人血涂片的制作

关于人血涂片的制作

血涂片的显微检查是血液细胞学检查的基本方法，临床上应用极为广泛，制备厚薄适宜，分布均匀，染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一。涂片法制片是生物显微制片的基本方法之一。第2页,共13页，2024年2月25日，星期天可分5个步骤进行消毒取血推片染色观察步骤第3页,共13页，2024年2月25日，星期天消毒与取血

消毒

先按摩取血部位，使血流通畅；再用酒精消毒采血针和取血部位（如指尖）。

取血

待酒精干后，刺破皮肤，使血自然流出，勿挤。取干净载片，让血滴在离载片一端中4～5毫米处，注意手指持握载片的边缘，勿触及其表面。不能使载片接触取血部位的皮肤。第4页,共13页，2024年2月25日，星期天推片

取一块边缘光滑的载片做推片。将其一端置于血滴前方，向后移动到接触血滴，使血液均匀分散在推片与载片的接触处。然后使推片与载片呈30°～40°角，向另一端平稳地推出，如右图所示。涂片推好后，迅速在空气中摇，使之自然干燥。第5页,共13页，2024年2月25日，星期天染色

用特种玻璃铅笔在血膜两侧画两条线，防止染液外溢。再将瑞氏染液(伊红-亚甲基蓝)滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染半分钟。加等量蒸馏水(或缓冲液)与染液混合再染5分钟。最后用蒸馏水把染液冲掉，用吸水纸吸干，自然干燥后，即可观察。第6页,共13页，2024年2月25日，星期天观察红细胞

淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故边缘部分染色较深，中心较浅，直径7-8微米。

颗粒白细胞

嗜中性颗粒白细胞：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米。

嗜酸性颗粒白细胞：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为2叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成鲜红色。直径10-15微米。

嗜碱性颗粒白细胞：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。直径10-11微米。第7页,共13页，2024年2月25日，星期天

无颗粒白细胞

淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。中淋巴细胞较大，核圆形。直径6-8微米。

单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米。血小板血小板为不规则小体，直径2-3微米。其周围部分浅蓝色，中央有细小的紫红色颗粒，聚集成群。

第8页,共13页，2024年2月25日，星期天第9页,共13页，2024年2月25日，星期天第10页,共13页，2024年2月25日，星期天第11页,共13页，2024年2月25日，星期天注意事项玻片的清洗：新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水或合成洗涤剂的清水中煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,用自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干备用。使用玻片时只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁,干燥,中性、无油腻。一张良好的血片,要求厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。血片制好后最好立即固定染色,以免细胞溶解和发生退行性变。血膜未干透,细胞尚未牢固附在玻片上,在染色过程中容易脱落,