高三生物第二讲细胞工程的原理及应用课件

高三生物第二讲细胞工程的原理及应用课件胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶原代培养贴壁生长接触抑制传代培养洗涤、稀释、分离动物细胞培养不能最终培养成生物体原代细胞传代细胞2.动物细胞培养过程第2页,共77页，2024年2月25日，星期天第3页,共77页，2024年2月25日，星期天原代培养和传代培养细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养多数组织细胞固定在表面生长和分裂随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖第4页,共77页，2024年2月25日，星期天3.动物细胞培养的条件第5页,共77页，2024年2月25日，星期天3.动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒的环境第6页,共77页，2024年2月25日，星期天3.动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒的环境(2)必须的营养物质（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等。）第7页,共77页，2024年2月25日，星期天3.动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒的环境(2)必须的营养物质（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等。）(3)适宜的温度:36.5±0.5度第8页,共77页，2024年2月25日，星期天3.动物细胞培养的条件(1)无菌、无毒的环境(2)必须的营养物质（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、激素、促生长因子、动物血清等。）(3)适宜的温度:36.5±0.5度(4)充足的氧气和适宜的酸碱度:O2和CO2（95%空气和5%CO2

）第9页,共77页，2024年2月25日，星期天4.动物细胞培养与植物组织培养的比较项目植物组织培养动物细胞培养培养基的物理性质培养基的成分结果目的取材其他

条件①植株快速繁殖②脱毒植株的培③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件第10页,共77页，2024年2月25日，星期天4.动物细胞培养与植物组织培养的比较项目植物组织培养动物细胞培养培养基的物理性质培养基的成分结果目的取材其他

条件固体液体①植株快速繁殖②脱毒植株的培③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件第11页,共77页，2024年2月25日，星期天4.动物细胞培养与植物组织培养的比较项目植物组织培养动物细胞培养培养基的物理性质培养基的成分结果目的取材其他

条件固体液体水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、激素、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等①植株快速繁殖②脱毒植株的培③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件第12页,共77页，2024年2月25日，星期天4.动物细胞培养与植物组织培养的比较项目植物组织培养动物细胞培养培养基的物理性质培养基的成分结果目的取材其他

条件固体液体水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸、激素、琼脂等葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等新的植株或组织新的细胞系或细胞株①植株快速繁殖②脱毒植株的培③人工种子④生产药物、杀虫剂等⑤转基因植物的培育①蛋白质生物制品的生产②皮肤移植材料的培育③检测有毒物质④生理、病理、药理学研究植物幼嫩的部位或花药等动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织均为无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件第13页,共77页，2024年2月25日，星期天

1、概念（二）动物细胞核移植第14页,共77页，2024年2月25日，星期天

1、概念

将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）。（二）动物细胞核移植第15页,共77页，2024年2月25日，星期天2、分类第16页,共77页，2024年2月25日，星期天胚胎细胞核移植：体细胞核移植：2、分类第17页,共77页，2024年2月25日，星期天胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易2、分类第18页,共77页，2024年2月25日，星期天胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度高，恢复全能性不容易2、分类第19页,共77页，2024年2月25日，星期天3体细胞核移植过程卵细胞A母绵羊B母绵羊乳腺细胞细胞质细胞核细胞核移植早期胚胎卵裂C母绵羊子宫胚胎移植多莉羊分娩妊娠融合后的卵细胞第20页,共77页，2024年2月25日，星期天

1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？思考

2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？第21页,共77页，2024年2月25日，星期天

1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？MⅡ中期卵母细胞思考

2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？第22页,共77页，2024年2月25日，星期天

1.核移植的受体细胞是什么？处在什么时期？MⅡ中期卵母细胞诱导方法：物理或化学方法激活受体细胞，完成细胞分裂和发育进程。思考

2.通过什么手段激活受体细胞，构建重组胚胎？第23页,共77页，2024年2月25日，星期天4、体细胞核移植技术的应用前景：①在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程②保护濒危物种③医药卫生领域生产医用蛋白质及组织器官的移植④了解胚胎发育和衰老过程；追踪研究

