普通植物病理学实验教学大纲

普通植物病理学实验教学大纲（植物保护专业四年制本科）一、目的和任务本课程是“普通植物病理学”的实践教学内容，主要目的是进一步巩固和掌握“普通植物病理学”的理论基础，为“农业植物病理学”等专业课的学习，以及今后从事植物病理学相关的科研和解决生产中实际问题等工作奠定基础。主要任务是掌握植物病害症状、病原形态特征和植物病理学研究的基本技术，提高学生分析问题和解决问题的能力。二、教学基本要求学生学完本课程后，应达到如下要求：1、掌握典型病害的症状类型。2、掌握各类植物病原的特征。3、了解植物病毒所致病害症状特点。4、了解病原线虫所致病害特点及分离方法。5、掌握病原细菌所致病害特点及诊断方法。6、掌握种子带菌检验的方法。7、掌握病原菌的分离培养、观察及接种方法。三、实验的类别、类型及学时序号实验名称实验类别实验类型实验学时实验要求1植物病害症状观察与描述专业基础演示与操作2必修2植物病原菌物一般形态观察专业基础演示与操作2必修3黏菌门、根肿菌门、壶菌门、接合菌门菌物专业基础演示与操作2必修4卵菌门菌物专业基础演示与操作2必修5子囊菌门菌物（1）专业基础演示与操作2必修6子囊菌门菌物（2）专业基础演示与操作2必修7担子菌门菌物专业基础演示与操作2必修8半知菌类菌物（1）专业基础演示与操作2必修9半知菌类菌物（2）专业基础演示与操作2必修10植物病原原核生物病害的症状及病原细菌形态观察专业基础演示与操作2必修11植物线虫的采集、分离及形态观察专业基础演示与操作2必修12植物病毒病害的症状特点及病毒传毒专业基础演示与操作2必修13种子带菌检验专业基础演示与操作2必修14田间病害调查专业基础调查2必修15植物病原菌物的分离与培养专业基础综合4必修合

计

32

四、实验内容与教学要求实验一

植物病害症状观察与描述一、实验目的认识各类病害对植物造成的为害，了解植物病害的种类及其多样性，初步掌握主要病害的症状表现及其特点，学会植物病害症状的描述,为今后病害的诊断奠定基础。二、实验内容观察植物感病后所表现的主要病状和病征类型。学习用文字描述各种症状特征。三、实验仪器与材料按照植物病害的病状类型（变色、坏死、萎蔫、腐烂和畸形）和病征类型（粉状物、霉状物、点状物、菌核和菌脓等）准备盒装标本、瓶装浸渍标本及新鲜标本。四、实验的要点与教学建议掌握植物病害的五大类病状（变色、坏死、畸形、萎蔫、腐烂）；了解常见的病征类型（霉层、白粉、白锈、锈、黑粉、颗粒状物、菌核、菌脓等）。实验二

植物病原菌物一般形态观察一、实验目的通过观察，认识病原菌物的营养体及其变态，认识菌物的子实体、有性繁殖、无性繁殖产生的各种类型孢子。二、实验内容观察菌物的菌丝体形态，有隔菌丝和无隔菌丝，菌丝的变态（包括吸器、附着胞、假根、附着枝、菌网及菌环等）营养体的变态（包括菌核、子座和菌索等）。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：拨针、刀片、木板、酒精灯、火柴、裁玻片、盖玻片、纱布、乳酚油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。（二）实验材料瓜果腐霉病菌(Pytiumaphanidermatum)、立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、镰刀菌(Fusarium)、小麦白粉病菌(Blumeriagraminis)、大白菜霜霉病菌(Peronosporaparasitica)、甘薯软腐病菌(Rhizopusstolonifer)、小核菌属(Sclerotium)、苹果或甘薯紫纹羽病菌、麦角病菌(Clavicepspurpurea)、疫霉菌(Phythophtora

spp.)、根霉菌(Rhizopus

spp.)、毛霉菌(Mucor

spp.)、犁头霉菌(Absidia

spp.)、玉米小斑病(Bipolarismaydis)、小麦白粉病(Oidiummonilioides)、马铃薯早疫病(Alternariasolani)、棉花枯萎病菌(Fusariumoxysporium)、桃缩叶病菌(Taphrinadeformans)、小麦赤霉病菌(Giberellazeae)、小麦腥黑穗病菌(Tilletiacaries)等病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。四、实验的要点与教学建议通过观察玻片或自制玻片，掌握菌物的菌丝体及其变态和菌组织，认识菌物无性繁殖和有性生殖产生的各种类型的孢子，并初步掌握绘制病原菌草图技术。实验三

