第二章血液一般检验

第二章血液一般检验

通过本章节学习，你将能回答关于“血液一般检验”的下列问题:

1.红细胞计数有哪些方法？红细胞显微镜计数法原理如何？红细胞计数参考方法是什么？

2.什么是血细胞计数误差？如何减少误差？

3.血红蛋白测定有哪些方法？WHO和ICSH推荐何种参考方法?

4.简述锐化高铁血红蛋白测定法的实验原理？

5.有哪些人为原因可造成红细胞形态异常？

6.血细胞比容的离心沉淀测定有哪些方法？其原理如何？其优缺点？

7.何谓网织红细胞？ICSH将网织红细胞分为几型？外周血中以哪型网织红细胞为主？

8.常见网织红细胞染色方法有几种？网织红细胞活体染色的原理是什么？

9.白细胞计数的方法学评价？

10.白细胞计数时标本采集的质量保证？

11.如何减少白细胞计数的固有误差？

12.如何校正有核纣细胞对白细胞计数的影响？

13.显微镜计数法白细胞计数的质量考核与评价的方法有哪些?

14.白细胞分类计数的方法学评价？

15.中性粒细胞的核象变化及其临床意义?

16.临床常用血栓与止血筛检试验的检查项目有哪些?

17.如何评价出血时间测定的临床应用价值？

18.PT、APTT测定的质量保证环节及主要临床意义？

19.ISI、INR的含义如何？有何主要临床应用？

20.如何从PLT、PT和APTT这三项筛检试验获取临床信息？

21.何谓ABO血型抗体？IgM型血型抗体和IgG型血型抗体的产生及生物学特性有何不同？

22.常用ABO血型鉴定方法有几种？

23.如何区分Rh阳性血型和Rh阴性血型？常规鉴定Rh血型的方法是什么？

24.为什么对有反复输血史和妊娠史的患者要同时使用酶介质法和抗人球蛋白试验配血？

血液一般检验是指血液检验项目中最基础及最常用的检验，主要包括手工或仪器血细胞计数及相关参

数测定、血细胞形态学检查、最常用凝血试验、交叉配血等。随着科学技术的发展，自动化仪器已应用到

血液一般检验工作中，使血液一般检验测定快速、项目扩展、参数增多。因此，血液一般检验能及时、准

确、随机、全面反映机体的基本功能状况。血液•般检验取材容易，检测便捷，仍然是筛检疾病、遴选其

他实验检杳的首要程序。

第一节红细胞检查

红细胞是血液中数量最多的有形成分，其主要生理功能是作为携氧或二氧化碳的呼吸载体和维持酸碱

平衡等。临床可通过各项红细胞参数检验和红细胞形态观察对贫血和某些疾病进行诊断或鉴别诊断。

常用的红细胞检杳项目有：红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞形态观察、红细胞平均参数计算、网

织红细胞计数、嗜碱性点彩红细胞计数和红细胞沉降率测定等。红细胞检验的临床应用价值见表2-1。

表2-1红细胞检查的临床应用

红细胞检查项目临床应用

红细胞计数、血红蛋白测定、血细胞比容测定和红细胞平均参数计算贫血的诊断与形态学分类

网织红细胞计数骨髓造血功能评价

血沉测定动态观察疾病变化

红细胞计数、血红蛋白测定及网织红细胞计数放化疗、干扰素、抗生素治疗监

测

嗜碱性点彩红细胞计数职业病防护(重金属中毒监测等)

