临床医师临床检验基础-红细胞检查

临床医师临床检验基础一红细胞检查

《考纲要求》

(1)红细胞生理掌握

概要

(2)血红蛋白分子结构、成分、合成和代谢了解

(1)检测原理掌握

(2)方法学评价掌握

红细胞检查(一)

红细胞计数(3)质量控制熟练掌握

血红蛋白测定(4)参考值熟练掌握

(5)临床意义掌握

(6)操作方法了解

概要

一、红细胞生理RBC生成

造

红原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞衰亡

血

系

干

祖

一

细

细

胞

胞

衰老红细胞主要在脾破坏，

分解为铁、珠蛋白和胆红素。

二、血红蛋白(hemoglobin,Hb)

l.Hb分子结构及成分

f原吓蹄

色素部分为亚铁血红素

蛋白质部分为珠蛋白

类链：a,6和8梃；

B类糙：B，$，V.£铤。

每个Hb分子由2条a类肽链和2条B类肽链组成。

红细胞计数

【检测原理】

1.手工显微镜法：

用等渗稀释液将血液稀释一定倍数，充入血细胞计数池，在显微镜下计数一定体积内的红细胞数，经

换算求出每升血液中红细胞数量。

稀释一充池f计数一计算

2.血液分析仪法：用电阻抗和(或)光散射原理。

【稀释液】

氯化讷(jfaa)--调节遨透浓度

1.Ha5rem液

硫酸讷(Na:SO,)--防止红细胞聚集

氯化晟＞汞(IfeClj)—防腐剂，有毒

氛调遨，硫防聚，高贡防腐且有毒。

2.枸椽酸讷稀释液:枸椽酸讷—抗凝和维持渗诱压

巴蒙——防腐和固定红细胞

氯化讷

--调节渗透浓度

3.普通生理盐水或加1%甲醛的生理盐水。

改良牛鲍计数板(血细胞计数板)

计数池

计数池

*'H!，型沟槽

0.1mm间隙

面积1mm2

容积0.W(U-l)

}11nm5个大方格

四角大方格单线

16中方格

中央大方格双线

25中方格，16小方格

计数池微观结构

【血细胞计数板口诀】

改良牛鲍H型，

上下两池容点1,

四角中央五大格，

四角单线白细胞，

单线分成16中，

中央双线红与血，

双线分成25中，

每中分成16小。

3nun

白细胞计数区域

是四角的4个大方格

红细胞和血小板计数区域

中央大方格四角和中间

5个中方格

血细胞计数区

【操作方法】

稀释液2ml+血lOulf混匀■＞充池f静止3~5min一循检

一次完成充池，如充池过少、过计数

多有气泡、继续充液，应重新操

作。充池后不能移动盖玻片。

倍m

计数区域

计算

计数原则

•3:

32•3

•・

>a••321

■

■

)2・2.・e・4

O

.