黏菌门、根肿菌门、壶菌门、接合菌门菌物一、实验目的了解黏菌门、根肿菌门、壶菌门和接合菌门菌物主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点。同时，学习使用检索表来鉴定病菌，为分类鉴定打下初步基础。二、实验内容观察黏菌门、根肿菌门、壶菌门和接合菌门的植物病原菌物的形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料草莓黏菌（Diermahemisphaerieum）、芸薹根肿菌(Plasmodiophorabrassicae)、马铃薯粉痂菌（Spongosporasubterranea）、禾谷多黏霉（Polymyxagraminis）玉蜀黍节壶菌(Physodermamaydis)等病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。四、实验的要点与教学建议掌握黏菌门、根肿菌门、壶菌门和接合菌门中重要属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型；了解其它目和属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型。绘制病原图。实验四

卵菌门菌物一、实验目的了解卵菌门菌物主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点。同时，学习使用检索表来鉴定病菌，为分类鉴定打下初步基础。二、实验内容观察卵菌门霜霉目的植物病原菌物的形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料瓜果腐霉(Pythiumaphanidermatum)、致病疫霉(Phytophthorainfenstans)、禾生指梗霉(Sclerospora

graminis)、葡萄霜霉病菌(Plasmoparaviticola)、寄生霜霉(Peronosporaparasitica)、瓜类霜霉病菌(Pseudoperonospora

cubensis)、莴苣盘梗霉(Bremia

lactucae)、十字花科白锈病菌(Albugocandida)等病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。。四、实验的要点与教学建议掌握卵菌门霜霉目中重要属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型；了解其它目和属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型。绘制病原图。实验五

子囊菌门菌物（1）一、实验目的掌握半子囊菌纲、盘菌纲、核菌纲、腔菌纲菌物的基本特点，与植物病害有关的重要属的形态特点、分类依据及所致主要病害的症状特点。二、实验内容观察半子囊菌纲、盘菌纲、核菌纲、腔菌纲菌物形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料桃缩叶病(Taphrinadeformans)、核盘菌(Sclerotiniasclerotiorum)、葱叶枯病菌（Mycrosphaerella

sp.)、苹果树腐烂病菌(Valsamali)、小麦全蚀病菌(Gaeumannomycesgraminis)、甘薯黑斑病菌(ceratocystis

fimbriata)等病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。四、实验的要点与教学建议掌握外囊菌属、核盘菌属、长喙壳属、黑腐皮壳属、顶囊壳属、黑痣菌属、球腔菌属、格孢腔菌属等属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型。绘制病原图。实验六

子囊菌门菌物（2）一、实验目的掌握核菌纲白粉菌目和球壳目菌物的基本特点，与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致主要病害的症状特点。二、实验内容观察核菌纲白粉菌目和球壳目植物病原菌物的形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料禾白粉病菌(Blumeriagraminis)、向日葵白粉病菌(Erysiphe

cichoracearum)、瓜白粉病菌(Sphaerotheca

fuliginea)、桃白粉病菌(Podosphaeratridactyla)、洋槐白粉病菌(Microphaera

sp.)、桑里白粉病菌(Phyllactinia

corylea)、葡萄白粉病菌(Uncinula

necator)、杏疔病菌(Polystigmadeformans)、玉蜀黍赤霉菌(Gibberellzeae)等病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。四、实验的要点与教学建议掌握白粉菌目中所有属、球壳目中赤霉属、疔座霉属等属的病原菌形态特点和所致病害的症状类型。绘制病原图。实验七