一、红细胞计数

红细胞计数(redbloodcellcount,RBC)是血液一般检验的基本项目，常作为诊断贫血及红细胞增

多的主要指标之一。

【检测原理】

1.显微镜计数法采用等渗稀释液将血标本稀释一定倍数，滴入血细胞计数室中，显微镜下计数一定

区域内红细胞数，经换算得每升血液中红细胞数量。

2.血液分析仪法多采用电阻抗法，也有采用流式细胞术激光检测法等。

【方法学评价】红细胞计数方法评价见表2-2。

表2-2红细胞计数法的方法学评价

方法优点缺点适用范围

显微镜计数法传统方法，设备简费时费力，精密度低为血液细胞计数和分类的参考方法；

单，价廉

用于血液分析仪异常检查结果复核

血液分析仪法操作便捷，易于标价贵；环境条件要求较健康人群普查；大批量标本筛检

准化，精密度高高

【质量保证】血细胞计数误差可来源于技术误差、仪器误差和分布误差，可通过消除或减少误差进行

红细胞计数的质量控制（表2-3）。

表2-3血细胞计数误差的种类及消除方式

误差种类原因误差减少方法

技术误差采血部位不当、稀释倍数不准、充液不当、血液凝规范操作、正确使用器材、提高操作

固、器材处理及使用不当和细胞识别错误等技能

仪器误差器材.（计数板、盖片、吸管等）不准确、不精密等校正各种器材

分布误差血细胞在计数池分布不均匀等扩大细胞计数范围和（或）数量

【参考值】①成年：男性(4.09〜5.74)XlO'VL,女性(3.68〜5.13)X10'7Lo②新生儿(5.2~

6.4)X107L.③婴儿(4.0-4.3)X10'7L.④儿童(4.0-4.5)X10'7L.

【临床意义】

1.生理性变化红细胞数量受到许多生理因素影响，但与相同年龄、性别人群的参考值相比，一般在

土20%以内。

（1）增多：主要见于机体缺氧如新生儿（增35%）、高山居民（增14%）、登山运动员、剧烈运动和体

力劳动等；雄激素增高成年男性高于女性；肾上腺皮质激素增多如精神因素如情绪波动等；长期重度吸烟:

静脉压迫时间＞2min（增10%）：毛细血管血比静脉血测定结果高（增高10215%）；日内差异（上午7时最

高）；肾上腺素、糖皮质激素药物等。

（2）减低：主要见于生理性贫血，生长发育造血原料相对不足如6个月〜2岁婴儿、造血功能减退如

老年人、血容量增加如孕妇（减少达16%）、长期饮酒（减少约596）。

2.病理性变化

（1）病理性增多：①相对性增多：暂时性血液浓缩如呕吐、高热、腹泻、多尿、多汗、大面积烧伤等。

②绝对性增多：包括继发性增多的组织缺氧EP0代偿性增高，如严重慢性心肺疾病、发绡性先天性心脏病、

异常血红蛋白病等；EPO非代偿性增高如与某些肿瘤和肾脏有关的疾病如肾癌、肝细胞癌、子宫肌瘤、卵

巢癌、肾胚胎瘤、肾积水、多囊肾和肾移植后等。原发性如真性红细胞增多症、良性家族性红细胞增多症

等。

（2）病理性减少：见于各种原因导致的贫血（定义为红细胞计数、血红蛋白测定或血细胞比容低于参考

值下限）。贫血的病因诊断较为困难，一般应结合临床和进一步检查。按病因可将贫血分为3大类。

1）红细胞生成减少：如骨髓功能衰竭的再生障碍性贫血（造血干细胞减少）、急性造血功能停滞（造

血干/祖细胞受抑制）等；造血物质缺乏或利用障碍如肾性贫血（造血调控因子缺乏）、缺铁性贫血（铁缺

乏）、铁粒幼细胞贫血（铁利用障碍）、巨幼细胞贫血（叶酸、维生素h缺乏性DNA合成障碍）等。

2）红细胞破坏过多：①红细胞内在缺陷如膜缺陷的遗传性球形、椭圆形、口形、棘形红细胞增多症。

②红细胞酶缺陷如遗传性红细胞G-6-PD缺乏症、遗传性红细胞内附酸激酶缺乏症等。③血红蛋白异常如珠

蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞贫血、血红蛋白C、D,E（HbC,D,E）病（珠蛋白合成减少）。④不稳定