■

■

2，・2'3

■5

0

O

0O

计数原则

压线细胞

【计算】

红细胞数/L=NX25/5X10X200Xl()6/L

=N(5个中方格内红细胞数)/1OOX1O'7L

白细胞影响

通常白细胞总数较少，仅相当于红细胞的1/1000~1/500,对结果影响很小，可以忽略不计。但白细胞

过高者(WB0100X107L),红细胞计数结果应进行校正。

校正方法有两种：

一是：直接将患者红细胞数减去白细胞数。

二是：在高倍镜下勿将白细胞计入，白细胞体积常比红细胞略大，中央无凹陷，细胞核隐约可见，无

黄绿色折光。

【方法学评价】

1.手工显微镜法

是传统方法，不需要特殊设备，但操作复杂、费时。

2.血液分析仪法

是常用方法，比手工法精确（如电阻抗计数法的变异系数为2%,手工法则大于11%）,且操作简便、

快速。当白细胞数量明显增高时，会干扰红细胞计数和体积测定而产生误差。成本高，环境条件要求高。

【质量控制】

1.手工法：误差原因

①样本：血液发生凝固，使细胞计数减少或分布不均。

②操作：稀释、充池、计数不规范。

③器材：微量吸管、计数板不标准。

④固有误差（计数域误差）

估计细胞计数的95%可信限和变异系数，采用下列公式：

标准差s=；95%可信限=计数值±2s；

变异系数=（：丫％=$/11乂100%=4*100虬

2.仪器法：应严格按规程操作，并定期进行室内质控和室间质评。

【参考值】

男性：（4.0〜5.5）X10,2/L

女性：（3.5~5.0）XlO'VL

新生儿：（6.0〜7.0）X1012/L

医学决定水平：

高于6.8X10"/L,应采取治疗措施；

低于参考值低限，为诊断贫血界限。

低于1.5X10'2/L应考虑输血。

【临床意义】

1.生理性变化

增多

年龄、性别、精神因素、剧烈体力劳动或运动、新生儿、高原居民等。

减少

老年人、妊娠等。

2.病理性变化

（1）RBC和Hb减少

贫血：单位容积血液中RBC数量、Hb量或HCT低于参考值的下限。

1）急、慢性红细胞丢失过多：各种原因出血，如消化性溃疡、痔疮、十二指肠钩虫病等。

2）红细胞寿命缩短：各种原因溶血，如输血溶血反应、蚕豆病、遗传性球形细胞增多症等。

红血比低于下限见贫血，出血红细胞丢失多，溶血红细胞寿命缩短，原料骨髓抑制生成少。

3）造血原料不足：如慢性失血者、先天性或后天性红细胞酶缺陷者、铁粒幼细胞贫血；某些药物，如

异烟肿、硫嗖嚓吟等；继发于某些疾病，如类风湿关节炎、白血病、甲状腺功能亢进、慢性肾功能不全、

铅中毒等。

4）骨髓造血功能减退：某些药物，如抗肿瘤药物、磺胺类药物、保泰松、有机珅、马利白消安等可抑

制骨髓造血功能；物理因素，如X线、60钻、镭照射等可抑制骨髓造血功能。

（2）RBC增多

1）相对增多：

呕吐、严重腹泻、多汗、多尿、大面积烧伤、晚期消化

道肿瘤而长期不能进食等引起血液浓缩、血液中有形成

分相对增多，多为暂时性增多。

「继发性

2）绝对增多v血中Epot

一原发性

继发性

①心血管病：各种先天性心血管疾病，如房室间隔缺损。

②肺部疾病：肺气肿、肺源性心脏病、肺纤维化、矽肺和各种引起肺气体交换面积减少。

③异常血红蛋白病。

④肾上腺皮质功能亢进（库欣病）：可能与皮质激素刺激骨髓使红细胞生成偏高有关。

⑤某些药物，如肾上腺素、糖皮质激素、雄激素等。

原发性：

真性红细胞增多症（PV）o

血红蛋白测定

【检测原理】

1.氟化高铁血红蛋白HiCN测定法:除SHb外

高铁甄化理

Hb--------------------»Hi+CLTHiCN

九540nm

------------------------------------►A

ICSH推荐参考方法，具有操作简单、显色快、结果

稳定可靠、读取吸光度后可直接定值等优点。致命的弱点

是氟化钾（KCN）试剂有剧毒，使用管理不当可造成公害。

2.十二烷基硫酸钠血红蛋白SDS测定法：

^538m

Hb+SDS-----►SDS-Hb（粽红色）------------->A

具有操作简单、呈色稳定、准确性和精确性符合要求、无公害等优点。但由于摩尔消光系数尚未最后

确认，不能直接用吸光度计算Hb浓度，而且SDS试剂本身质量差异较大，会影响检测结果。

【参考值】

成年男性：120〜160g/L

成年女性：110〜150g/L

新生儿：170〜200g/L

【临床意义】

Hb的临床意义与红细胞计数相似，但判断贫血程度优于红细胞计数。根据Hb浓度可将贫血分为4度。

轻度贫血：Hb<120g/L（女性HbV110g/L）；

中度贫血：Hb<90g/L；

重度贫血：Hb<60g/L；