担子菌门菌物一、实验目的通过实验了解担子菌门冬孢菌纲主要病原菌的形态特征，掌握锈菌目和黑粉菌目中与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致主要病害的症状特点。二、实验内容观察小麦条锈病、梨锈病、豆类锈病、玫瑰锈病、苹果锈病、亚麻锈病等病原菌的冬孢子堆及冬孢子；观察小麦秆锈病及胡杨锈病夏孢子堆；观察小麦腥黑穗病、小麦散黑穗病、小麦秆黑粉病、大麦坚黑穗病、玉米丝黑穗病、玉米瘤黑粉病、高梁坚黑穗病、高梁散粒黑穗病、水稻粒黑穗病等病原菌的冬孢子。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料1、锈菌目菜豆锈菌(Uromycesappendiculatus)、禾柄锈菌(Pucciniagraminis

f.sp.tritici)、小麦叶锈菌(Puccinia

recondita)、小麦条锈菌(Pucciniastriiformis)、梨胶锈菌(Gymnosporagium

haraeanum)、蔷薇多胞锈菌(Phragmidiumrosae-multiflorae)、亚麻锈菌(Melampsoralini

)、花椒鞘锈菌(Coleosporiuxanthoxyli)、松栎锈菌(Cronartiumquercum)、枣层锈菌(Phakopsora

ziziyphi-vulgaria)等2、黑粉菌目小麦散黑粉菌(Ustilagotritici

)、玉蜀黍黑粉菌(Ustilagomaydis)、丝孢堆黑粉菌(Sporisoriumreilianum)、高粱坚孢堆黑粉菌(Sporisoriumsorghi)、高粱散孢堆黑粉菌(Sporisoriumcrtentum)、小麦网腥黑穗菌(Tilletiacaries)、小麦光腥黑穗菌(Tilletiatritici)、稻尾孢黑粉菌(Neovossiahorrida)、稻叶黑粉菌(Entylomaoryzae)、小麦条黑粉菌(Urocystistritici)等。以上病菌引起的病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片。四、实验的要点与教学建议了解担子果的基本构造，掌握黑粉病目与锈菌目病原菌形态特点和所致病害的症状类型。绘制病原图。实验八

半知菌类菌物（1）一、实验目的了解半知菌类菌物主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点。二、实验内容观察半知菌类丝孢纲丝孢目、无孢目、瘤座菌目等植物病原菌物的形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料立枯丝核菌(Rhizoctoniasolani)、齐整小核菌(Sclerotiumrolfsii)、稻梨孢(Pyriculariaoryzae)、玉蜀黍平脐蠕孢(Bipolarismaydis)、玉米大斑突脐蠕孢(Exerohilumturcicum)、大丽轮枝菌(Verticilliumdahliae)、芸薹链格孢(Alternariabrassicae)、球座尾孢(Cercosporapersonata)、梨黑星孢(Fusicladiumvirescens)、灰葡萄孢(Botrytiscinerea)、粉红聚端孢(Trichotheheciumroseum)、意大利青霉(Penicilliumitalicum)、褐孢霉(Fulviafulva)、尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporium)等。以上病菌引起的病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片和病菌的PDA培养物。四、实验的要点与教学建议掌握丝孢目梨孢属、尾孢属、链格孢属、轮枝孢属、平脐蠕孢属、突脐蠕孢属、镰刀菌属、黑星孢属、褐孢霉属；无孢目丝核菌属、瘤座菌目镰孢属等病害症状特点及病原菌特征并绘病原菌图。实验九

半知菌类菌物（2）一、实验目的了解半知菌类菌物主要形态特征，掌握与植物病害有关的重要属的形态特征、分类依据及所致病害的症状特点。二、实验内容观察半知菌类腔孢纲黑盘孢目、球壳孢目植物病原菌物的形态特点及所致病害的症状。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：显微镜、载玻片、浮载剂（蒸馏水或乳酚油）、吸水纸、解剖刀、拨针、镊子、纱布、酒精灯、无菌水等。（二）实验材料胶孢炭疽菌(Colletotrichumgloeosporioides)、葡萄痂圆孢(Sphacelomaampelinum)、梨壳囊孢(Cytosporacarphosperma)、芹菜生壳针孢(Septoriaapiicola)、高粱生壳二孢(Ascochyta

sorghina)、甜菜蛇眼病菌(Phomabeta

)、梨叶点霉(Phyllostictapyrina)等。以上病菌引起的病害标本或新鲜材料、病原菌永久玻片和病菌的PDA培养物。四、实验的要点与教学建议掌握腔孢纲黑盘孢目盘二孢属、炭疽菌属、球壳孢目叶点霉属、壳二孢属、壳针孢属等病害症状特点及病原菌特征并绘病原菌图。实验十