Hb所致溶血性贫血（珠蛋白结构异常）、阵发性睡眠性血红蛋白尿症（红细胞对补体过敏）。④红细胞外在

异常如免疫反应引起的贫血如新生儿溶血病、血型不合输血后溶血病、药物性免疫性溶血性贫血。⑤机械

性损伤如红细胞破碎综合征、行军性血红蛋白尿；高温烧伤所致溶血性贫血、药物和化学毒物所致溶血性

贫血、疟疾和多种细菌所致溶血性贫血、脾功能亢进所致溶血性贫血。

3）红细胞丢失（失血）：如急性、慢性失血性贫血。

此外，药物也可引起贫血：①抑制骨髓的药物如阿司匹林、链霉素、消炎痛、洋地黄、苯妥英钠等。

②引起维生素以、叶酸吸收障碍的药物如口服避孕药、雌激素、降糖灵、新霉素、异烟肿等。③引起铁吸

收障碍药物如皮质类固醇等。④引起溶血的药物如头泡类、氨基虱类抗生素、磺胺药、抗过敏药、维生素

A/K、奎尼丁类、水杨酸类、速尿、异烟肿、利福平、驱蛔灵、马利兰等。

红细胞计数医学决定水平：高于6.8X10,7L,应采取相应治疗措施；低于3.5X10'7L可诊断贫血；低

于L5X1012/L应考虑输血。

二、血红蛋白测定

血红蛋白（hemoglobin,Hb或HGB）是红细胞的运输蛋白，其主要功能是吸收肺部大量的氧，并将其

输送到身体各组织。通过铁含量可初步估计血红蛋白量，0.347g铁相当于100g血红蛋白。血红蛋白相对分

子量为64458,单体为16114,毫摩尔消光系数为11.0。每克血红蛋白可携带1.34ml氧。

Hb是在人体有核红细胞及网织红细胞内合成的一种含色素辅基的结合蛋白质。Hb的4条珠蛋白肽链每

条可结合1个亚铁血红素，形成具有四级空间结构的四聚体可结合0?和CO?。生理条件下，99%Hb的铁呈Fe*

状态，称为还原血红蛋白（deoxyhemoglobin）；亚铁状态的Hb与氧结合称氧合血红蛋白（oxyhemoglobin）；

Vfflb的铁呈Fe"状态，称为高铁血红蛋白（hemiglobin,Hi）。如血红素第6个配位键被CO、S等占据，则

形成各种血红蛋白衍生物。C0与Hb结合形成碳氧血红蛋白（carboxyhemoglobin,HbCO）,结合力比氧结

合力高240倍；在含有苯脏和硫化氢的环境中HbO2即转变为硫化血红蛋白（SHb）,后者也见于服用阿司匹林

或可待因的患者。

【检测原理】HiCN法检测原理：在溶血液中，血红蛋白(SHb除外)中的亚铁离子(Fe")被高铁氟化

钾氧化为高铁离子(Fe"),血红蛋白转化成高铁血红蛋白(Hi)。Hi与氟化钾(KCN)中的鼠离子反应生成

HiCN.HiCN最大吸收波峰为540nm,波谷为504nm。在特定条件卜.，毫摩尔消光系数为44L/HiCN

在540nm处的吸光度与溶液中的浓度成正比，根据测得吸光度可求得待测标本的血红蛋白浓度。反应在

18C〜25匕中进行，加入非离子表面活性剂可加快红细胞的溶解，减少脂蛋白沉淀产生的溶液浑浊。

【检测方法】血红蛋白测定大致分为4类(表2-4)。常用的比色法有氟化高铁血红蛋白

(hemiglobincyanide,HiCN)测定法、十二烷基硫酸钠血红蛋白(sodiumdodecylsulfatehemoglobin,

SDSTIb)测定法、碱羟血红蛋白(alkalinehaematindetergent,AHD-於)测定法、叠氮高铁血红蛋白(HiN3)

测定法、溟代十六烷基三甲胺(CTAB)血红蛋白测定法等。为统一Hb测定方法，1966年国际血液学标准委

员会(InternationalCouncilforStandardizationinHaematology,ICSH)推荐HiCN测定法作为Hb

测定标准法。1978年国际临床化学联合会(InternationalFederationofClinicalChemistry,IFCC)

