计数板计数法统计得到的细菌数量______。（4）上图培养基从物理性质分应属于______，接种用到的工具是______。〖答案〗（1）①.稀释涂布平板②.平板划线③.菌落特征（或菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等）（2）①.ZW5②.ZW5菌落周围的红色圈面积大，其降解硝酸铵产生氨的能力更强（3）①.1.7×109②.多（4）①.固体培养基②.涂布器〖祥解〗分离微生物常用的方法：1、平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。2、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。稀释涂布平板法还可以用于对微生物进行计数。【小问1详析】进行ZW2和ZW5菌株初步筛选时，通常采用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征。故初步筛选时，可根据菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面的菌落特征区别不同微生物。【小问2详析】由图分析可知，ZW5菌落周围的红色圈面积大，说明其降解硝酸较产生氨的能力更强，故如果要得到目标菌，应该选择ZW5。【小问3详析】结合题干实验过程可知，该过程采取了稀释涂布平板法，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30-300的平板进行计数。在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为106的溶液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为168、171、165、178和168，菌落平均数=(168+171+165+178+168)÷5=170，所以每克土样品中的细菌数量=170÷0.1×106=1.7×109个。若要测定培养液中选定菌种的数量，也可以在显微镜下用血细胞计数板直接计数，包括培养液中的死亡的细胞，所以统计得到的细菌数量多。【小问4详析】上图是稀释涂布平板法得到的菌落，培养基从物理性质分应属于固体培养基，接种用到的工具是涂布器。23.请回答细胞工程的有关问题：I．紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀病。百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀。为培育抗鼓胀病的新型牧草，科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如下图：（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能）（1）在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5—0.6mol/L的甘露醇溶液中，使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态，从而有利于用________________去除细胞壁。两种细胞融合成功的标志是________________。（2）①过程可使用物理方法有__________法（答出一种即可）诱导细胞融合，步骤②为_________。经过步骤②、③到形成再生植株，体现的主要原理是___________。（3）利用图示技术进行育种的优点是___________________。II．为降低人乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如图所示。（4）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自____________。（5）用选择性培养基对步骤②的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行___________培养。杂交瘤细胞的特点是____________，杂交瘤细胞可采用注射到小鼠_________内增殖或进行体外培养的方式进行扩大培养。（6）步骤④是将获得的a____________和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC。〖答案〗（1）①.纤维素酶、果胶酶②.形成新的细胞壁（2）①.离心、振动、电激等②.脱分化③.植物细胞的全能性（3）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种（4）人的乳腺癌细胞（5）①.克隆化②.既能大量增殖，又能产生特定抗体③.腹腔（6）单克隆抗体〖祥解〗分析I题图：图中①表示原生质体融合形成杂种细胞以及杂种细胞的增殖，②表示脱分化过程，③表示再分化过程。分析II图形：①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测，④表示将单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物结合形成ADC。【小问1详析】由图可知，本研究主要利用植物体细胞杂交技术；图中要获得原生质体需要去除细胞壁，由于植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此根据酶的专一性原理，应该用纤维素酶和果胶酶处理原材料。植物细胞融合成功的标志是形成新的细胞壁。【小问2详析】细胞融合难以自发进行，需用物理或化学方法诱导融合．常用的物理方法有显微操作、电激、离心、振动等，化学方法常用聚乙二醇（PEG）作为促融剂。图中②杂种细胞团脱分化形成愈伤组织，③过程愈伤组织经过再分化形成再生植株，这一过程的主要原理是植物细胞的全能性。【小问3详析】不同物种之间存在生殖隔离，不能通过有性杂交获得可育后代，植物体细胞杂交可打破生殖隔离，实现远远缘杂交育种，培育种间甚至属间杂种。【小问4详析】结合题干“为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上”可知该抗体能特异性识别乳腺癌细胞，故本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自人的乳腺癌细胞。【小问5详析】步骤②的细胞为多种杂交瘤细胞，要想获得分泌所需抗体的癌细胞还需要步骤③克隆化培养和抗体检测，才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是既能大量增殖，又能产生特定抗体；杂交瘤细胞可采用注射到小鼠腹腔内培养或进行体外培养的方式进行扩大培养。【小问6详析】题图中的a物质呈“Y”形，故a为单克隆抗体，和b治疗乳腺癌的药物这2部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC，能准确地释放药物作用于靶细胞，对人体正常组织毒副作用小。24.在体细胞克隆猴的培育过程中，我国科学家经过多年的反复试验，可以在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞里。有评论者认为：该研究的研究者利用“聪明的化学方法和操作技巧”，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍。培育克隆猴的流程如下图所示，请结合图回答问题。（1）采集卵子之前，需给母猴注射适量的_________________，以增加排卵。卵母细胞需培养到_________时期，再通过普遍使用的________________法去除细胞核，得到去核卵母细胞。在体细胞培养的过程中需要创造的气体环境是_______________。（2）图1中灭活的仙台病毒所起的作用是_____________。（3）胚胎移植前，需要对代孕母猴进行____________处理，为即将移入的胚胎提供合适的生理环境。胚胎移植技术的实质是早期胚胎在______________条件下空间位置的转移。胚胎分割可以增加胚胎数量，在对囊胚进行分割时要注意_____________。（4）研究人员在确定去甲基化酶（Kd4d）的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培养液培养融合细胞，B组用正常培养液培养注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验结果如图2所示。分析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是_______________。〖答案〗（1）①.促性腺激素②.MⅡ③.显微操作④.95％空气＋5％CO2（2）诱导细胞融合（3）①.同期发情②.相同生理环境③.将内细胞团均等分割（4）注入mRNA通过翻译产生的去甲基化酶促进了相关基因的表达进而表现出既能提高融合细胞发育成囊胚的成功率，也能提高囊胚中内细胞团的形成率〖祥解〗动物体细胞核移植是指用体细胞作为供体细胞进行的细胞核移植，将供体核细胞注射到培养到减数第二次分裂时期的卵母细胞，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎移植到雌性动物子宫内，孕育出新个体。动物细胞培养条件：（1）无菌无毒环境：无菌--对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素；无毒--定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。（2）营养：成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。（3）温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。（4）气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。【小问1详析】促性腺激素能够促进性腺的发育，使得性腺分泌更多的性激素有利于生殖细胞的形成，故采集卵子之前，需给母猴注射适量的促性腺激素，使其超数排卵，以增加排卵；卵母细胞需培养到减数第二次分裂（MⅡ）时期，再通过普遍使用的显微操作法去除细胞核，得到去核卵母细胞；在体细胞培养的过程中需要创造的气体环境是95％空气（能提供氧气，是细胞正常代谢所需）＋5％CO2（维持培养液的PH）。【小问2详析】灭活的病毒是诱导动物细胞融合特有的方法，故图1中灭活的仙台病毒所起的作用是诱导动物细胞融合。【小问3详析】胚胎移植前，需要对代孕母猴进行同期发情处理（给受体和供体注射相同的激素，使得二者处于相同