极重度贫血：Hb<30g/L„

当RBCVI.5X10%,HbV45g/L时,应考虑输血。

男性120女性110,低于下限轻度贫，中重极963,低于45应输血。

（1）某些疾病，血红蛋白和红细胞浓度不一定能正确反映全身红细胞的总容量。如大量失血时，在补

充液体前，虽循环血容量缩小，但血液浓度很少变化，从血红蛋白浓度来看，很难反映出存在贫血。如水

潴留时，血浆容量增大，即使红细胞容量正常，但血液浓度减低，从血红蛋白浓度来看，己存在贫血，失

水时，血浆容量缩小，即使血液浓度增高，但红细胞容量减少，从血红蛋白浓度来看，贫血不明显。

（2）发生大细胞性贫血或小细胞低色素性贫血时，红细胞计数与血红蛋白浓度不成比例。大细胞性贫

血的血红蛋白浓度相对偏高，小细胞低色素贫血的血红蛋白减低，但红细胞计数可正常。

氧化高铁血红蛋白测定法操作

1.直接测定法

⑴在5mlHiCN转化液加血20uh充分混合，静置5min后，波长540nm处，光径（比色杯内径）1.000cm,

IliCN转化液或蒸储水调零，测定吸光度（A）。

（2）计算：根据公式直接计算：

Hb（g/L）=为料xX251=AX367.7

44为毫摩尔消光系数，64458/1000为Imol/LHb溶液中

所含Hb克数，251为稀释倍数。

2.参考液比色测定法（间接法）

采用HiCN参考液50g/L,100g/L,150g/L,200g/L,在分光光度计上,波长540nm处,测定各种参考

液的吸光度，以参考液血红蛋白含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，或求出换算常数K：

”XHb

根据样本吸光度（A）在标准曲线查出血红蛋白浓度，或用K值计算：Hb（g/L）=KXA。

3.HiCN贮存

在棕色有塞玻璃瓶中，不能贮存在塑料瓶中，否则会使CN一丢失，测定结果偏低。HiCN转化液在4℃保

存一般可数月，不能在0℃以下保存，因为结冰可使高铁氟化钾还原，试剂失效。

4.氟化钾试剂

是剧毒品，测定后的废液首先以水稀释废液（1:1）,再按每升上述稀释液加次氯酸钠35ml,充分混匀，

敞开容器，放置15h以上，使CN一氧化成CO?和N?挥发，或水解成CO/和NH4+,再排入下水道。废液不能

直接与酸性溶液混合，因为氟化钾遇酸可产生剧毒的氟氨酸气体。

【小结】

RBC计数Hb测定

稀充二计ICSII推荐HiCN吸收峰在540

检测原氯调渗，硫防聚除了硫化Hb就是有毒和公害

理高贡防腐且有毒SDS吸收峰在538

枸椽抗渗甲防固特色在于无公害

男性4055女性3550男性120女性110,低于下限轻度贫中重极为906030,

参考值

儿童6到7乘以1012低于45应输血

红血比低于下限见贫血出血红细

临床意胞丢失多大细胞贫血,Hb浓度相对高

义溶血红细胞寿命缩短小细胞低素贫,Hb浓度减低

原料骨髓抑制生成少

相对绝对红增多，相对呕泻血浓缩，

绝对继发和原发，继发多见心肺肾，

原发见于真性红。

【习题】

Ilayem红细胞稀释液中硫酸钠的主要作用是

A.固定细胞形态

B.防腐作用

C.防止细胞黏附

D.调节细胞渗透压

E.抗凝

『正确答案」C

『答案解析JHayem红细胞稀释液中硫酸钠的主要作用是防止细胞黏附。

患者，女性，50岁，用改良牛鲍计数板计数其红细胞，中央大方格内4角及中央5个中方格内红细胞

总数为300,则其红细胞计数为

A.3X10'2/L

B.4X10'2/L

C.5X10'7L

D.6X10'7l.

E.2X10l2/L

『正确答案』A

『答案解析』红细胞数/L=NX25/5X10X200X107L=N（5个中方格内红细胞数）/100X10'7>3X

IO12/LO

目前国际推荐测定血红蛋白方法是

A.十二烷基硫酸钠比色法

B.氧化高铁血红蛋白比色法

C.碱羟血红蛋白比色法

D.酸化血红蛋白比色法

E.血细胞分析仪测定法

r正确答案』B

［答案解析』目前国际推荐测定血红蛋白方法是氟化高铁血红蛋白比色法

《考纲要求》

(1)检测原理掌握

红细胞形态检查(2)方法学评价了解

红细胞检查(二)血细胞比容测定(3)质量控制掌握

红细胞平均指数(4)参考值熟练掌握

(5)临床意义掌握

红细胞形态检查

【检测原理】

红细胞形态检查与Hb测定、RBC计数结果相结合可粗略推断贫血原因，对贫血诊断和鉴别诊断有很重

要的临床价值。将细胞分布均匀的血涂片，进行染色(如瑞氏染色)后，根据各种细胞和成分各自的呈色

特点，在显微镜下进行观察和识别。

【质量控制】

1.选择细胞分布均匀的区域。

2.注意检查顺序的完整性

«1的购分做均匀.立体将由

也♦弟漕(中央照英)