和国际病理学会(InternationalAcademyofPathology,LAP)联合发表的国际性文件中重申了HiCN法。

表2-4血红蛋白测定方法及基本原理

测定方法测定原理

全血铁法Hb分子组成

比重法、折射仪法血液物理特性

血气分析法Hb与Oz可逆性结合的特性

比色法(临床常用)Hb衍生物光谱特点

【方法学评价】HiCN测定法是WHO和ICSH推荐的参考方法，由于HiCN试剂含剧毒的氟化钾，各国均

相继研发了不含氟化钾的测定血红蛋白方法，如叠氮钠、氧合血红蛋白法(HbOJ、碱性血红素法，十二烷

基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb)等，结果稳定，准确。有的测定法已用于血液分析仪上，但其标准应溯源到

HiCN量值。血红蛋白测定的方法学评价见表2-5。

表2-5血红蛋白测定的方法学评价

测定方法优点缺点

测定法

HiCN参考方法、操作简单、反应速度试剂KCN有剧毒、高白细胞/高球蛋白血症标本可

快、可检测除SHb之外的所有Hb、致浑浊、对HbCO的反应慢(100min)＞不能测定硫

产物稳定便于质控化血红蛋白

SDS-H测定法次选方法、操作简单、呈色稳定、SDS质量差异大、消光系数未定、SDS易破坏白细

试剂无毒、结果准确重复性好胞，不适于同时进行白细胞计数的血液分析仪

AMDs"测定法试剂简易，不含毒性，呈色稳定，575nm波长比色、不便于自动检测、HbF不能转化

准确性与精确性较高

HiNs测定法准确度、精密度较高试剂仍有毒性(为HiCN的1/7)、HbCO转化慢

(20min)

CTAB测定法溶血性强且不破坏白细胞，适于精密度、准确性略较低

血液分析仪检测

【质量保证】

1.标本血红蛋白检测原理是比色法，引起血清浊度增大的因素常致血红蛋白浓度假性增高，如高脂

血症、高球蛋白、高白细胞(WB030X107D,HbCO增多及高血小板(PLT>700X109/L)等。

2.器材及试剂定期校准分光光度计，选用合格的微量采血管和刻度吸管及比色杯。注意保证试剂质

J3.