疾病的发展过程和治疗疾病第24页,共77页，2024年2月25日，星期天细胞A细胞B杂种

细胞（三）动物细胞融合第25页,共77页，2024年2月25日，星期天细胞A细胞B杂种

细胞物理法化学法（三）动物细胞融合第26页,共77页，2024年2月25日，星期天细胞A细胞B杂种

细胞物理法化学法（三）动物细胞融合灭活的病毒第27页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式（三）动物细胞融合第28页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。（三）动物细胞融合第29页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞（三）动物细胞融合第30页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性（三）动物细胞融合第31页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激（三）动物细胞融合第32页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)（三）动物细胞融合第33页,共77页，2024年2月25日，星期天1.概念：2.结果：3.原理：4.诱导方式指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。形成单核的杂交细胞细胞膜的流动性物理法：离心、振动、电激化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活的病毒（三）动物细胞融合第34页,共77页，2024年2月25日，星期天5.意义：6.应用：第35页,共77页，2024年2月25日，星期天5.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。6.应用：第36页,共77页，2024年2月25日，星期天5.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。6.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段第37页,共77页，2024年2月25日，星期天5.意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。6.应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体第38页,共77页，2024年2月25日，星期天7．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途第39页,共77页，2024年2月25日，星期天7．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途细胞膜的流动性细胞膜的流动性第40页,共77页，2024年2月25日，星期天7．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后，诱导原生质体融合用胰蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合第41页,共77页，2024年2月25日，星期天7．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后，诱导原生质体融合用胰蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导第42页,共77页，2024年2月25日，星期天7．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途细胞膜的流动性细胞膜的流动性用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后，诱导原生质体融合用胰蛋白酶使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、振动、显微操作、聚乙二醇等诱导与植物体细胞杂交相比，还可用灭活的病毒诱导克服远缘杂交不亲和的障碍，扩展杂交亲本范围，培育新品种制备单克隆抗体、病毒疫苗、干扰素等第43页,共77页，2024年2月25日，星期天（四）单克隆抗体1、概念第44页,共77页，2024年2月25日，星期天（四）单克隆抗体1、概念由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。第45页,共77页，2024年2月25日，星期天2、制备过程第46页,共77页，2024年2月25日，星期天2、制备过程第47页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原2、制备过程第48页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞2、制备过程第49页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞2、制备过程第50页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选2、制备过程第51页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞2、制备过程第52页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养2、制备过程第53页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群2、制备过程第54页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群2、制备过程第55页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群2、制备过程体

外

培

养第56页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群2、制备过程体

外

培

养注

射

到

小

鼠

腹

腔第57页,共77页，2024年2月25日，星期天注射抗原B淋巴

细胞骨髓瘤

细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选,继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群单克隆抗体2、制备过程体

外

培

养注

射

到

小

鼠

腹

腔第58页,共77页，2024年2月25日，星期天3、单克隆抗体的应用第59页,共77页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高3、单克隆抗体的应用第60页,共77页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合3、单克隆抗体的应用第61页,共77页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合优点：准确、高效、简易、快速3、单克隆抗体的应用第62页,共77页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合②用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速3、单克隆抗体的应用第63页,共77页，2024年2月25日，星期天单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高①作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与抗原特异性结合②用于运载药物：制成“生物导弹”治疗疾病：主要用于癌症治疗优点：准确、高效、简易、快速优点：疗效高、毒副作用小3、单克隆抗体的应用第64页,共77页，2024年2月25日，星期天易错点辨析1.容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞第65页,共77页，2024年2月25日，星期天易错点辨析1.容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞

(1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体形成细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。第66页,共77页，2024年2月25日，星期天易错点辨析1.容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞

(1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体形成细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。

(2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。第67页,共77页，2024年2月25日，星期天易错点辨析1.容易混淆的三种细胞——杂种细胞、重组细胞和杂交细胞

(1)杂种细胞：植物体细胞杂交过程中，两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合，融合的原生质体形成细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。

(2)重组细胞：体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。

(3)杂交细胞：动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。第68页,共77页，2024年2月25日，星期天2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的结果及

原理(1)植物体细胞杂交①过程：

②结果:③原理：第69页,共77页，2024年2月25日，星期天2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的结果及

原理(1)植物体细胞杂交①过程：

a.植物细胞融合;b.杂种细胞的植物组织培养。②结果:③原理：第70页,共77页，2024年2月25日，星期天2.植物体细胞杂交和动物细胞融合的结果及

原理(1)植物体细胞杂交①过程：