先在低倍镜下估计细胞分布和染色情况，再用油镜观察血膜体尾交界处细胞形态，同时浏览是否存在

其他异常细胞，如幼稚或有核红细胞等，有时异常成分常集中分布在血片边缘。

【参考值】

瑞氏染色血涂片成熟红细胞形态为双凹圆盘形，细胞大小一致、平均直径7.2um,淡粉红色，中央1/3

为生理性淡染区，胞质内无异常结构。

*RBC大小改变

*Hb含量改变

*RBC形态改变

*RBC结构改变

【临床意义】

1.RBC大小改变

(1)小红细胞

直径＜6um的红细胞，Hb合成障碍，生理性淡染区扩大，见于IDA、珠蛋白生成障碍性贫血。

6

6

(2)大红细胞

直径＞10Um的红细胞，见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、恶性贫血等。

(3)巨红细胞

直径＞15um的红细胞，因叶酸、维生素B12缺乏使幼稚细胞内DNA合成不足，不能按时分裂，脱核

后成为巨大红细胞，血涂片还可见分叶过多中性粒细胞。见于巨幼细胞性贫血。

(4)红细胞大小不均

红细胞间直径相差一倍以上，大者可达12Nm,小者仅2.5Bm,与骨髓粗制滥造红细胞有关。见于严

重的增生性贫血(如MA)。

2.11b含量(染色异常)

(1)高色素性

红细胞中央浅染区消失，

整个红细胞染成红色，胞体增大,

平均红细胞Hb含量增高，

平均Hb浓度正常。见于MA

(2)低色素性

红细胞中央生理性浅染区扩大,

成为环形红细胞。见于IDA、

珠蛋白生成障碍性贫血、

铁幼粒细胞性贫血等。

0oO

c

（3）多色性

是尚未完全成熟的红细胞，胞体较大，胞质内尚存少量嗜碱性物质（RNA）,红细胞染成灰红色或淡灰

蓝色。

见于正常人（占现左右）、骨髓造红细胞功能活跃（如溶血性或急性失血性贫血）。

啊红大小染色常

小红低色缺铁珠

大红不均高巨贫

多色骨髓功能跃

建。O

3.红细胞形状改变

（1）球形红细胞

见于遗传性和获得性球形细胞增多症（如自身免疫溶血性贫血等）。

（2）椭圆形红细胞

见于遗传性椭圆形细胞增多症（可达25%〜75%）、大细胞性贫血（可达25%）、缺铁性贫血、正常人

（约占1%,不超过15%）»

（3）靶形红细胞

细胞中央染色较深，外围为苍白区域，而边缘又深染，形如射击之靶。

见于各种低色素性贫血(如珠蛋白生成障碍性贫血、HbC病)、阻塞性黄疸、脾切除后。

(4)口形红细胞

细胞中央有裂缝，中央淡染区呈扁平状，似张开的口形或鱼口，细胞有膜异常，Na通透性增加，细胞

膜变硬，使脆性增加，细胞生存时间缩短。见于口形红细胞增多症、小儿消化系统疾患引起的贫血、酒精

中毒、某些溶血性贫血、肝病和正常人(〈4%)。

(5)镰形红细胞：

细胞呈镰刀状、线条状或L、S、V形等，是含有异常血红蛋白S(HbS)的红细胞,在缺氧情况下，溶

解度减低，形成长形或尖形结晶体，使细胞膜发生变形。检查镰形红细胞时需加还原剂如偏亚硫酸钠后观

察。见于镰状细胞贫血(HbS-S,HbS-C)、镰状细胞特性样本(HbA-S)。

(7)裂红细胞

为红细胞碎片或不完整红细胞，大小不一、外形不规则，呈刺形、盔形、三角形、扭转形等，是细胞

通过阻塞的、管腔狭小的微血管所致。见于弥散性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成

障碍性贫血、巨幼细胞性贫血、严重烧伤和正常人(<2%)。

(8)缗钱状红细胞

红细胞互相连接如缗钱状，是因为血浆中某些蛋白(纤维蛋白原、球蛋白)增高，使红细胞正负电荷

发生改变所致。

(9)有核红细胞(幼稚红细胞)