里。

3.技术操作消毒、采血、稀释、混匀等要求同红细胞计数。确保HbCO完全转化，可延长转化时间或

加大试剂中KFe(CN)-的用量。

5.废弃物HiCN转化液中氟化钾是剧毒品，配制转化液时要按剧毒品管理程序操作。为防止氟化钾污

染环境，比色测定后的废液应妥善处理。

【参考值】①成年：男性131~172g/L,女性113〜151g/L②新生儿考0〜190g/L③婴儿：110〜

120g/L«④儿童：120〜140g/L。⑤老年(>70岁)：男性94-122g/L,女性87~112g/L«

【临床意义】血红蛋白测定的临床意义与红细胞计数相似，但判断贫血程度优于红细胞计数。应注意：

1.在某些贫血，红细胞和血红蛋白减少程度可不一致，同时测定红细胞数和血红蛋白量以作比较，

对诊断更有意义。

2.影响检验结果的因素①血液总容量改变。如大量失血早期主要变化是全身血容量减少，此时血液

浓度改变很少，从测定红细胞和血红蛋白的数值来看，很难反映贫血的存在。②全身血浆容量改变。如各

种原因引起的失水或水潴留，使血浆容量减少或增加，造成血液浓缩或稀释，均可使红细胞和血红蛋白数

值增加或减少。

三、红细胞形态检杳

各种原因可作用于红细胞生理进程的不同阶段，从而引起红细胞相应的病理变化，导致某些类型贫血

的红细胞发生形态学的变化。这些变化包括红细胞大小、形状、染色性质和内涵物的异常，因此红细胞形

态检查常作为追踪贫血线索的一项重要检查内容，其与血红蛋白浓度测定、红细胞计数结果及其他参数相

结合可以推断贫血的性质，对贫血的诊断和鉴别诊断有重要的临床价值。

【检测原理及方法学评价】

1.显微镜分析法对红细胞形态的识别，特别是异常形态的鉴别，主要采用人工显微镜法血涂片染色

观察，是仪器法校准的参考方法和检测的复核方法。

2.计算机图像分析基于计算机图像处理技术，对红细胞形态和图像特征进行分析，建立红细胞形态

变化特征分布统计模型，实现红细胞形态特征的自动统计分类。能快速自动以正常红细胞形态为参比、按

红细胞形态特征作出类型和比例统计分析。可用于与红细胞形态变化相关疾病的辅助诊断。

3.血液分析仪法能提供红细胞数量及其他相关参数，并对异常结果予以报警提示，但不能直接提供

红细胞形态改变的确切信息，需用镜检血涂片核实。

【质量保证】

1.有合格的血液细胞形态检验人员经严格培训有理论有实践经验的血细胞检验人员是细胞形态学检

查质量保证的前提。

2.选择细胞分布均匀区域进行镜检理想红细胞均匀分布区域是红细胞之间相近排列而不重叠。

3.注意完整规范的检杳顺序应先在低倍镜卜一检杳血涂片，观察细胞分布和染色情况，再用油镜观察

血膜体尾交界处的细胞形态，同时浏览是否存在其他异常细胞，如幼稚细胞或有核红细胞等。

4.减少人为影响因素应认真浏览全片，排除人为因素影响。一般真正的异形红细胞均匀分布于全片,

而假性异形红细胞常局限于个别区域(表2-6)。

表2-6人为原因造成的红细胞形态异常

人为原因红细胞形态异常

涂片不当棘形红细胞、皱缩红细胞、红细胞缗钱状形成等

使用非疏水性玻片口形红细胞

染色不当嗜多色红细胞

抗凝剂EDTA浓度过高，或长时间放置血液锯齿状红细胞

涂片干燥过慢，或由于固定液中混有少许水分面包圈形红细胞

涂片末端附近长轴方向一致的假椭圆形红细胞

【临床意义】

1.正常红细胞形态正常分：细胞呈双凹圆盘形，细胞大小均一，平均直径7.2um(6.7〜7.7um)；瑞氏

染色后为淡粉红色，血红蛋白充盈良好，呈正常色素性，向心性淡染，中央部位为生理性淡染区，大小约

为直径的1/3；胞质内无异常结构（图2-1,图2-2）。正常红细胞形态虽见于健康人，但也可见于急性失血

性贫血、部分再生障碍性贫血等。

2-1扫描电镜正常红细胞形态

图2T扫描电镜正常红细胞形态

图2-2正常红细胞形态

图2-2正常红细胞形态

正常红细胞可自然退化变性，即使是高质量的血涂片和染色，在正常血涂片上也可见到变形或破碎的

细胞，但数量很少，分布极为局限。