植物病原原核生物病害的症状及病原细菌形态观察一、实验目的通过对各种病害标本，熟悉植物原核生物病害的主要症状特点，掌握常规诊断技术。学习并初步掌握革兰氏染色法，了解革兰氏染色和的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性。二、实验内容观察细菌主要类群引起的病害小麦细菌条斑，棉花角斑、黄瓜角斑、桃细菌性穿孔病害症状特点。观察白菜或萝卜软腐病标本，注意初期症状的颜色特点，腐烂后有无臭味。观察马铃薯环腐病标本，注意茎秆及薯块维管束是否变褐，用手挤压薯块切面，是否有乳白色细菌溢。观察苹果根瘤病或杨树根瘤病标本，注意肿瘤症状。镜检细菌溢；学习并初步掌握革兰氏染色法。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：1.

植物病原原核生物病害的症状观察：显微镜、放大镜、载玻片、盖玻片、浮载剂(蒸馏水或乳酚油)、纱布、刀片、剪刀、挑针等。2.

革兰氏染液（1）结晶紫草酸铵染剂溶液I结晶紫2.0g

95%酒精20.0ml。溶液Ⅱ草酸铵0.8g

蒸馏水80.0ml。混合溶液I和Ⅱ，滤纸过滤，贮存于试剂瓶中，24h后使用。（2）鲁戈尔碘液碘1.0g

碘化钾2.0g

蒸馏水300.0ml。将碘和碘化钾放入同一研钵中研磨，研磨时缓慢加水直至碘和碘化钾溶解，然后加水稀释到300ml，装入棕色试剂瓶，放暗处备用。（3）复染剂

先配制原液，用蒸馏水稀释后为复染剂。原液

番红O(藏红)2.5g

95%酒精100.0ml。复染剂

原液10.0ml

蒸馏水90.0ml。提示：配制好的染液不可超过一年，特别是鲁戈尔碘液要装在棕色试剂瓶中，置于暗处保存，否则会褪色无效。（二）实验材料1.

植物病原原核生物病害标本及消耗性病害材料：水稻白叶枯病(Xanthomonasoryzae

pv.

oryzae)。水稻细菌性条斑病(X.oryzae

pv.oryzicola)、柑橘溃疡病(X.competrstris

pv.

citri)、甘蓝黑腐病(X.competrstris

pv.

campestris)、桃细菌性穿孔病(X.competrstris

pv.

pruni)、黄瓜细菌性角斑病(Pseudomonassyringae

pv.lachrymans)、桑疫病(P.syringae

pv.

mori)、白菜软腐病(Erwinia

subsp.

carotovora)、番茄青枯病(Burkholderiasolanacearum)、马铃薯环腐病(Clavibactermichiganensis

subsp.

sepedonicum)、果树根癌病(Agrobacteriumtumefanciens)、苹果发根病(A.rhizogenes)、马铃薯疮痂病(Streptomycesscalbies)、柑橘黄龙病(Candidatusliberobacterasiaticum)、枣疯病(Jujubewitchesbroomdisease)、泡桐丛枝病(Paulowniawitchesbroomdisease)等。2.

革兰氏染色实验菌株甘蓝黑腐病菌（X.competrstris

pv.

campestris）、茄青枯病菌(Burkholderiasolanacearum)、白菜软腐病菌(Erwinia

subsp.

carotovora)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)等菌种必须在使用前5d移植，临用前18-36h再转管一次，以保证菌体处于分裂活跃时期。四、实验的要点与教学建议掌握小麦细菌条斑，棉花角斑、黄瓜角斑、桃细菌性穿孔病害症状特点。观察白菜或萝卜软腐病、马铃薯环腐病。苹果根瘤病或杨树根瘤病病害症状特点及引起的病原菌。掌握革兰氏染色法。实验十一