除1周内婴幼儿血涂片中可见少量有核红细胞外，其他则为病理现象，包括：①溶血性贫血②造血系

统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤③慢性骨髓增生性疾病：如骨髓纤维化。

(10)其他

泪滴形红细胞

红细胞形如泪滴样或梨状，

因细胞内含有Heinz小体或包涵体，

或红细胞膜被粘连而拉长所致。

见于贫血、骨髓纤维化和正常人。

口诀：

球椭口、见遗传，

靶形可见珠蛋白，

镰形HbS病，

裂D泪纤有核病，

缗钱纤原珠蛋白。

4.RBC异常结构

(1)嗜碱性点彩红细胞

瑞氏染色后，胞质内出现形态不一的蓝色颗粒(变性RNA),属于未完全成熟红细胞，颗粒大小不一、

多少不等，原因为重金属损伤细胞膜，使嗜碱性物质凝集，或嗜碱性物质变性，或血红蛋白合成中阻断原

吓咻与铁结合。见于铅中毒。正常人血涂片中很少见到嗜碱性点彩红细胞(约占1/10000)。

（2）豪焦小体（染色质小体）

成熟红细胞或幼红细胞胞质内含有一个或多个直径为1〜2um暗紫红色圆形小体，为核碎裂、溶解后

的残余部分。见于脾切除后、无脾症、脾萎缩、脾功能低下、红白血病、某些贫血（如巨幼细胞性贫血）。

（3）卡波环

在嗜多色性、碱性点彩红细胞胞质中出现紫红色细线圈状结构，呈环形、“8”字形，为核膜残余物、

纺锤体残余物、脂蛋白变性物。见于白血病、巨细胞性贫血、增生性贫血、铅中毒、脾切除后。

口诀：

异常结构有点彩

点彩常见铅中毒

豪焦卡波和虫子

经常愿与小白混

（4）寄生虫

疟原虫、微丝拗、杜利什曼原虫等病原体。

血细胞比容测定（Het,Ht,HCT或PCV）

【检测原理】是指在一定条件下，经离心沉淀压紧的红细胞在全血样本中所占比值。

1.离心法

包括温氏法（Wintrobe法）、微量法是将抗凝血置于孔径统一的温氏管或毛细玻管中，以一定转速离

心一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。

2.血液分析仪法

【质量控制】

1.手工法

抗凝剂量不准确、混匀不充分、离心速度不够会产生误差。红细胞形态异常（如小红细胞、大红细胞、

椭圆形红细胞、镰形红细胞）或红细胞增多症可使血浆残留量增加6%。当红细胞增多时，HCT明显增高，

血浆残留也会增加。

2.血液分析仪法要注意Ilct是否与RBC、MCV相关。

【参考值】

温氏法:男性0.40〜0.50；女性0.37〜0.48。

微量法：男性0.47±0.04；女性0.42±0.05。

【临床意义】

1.增高见于各种原因所致血液浓缩，如大量呕吐、大手术后、腹泻、失血、大面积烧伤、真性红细胞

增多症等。

2.减低见于各种贫血。但不同类型的贫血，HCT减少程度与RBC计数值不完全一致。

3.输液评估用于评估血浆容量有无增减或浓度稀释程度，有助于控制补液量和了解体液平衡情况，是

临床输血、输液治疗疗效观察的指标。

4.计算平均值作为红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白浓度计算的基础数据。

5.真红诊断指标HCT>0.7,RBC为（7〜10）XlO'VL,Hb>180g/L即可诊断。

【操作方法】

温氏法取EDTA-K2或肝素钠抗凝静脉血2nd,加入温氏管中，用水平离心机以2264g,离心30分钟。

离心后血液分为5层，自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞层和有核红细胞层、还原红细胞层

（紫黑红色）、带氧红细胞层（鲜红色）。

读取还原红细胞层柱高的毫米数，乘以0.01,即为每升血液中红细胞体积的升数。

六、红细胞平均指数

【检测原理】手工法

..每升血液中血细胞比容Het

每升血液中红细胞个数RBC

rcu每升血液中血红蛋白含量Hb,、

每升血液中红细胞个数RBC

一cue每升血液中血红蛋白含量Hb,八、

MCHC=-----------------------------------=-----（q/L）

每升血液中血细胞比容Het

【参考值】

如表不同人群红细胞指数的参考范围

MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)