2.异常红细胞形态在排除人为因素后，若血涂片中出现异常形态红细胞且数量增多，往往提示病理

性改变。常见红细胞异常形态传统上可分为红细胞大小、形状、血红蛋白含量、结构和排列异常（表2-7〜

表2-10,图2-3〜图2-15）。

红细胞异常形态新方法分为：①异常红细胞：红细胞大小不均和红细胞形态不整、大红细胞、小红细

胞、嗜碱性点彩红细胞。②血红蛋白形成不足：低色素红细胞、红细胞着色不•和双相红细胞群体。③红

细胞形成后损伤：高色素红细胞、球形红细胞、不规则完整红细胞、椭圆形红细胞和卵圆形红细胞。④刺

红细胞和红细胞碎片：裂片红细胞、角红细胞、棘红细胞、刺红细胞。⑤红细胞增生性变化：多色素红细

胞、幼稚红细胞。⑥其他异常：环形红细胞（薄红细胞）、靶形红细胞、口形红细胞、镰形红细胞、血红蛋

白C结晶和SC红细胞形态不整、红细胞包涵体（H-J小体、Pappenheimer小体）、红细胞缗钱状和自身聚

集。

表2-7红细胞大小异常的机制及临床意义

异常红细胞形态改变可能机制临床意义

小红细胞直径V6nm①中央染色过浅:Hb合成隙碍。①缺铁性贫血、珠蛋白生成隙碍

microcyte②中央淡染区消失（球形细胞）性贫血。遗传性球形细胞增多症

大红细胞直径＞10um,①早期脱核的年轻RBC.②叶①RBC生成加速。②巨幼细胞性贫

macrocyte中央染色深酸及VitB”缺乏。③胞膜胆固血、溶血性贫血等。③肝病、脾切

醇/磷脂酰胆碱比值增加除后

巨红细胞直径＞15um同上巨幼细胞性贫血，肝病

megalocyte

细胞大小不均RBC之间直径①骨髓造血功能紊乱、造血调①严重增生性贫血（尤为巨幼细胞

anisocytosis相差1倍以上控功能减弱。②推片不当性贫血）。②人为推片破坏

表2-8红细胞形状异常的机制及临床意义

异常红细胞形状改变可能机制临床意义

球形红细胞直径V6um,厚度常RBC膜先天性或后天性①遗传性球形细胞增多症（＞20%）

spherocyte＞2.6mn（＞似小圆球异常而部分丢失，表面②自身免疫性溶血性贫血

状，无中心淡染区积/体积比值减小③异常血红蛋白病（HbS,HbC病）

椭圆形红细胞RBC短径/长径v与细胞骨架蛋白异常有①遗传性椭圆形红细胞增多症（＞

elliptocyte0.78,椭圆形、杆形关25%）.②各种溶血性贫血

靶形红细胞中央深染，外围苍白，①Hb组合和结构变异。①各种低色素性贫血，尤其珠蛋白

targetcell边缘又深染，呈靶状②脂质异常生成障碍性贫血②阻塞性黄疸、

或牛眼状脾切除后、肝病

口形红细胞中心苍白区呈扁平细胞膜先天性缺陷，Na-①遗传性口形红细胞增多症

stomatocyte状，形似张开的嘴巴通道异常，细胞内钠显10%）o②溶血性贫血及肝病

或鱼口著增高

镰形红细胞镰刀状缺氧时，HbS溶解度降镰状细胞性贫血

sicklecel1低，形成长形/尖形结晶

体，使胞膜变形

棘红细胞细胞表面针状或指状磷脂代谢异常：胞膜胆①严重肝细胞疾病

acanthocyte突起，尾端略圆，间固醇/磷脂酰胆碱比值②先天性6-脂蛋白缺乏症

/spur距长宽不等增加③偶见McLeod表型

cell/spine④脾切除后

cell⑤慢性饥饿

⑥神经性厌食

棘球样红细胞细胞周边呈钝锯齿制片不当制片不当、高渗等：尿毒症、丙酮

echinocyte形，突起排列均匀、高渗等酸激酶缺乏症、红细胞内低钾、胃

或锯齿状红细大小一致，外端较尖可能膜脂质异常癌、出血性溃疡

胞crenated

/burr/sea-ur

chin/hedgeho

gcel1

泪滴形细胞泪滴样或梨状①RBC含有Heinz小体骨髓纤维化（多见）、其他贫血（少

teardrop或包涵体。②RBC膜某点见）、骨髓病性贫血、制片不当（细

cell/dacrocy粘连拉长。③制片不当胞尖指向相同方向）

te

新月形红细胞新月形，D=20um,蒸储水实验：RBC内渗透某些溶血性贫血，如PNH

meniscocyte着色极淡压高，水分吸入使体积