植物线虫的采集、分离及形态观察一、实验目的了解从土壤和植物组织中分离线虫的基本原理，掌握从土壤和植物组织中分离线虫的方法。学习在解剖镜或扩大镜下用镊子、竹针、毛针、毛笔等工具从水中和滤纸上挑取线虫的方法。二、实验内容学习用Baermann漏斗分离法采集分离线虫的方法及步骤。观察小麦粒线虫主要特征。观察茎线虫属、甘薯茎线虫为害症状及特征，尤其该线虫的雄虫尾部的交合撒和交合剌。胞囊线虫属、根结线虫属和滑刃线虫属代表科的为害症状及线虫形态特征。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：解剖镜、漏斗分离装置、漂浮分离装置、浅盘分离装置、纱布或铜纱、记数皿或平皿、小烧杯、小玻管、旋盖玻璃瓶、40目和325目网筛、线虫滤纸、餐巾纸、挑针、竹针、毛针、毛笔等。（二）实验材料感染根结线虫病的植物病根、病土、感染大豆孢囊线虫或其他孢囊线虫的病士、感染甘薯茎线虫的病薯块等。四、实验的要点与教学建议掌握线虫采集要领、线虫的定量研究技术；了解线虫的分离方法。掌握小麦粒线虫、胞囊线虫属主要特征及所致病害的特征。实验十二

植物病毒病害的症状特点及病毒传毒实验一、实验目的通过人工摩擦接种，学习常规的汁液接种法和关键技术；通过对一套鉴别寄主的接种，了解鉴别寄主的鉴别作用、筛选作用和定量作用。二、实验内容观察主要病毒病如番茄病毒病、瓜类病毒病、百合病毒病、小麦病毒病等的症状特点。学习用机械接种法进行病毒的接种。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：肥皂或肥皂水、消毒的研钵与研棒、洗瓶、金刚砂或硅藻土（600目）、0.05M

pH7.2的磷酸盐缓冲液(PBS)、塑料标签、铅笔、小毛笔、洗瓶等。（二）实验材料植物病毒标样1号、2号、3号；小麦幼苗生长健壮，无病虫害。四、实验的要点与教学建议掌握植物病毒病害的症状特点；掌握病毒汁液传毒的接种技术。实验十三

种子带菌检验一、实验目的了解种子带菌检验的方法，明确种子携带病菌的情况，学习掌握肉眼检验、洗涤检验等方法，培养种子处理和植物检疫的基本方法。二、实验内容用小麦腥黑穗病的带菌麦种学习种子检验的方法。了解种子检验的意义。三、实验仪器与材料（一）实验仪器：粗天平、离心机、三角瓶、离心试管、血球记数板、盖玻片、显微镜、测微尺。（二）实验材料供检验小麦腥黑穗病的带菌麦种。四、实验的要点与教学建议掌握种子带菌检验的方法及步骤。实验十四

田间病害调查一、实验目的通过田间（或校园）调查，了解植物病害的主要种类、分布、为害、发生时期，进一步认识常见病害的症状。通过对某些重要病害进行的调查，掌握病害鉴定及调查研究的常规方法。通过联系实际的调查，分析病害的发生危害程度与气候、品种、栽培条件、生育情况、地形、地势等因素的关系，从而巩固和深化课堂学习课堂内容，提高学生诊断和研究病害的能力。二、实验内容了解田间（或校园）植物病害的主要种类、分布、为害、发生时期，进一步认识常见病害的症状。通过对某些重要病害进行的调查，掌握病害鉴定及调查研究的常规方法。二、实验任务与要求（一）一般调查：调查当年当地（或校园）某种病害发生的种类、发生时期、危害部位、发病程度、症状特点、并采集有关病害的标本带回室内鉴定病原。（二）重点调查：重点调查某一种植物病害的发生情况。根据分级标准，算出病情指数。调查学生分若干组，一般5人左右为一组。调查结束后对调查项目及数据总结分析，写出病害普查报告和某种病害重点调查报告。四、实验的要点与教学建议掌握病害鉴定及调查研究的常规方法。实验十五

植物病原真菌的分离与培养（综合）一、实验目的本实验主要是配合植物病理学的教学内容，帮助学生综合应用植物病理学的基础理论，基本知识和基本实验技能。着重训练和培养学生分析问题和解决问题的能力；启发和鼓励学生的创新思维与开拓精神。通过该项实验，使学生掌握植物病原真菌鉴定的基本过程和操作步骤，加深对柯赫氏证病律概念理解和在实际工作中的应用，比较系统地形成根据研