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文档简介
实验七、理化因素对微生物生长的影响实验目的1、学习和掌握研究理化因素对微生物生长的影响2、学习和掌握利用浊度法测量微生物生长的方法;3、了解不同pH对大肠杆菌生长的影响。研究方法:利用液体培养——定量测定生长量定量测定微生物生长量的常用方法浊度法重量法显微镜直接计数法菌落计数法浊度法原理:在一定范围内,菌悬液中的细胞浓度与混浊度成正比,即与光吸收值(OD)成正比,菌数越多,OD越大。因此,借助于分光光度计,在一定波长下测定菌悬液的OD,就可反应出菌液的浓度。测定方法:测定细胞培养物在600nm光吸收优缺点适应范围:单细胞无分支的微生物生长的测定注意事项:特点:快速、简便;但易受干扰。重量法原理:将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离出来,然后烘干至恒重(干燥温度可采用105℃、100℃或80℃)、称重。优缺点:快速、简便;但易受干扰。适应范围:丝状微生物生长的测定测定方法干重法湿重法注意事项显微镜直接计数法不足:不能区分死细胞和活细胞,应用范围较窄一些小的细胞在显微镜下很难看到;样品中菌液浓度不能低于106个/mL不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定。
优点:简单、快速;重复性高平板菌落计数法优点灵敏度高可以区分死活细胞应用广食品、饮料等微生物检查消毒灭菌效果检查不足测定的结果误差也较大。操作也比较烦琐需要的时间较长实验操作步骤配制牛肉膏蛋白胨液体培养基(每组500mL)分装于6个三角瓶中(50mL/瓶)将上述培养基中pH分别调到3、5、7、9、11、13(每种样品留出10ml以作空白)包扎121度灭菌20分钟,冷却接种(0.5ml/瓶大肠杆菌过夜培养物)37度恒温震荡培养24小时,测定光吸收值(OD600)实验报告要求格式:按照正式发表论文格式题目:环境中四大类细胞型微生物的分离和生物学性质研究作者,学号摘要:主要方法和和主要结果前言(为什么要进行该实验,要达到什么目的等)实验方法(培养基配制、采样、分离、纯化、性质研究(菌株形态结构观察、大小测定、生理生化实验、环境因素影响等)实验结果:分离实验结果、形态结构和培养特征观察结果、初步鉴
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