新生儿86〜12027〜36250〜370

1-3岁79〜10425〜32280〜350

成人80〜10026〜34320〜360

老年人81〜10327〜35310〜360

【临床意义】

红细胞平均指数可作为贫血形态分类依据

贫血分类MCVMCI1MCHC贫血

正细胞贫血正常正常正常再生障碍性贫血、急性失血性贫血、某些溶血性贫血

大细胞贫血增高增高正常各种造血物质缺乏或利用不良的贫血

单纯小细胞贫血减低减低正常慢性感染、慢性肝肾疾病性贫血

小细胞低色素贫血减低减低减低缺铁性贫血及铁利用不良贫血，慢性失血性贫血

【小结】

RBC形态IICT测定RBC平均指数

MCV=Hct/RBC(fl)

检测红细胞层占

推片染色镜下观MCH=Hb/RBC(pg)

原理全血的体积比

MCHC=IIb/Hct(g/L)

双凹圆盘淡粉红成人MCV80〜100

参考值平均直径6〜9男性0.40-0.50女性0.37~0.48MCH26-34

中央1/3淡染区MCHC320-360

平均指数贫血分

大小改变

输液评估三项正常正细胞

临床染色改变

计算平均值MCV,MCH增高大细胞

意义形态改变

真红诊断指标MCV,MCH减低单纯小

结构改变

三项均低小细胞

异常结构有点彩

点彩常见铅中毒

豪焦卡波和虫子

经常愿与小白混

球椭口、见遗传，

靶形可见珠蛋白，

镰形HbS病,

裂D泪纤有核病，

缗钱纤原珠蛋白。

离心后血液分为5层,

自上而下分别为

浆板白核还原带氧。

读取还原乘以0.01。

【习题】

不属于红细胞异常结构的是

A.染色质小体

B.杜勒小体

C.卡波环

D.嗜碱性点彩

E.寄生虫

『正确答案』B

『答案解析』杜勒小体是白细胞的结构异常。

异常结构有点彩

点彩常见铅中毒

豪焦卡波和虫子

经常愿与小白混

铅中毒时，血涂片中易见是

A.有核红细胞

B.球形红细胞

C.点彩细胞

D.大红细胞

E.小红细胞

『正确答案』C

『答案解析』铅中毒时，血涂片中易见是点彩细胞。

下列关于血细胞比容的说法中，不正确的是

A.与红细胞数量有关

B.与红细胞大小有关

C.是抗凝血自然沉降后所测得的红细胞在全血中所占体积的百分比

D.在各种贫血时血细胞比容会降低

E.大面积烧伤病人的血细胞比容常增高

『正确答案』C

『答案解析』血细胞比容是抗凝血离心后所测得的红细胞在全血中所占体积的百分比。

患者,男性，30岁,贫血外貌。实验室检查结果如下：MCV78fl,MCH24pg,MCHC280g/L,可见于下列

哪种贫血

A.巨幼细胞贫血

B.再生障碍性贫血

C.溶血性贫血

D.缺铁性贫血

E.慢性感染所致贫血

『正确答案』D

『答案解析』根据红细胞平均指数的判断，其属于小细胞低色素性贫血，故常见于缺铁性贫血。

红细胞检查(1)检测原理掌握

(三)红细胞体积分布宽度(2)方法学评价了解

(3)质量控制掌握

网织红细胞计数(4)参考值熟练掌握

(5)临床意义掌握

(1)检测原理了解

(2)方法学评价了解

(3)质量控制掌握

点彩红细胞计数

(4)参考值掌握

(5)临床意义掌握

(6)操作方法了解

(1)检测原理熟练掌握

(2)方法学评价了解

(3)质量控制掌握

红细胞检查红细胞沉降率

(4)参考值熟练掌握

(5)临床意义掌握

(6)操作方法了解

红细胞体积分布宽度(RDW)

【检测原理】

反映样本中红细胞体积大小的异质程度,常用变异系数(CV)表示，由血液分析仪的红细胞体积直方

图导出。

【参考值】

RDW参考值

作者例数RDW(X<1.64s)时间(年)

Bessman229<13.91983

McClure90<14.81985

Robert29<12.11985

Marti61<48(SD)1987

丛玉隆等*2013<14.91996

*北京市协作组6家医院使用5种型号全自动血液分析仪调查2013例成人(男1013例，女1000

例)结果

【临床意义】

1.贫血形态学分类Bessman贫血的MCV/RDW分类法

MCVRDW分类常见疾病

正常小细胞均一性轻型8地中海贫血

减低

增大小细胞不均一性IDA

正常正细胞均一性急性失血、酶缺陷、急性溶血

正常

增大正细胞不均一性IDA早期

正常大细胞均一性MDS

增大

增大大细胞不均--性MA

2.作为缺铁性贫血（IDA）

筛选诊断和疗效观察的指标。

RDW增大对IDA的诊断灵敏度达95%以上，特异性不强，可作为IDA的筛选诊断指标。当铁剂治疗有效

时，RDW开始增大，随后逐渐降至正常。

3.鉴别缺铁性贫血和B-珠蛋白生成障碍性贫血

IDA：RDW增大

6-珠蛋白生成障碍性贫血：RDW正常

网织红细胞计数（Ret）

【检测原理】

是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，属于尚未完全成熟的红细胞,其胞质中残存宝

碱性物质核糖核酸（RNA）,经活体染色（新亚甲蓝、煌焦油蓝、中性红等染料）后，形成核酸与碱性染料

复合物，呈深染的颗粒状或网状结构。凡含两个以上的深染颗粒或具有线网状结构的无核红细胞，即为网

织红细胞。

网织未成嗜碱RNA,活体染色新焦蓝，染成深染颗粒网，外周多以IV型见。

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72h

1.普通光学显微镜法

在显微镜下计数1000个红细胞中网织红细胞的百分比或分数。

2.网织细胞计数仪法和血液分析仪法

用荧光染料（如口丫呢橙、派若宁-Y、噬哇橙）使网织红细胞内RNA着色，用流式细胞术（FCM）得到网

织红细胞数。

【方法学评价】

1.普通光学显微镜法

试管法操作简便、重复性较好。玻片法取血量少、染色时水分易蒸发，造成结果偏低。但显微镜法受

主观因素影响较多，且耗时费力。

2.网织细胞计数仪法

可客观地将Ret分成高荧光强度网织红细胞（HFR）、中荧光强度网织红细胞（MFR）、弱荧光强度网

织红细胞（LFR）3类，有助于化疗、放疗、移植患者的监测。

3.血液分析仪法

网织红细胞绝对值（Ret）、网织红细胞百分比（Ret%）、网织红细胞分布宽度（RDWr）、网织红细胞

平均体积（MCVr/MRV）,网织红细胞血红蛋白浓度（HCr）、网织红细胞平均血红蛋白浓度（MCHCr）、网

织红细胞血红蛋白分布宽度（HDWr）.LFR、MFR、HFR、网织红细胞成熟指数（RMLRMI=（MFR+HFR）/LFR

X100）。

仪器法优点是测量细胞多，避免主观因素，方法易于标准化。

【质量控制】

1.显微镜法

影响因素有：操作人员对网织红细胞识别不同、血涂片质量好坏、计数红细胞数量多少、计数方法等。

Miller窥盘法技术网织红细胞误差可减小，网织红细胞95%可信限为：

Ret±2^Ret（W0-Ret）

2.仪器法

计数红细胞10000〜50000个。出现豪焦小体、有核红细胞、巨大血小板会使结果假性增高。

【参考值】

手工法

成人0.008〜0.02或（25〜85）X109/L

新生儿0.02-0.06

仪器法（RMI）

男性9.1%~32.2%

女性12.8%~33.7%

【临床意义】

1.Ret计数（尤其是Ret绝对值）是反映骨髓造血功能的重要指标。

正常情况下，骨髓中网织红细胞均值为150X109/L,血液中为65X109/L。当骨髓网织红细胞增多，

外周血减少时，提示释放障碍；骨髓和外周血网织红细胞均增加，提示为释放增加。正常时，外周血网织

红细胞中ID型约占20%〜30%,IV型约占70%〜80%,若骨髓增生明显，可出现I型和H型网织红细胞。

（1）增多

①溶血性贫血：溶血时大量网织红细胞进入血液循环，Ret可达6%〜8%,急性溶血时，可达约20%,

甚至50%以上，绝对值超过lOOXlO'/L急性失血后，5〜10天网织红细胞达高峰，

2周后恢复正常。

②放疗、化疗后：恢复造血时，Ret短暂和迅速增高，是骨髓恢复较敏感的指标。

③红系无效造血：骨髓中红系增生活跃，外周血网织红细胞计数正常或轻度增高。

增多溶贫放化红无效

（2）减少

见于再生障碍性贫血、溶血性贫血再障危象。典型再生障碍性贫血诊断标准之一是Ret计数常低于

0005,绝对值低于15X1（）9/L。

2.观察贫血疗效

缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血患者治疗前，Ret仅轻度增高（也可正常或减少），给予铁剂或维生素

B%叶酸治疗后，用药3〜5d后，Ret开始上升，7〜10d达高峰，2周左右，Ret逐渐下降，表明治疗有效。

增多溶贫放化红无效，减少再障骨髓抑，观察贫血骨移植，RPI反映Ret生成率。

3.骨髓移植后监测

骨髓移植后第21d,如Ret大于15X107L,表示无移植并发症；小于15XU/L,伴中性粒细胞和血小

板增高，可能为骨髓移植失败。

4.网织红细胞生成指数（RPI）

是网织红细胞生成相当于正常人的倍数。通常Ret生存期限约为2d,若未成熟网织红细胞提前释放入

血，Ret生存期限将延长，为了纠正网织红细胞提前释放引起的偏差，用网织RPI来反映Ret生成速率。计

算公式为:

1患者Het

Rn=-----------------xX被测网织红细胞百分比

Ret成熟天数正常人Het

点彩红细胞计数

【检测原理】

是尚未完全成熟的红细胞在发育过程中受到损害，其胞质中残存变性的嗜碱性RNA,碱性亚甲蓝染色后

呈现大小、形状不一的蓝色颗粒。瑞氏染色后，颗粒呈蓝黑色。在油镜下计数点彩红细胞百分率。

【参考值】＜0.03%。

【临床意义】

增高：

①中毒（如铅、汞、银、根、硝基苯、苯胺等）。

②各类贫血（如溶血性贫血、巨幼细胞性贫血、恶性贫血、恶性肿瘤等）。

红细胞沉降率测定

【检测原理】

红细胞沉降率（ESR,血沉）指离体抗凝血静置后，红细胞在单位时间内沉降的速度。

分为3期：

①缗钱状红细胞形成期，约数分钟至lOmin；

②快速沉降期，缗钱状红细胞以等速下降，约40min；

③细胞堆积期（缓慢沉积期），红细胞堆积到试管底部。

1.魏氏法（Westergren法）：血沉测定首选方法

将离体抗凝血液置于特制刻度测定管内，垂直立于室温中，lh准红细胞层下沉距离，用毫米（mm）数

值报告。

2.血沉仪法：用发光二极管、光电管检测红细胞和血浆界面的透光度改变，得到血沉值，显示红细胞

沉降高度（H）与时间（t）关系的n-t曲线。

【质置控制】

影响血沉的理化因素与红细胞数量、表面积、厚度、直径、血红蛋白量和血浆等有关。血沉加快的最

重要因素是红细胞相互重叠呈“缗钱”状或积聚成堆。

影响红细胞缗钱状形成的主要因素有：

1.血浆蛋白质比例

小分子蛋白如清蛋白、卵磷脂等使血沉减缓，大分子蛋白如急性反应蛋白（如C反应蛋白、纤维蛋白

原、触珠蛋白、铜蓝蛋白、ai酸性糖蛋白、ai抗胰蛋臼酶）、免疫球蛋白、巨球蛋白、胆固醇、甘油三酯等

使血沉加快。

2.红细胞数量和形状

（1）红细胞数量

红细胞沉降率和血浆阻逆力保持平衡。如数量减少，使总面积减少、所承受血浆逆阻力减少，引起血

沉加快。

数量增多使血沉减慢。但数量太少，则影响了红细胞缗钱状形成，导致血沉也减慢。

（2）红细胞直径：直径越大血沉越快，如靶红细胞，但球形红细胞、镰形红细胞不易聚集而使血沉减

慢。

影响血沉红细胞浆，血沉快时红少径大，正电蛋白缗钱状，沉管倾斜温度高，抗凝过多血沉慢。

3.血沉管

置血沉架上应完全直立，血沉管倾斜时，红细胞沿管壁一侧下沉，而血浆沿另--侧下降，会加速红细

胞沉降，如血沉管倾斜3。，沉降率增加降%。

4.血样本

抗凝剂浓度增加、血液凝固（血浆纤维蛋白原减少）使血沉减慢。但样本冷臧4〜24小时，测定前平

衡至室温，并混匀后，不影响检测结果。

5.温度

室温过高（>25℃）使血沉加快，可按温度系数校正。

室温过低（<18℃）使血沉减慢，但无法校正。

影响血沉红细胞浆，

血沉增快红少径大，

正电蛋白缗钱状，

沉