胀大，推片时细胞破裂

角形红细胞细胞表面有数个粗大RBC受到机械损害弥散性血管内凝血、血管内纤维沉

keratocyte的角样大突起，形态积症、微血管病性贫血（DIC）、肾

/helmet不一小球肾炎、尿毒症和移植后

cell/bite

cell

裂片红细胞大小不一，外形不规RBC通过因阻塞而管腔弥散性血管内凝血、微血管病性溶

schistocyte/则狭小的微血管所致血性贫血、严重烧伤

fragmented

redcell

红细胞形态不RBC形态发生无规律原因未明，可能与化学某些感染或严重贫血，最常见于巨

整的明显改变因素或物理因素有关幼细胞性贫血

poikilocytos

is

表2-9红细胞血红蛋白含量异常的机制及临床意义

异常红细胞形态改变可能机制临床意义

低色素性生理性中心淡染区Hb含量明显减少缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性

hypochromia扩大，染色淡贫血、铁粒幼细胞性贫血、某些

血红蛋白病

高色素性中心淡染区消失，整Hb含量增高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血

hyperchromi个RBC着色较深

a

嗜多色性RBC呈淡灰蓝色或灰①胞质内少量RNA与Hb并①各种增生性贫血

polychromas红色，胞体略大，相存，提示骨髓造血功能活跃②涂片过厚或陈旧、染液过浓

ia当于活体染色的Ret②人为染色不当

细胞着色不同•血涂片RBC中，Hb充盈度偏离较大铁粒幼红细胞性贫血

色素不一致

anisochromi

a

表2-10纤细胞异常结构及排列异常的机制及临床意义

异常红细胞形态改变可能机制临床意义

豪焦小体胞质内含1〜2um的核碎裂或溶解后所剩残余①脾切除、无脾症、脾萎缩、

Howell-Jolly暗紫红色圆形小体部分，常与卡波环同时存在脾功能低卜"②红白血病和某

body些贫血患者：巨幼细胞贫血易

见。③溶血性贫血

卡波环RBC胞质中紫红色细①核膜的残余物或纺锤体恶性贫血、溶血性贫血、铅中

Cabotring线圈状结构，呈环形的残余物。②胞质中脂蛋白毒、白血病、巨幼细胞性贫血、

或8字形变性增生性贫血和脾切除后

嗜碱性点彩红胞质内灰蓝色点状①金属损伤RBC膜，使嗜碱铅中毒、珠蛋白生成障碍性贫

细胞颗粒，形态大小不性物质凝集，变性。②Hb血

basophilic一、多少不等合成时原咋咻与亚铁结合

stipplingcell受阻

有核红细胞有核红细胞即幼稚代偿性释放或释放功能紊溶血性贫血、白血病、严重缺

nucleated红细胞乱氧、

erythrocyte骨髓转移性肿瘤

缗钱状形成RBC重叠，如缗钱状①血浆中纤维蛋白原和球①多发性骨微瘤、巨球蛋白血

rouleaux蛋白含量增高，减弱了RBC症等。②涂片过厚

formation间相互排斥力。②人为涂片

不当

红细胞自凝RBC出现聚集、凝集冷凝集素或免疫性因素等冷凝集素综合征，自身免疫性

self­成堆或成团现象溶血性贫血

agglutinating

红细胞大不均

图2-3红细胞大小不均

巨红细胞

图2-4巨红细胞

球形红细胞

图2-5球形红细胞

椭圆形红细胞

图2-6椭圆形红细胞

靶形红细胞

图2-7靶形红细胞

棘形红细胞

图2-8棘形红细胞

泪滴形红细胞

图2-9泪滴形红细胞

缗钱状形成

图2-10缗钱状形成

嗜多色红细胞

图2-11嗜多色红细胞

嗜碱点彩红细胞

图2T2嗜碱性点彩红细胞

染色质小体

图2-13染色质小体

卡波环

图2T4卡波环

有核红细胞

图2-15有核红细胞

四、血细胞比容测定

血细胞比容(hematocrit,Het,HCT；packedcellvolume,PCV)是指一定体积的全血(毛细血管或

静脉血)中红细胞所占体积的相对比例。HCT的高低与红细胞数量及平均体积、血浆量有关，主要用于贫

血、真性红细胞增多症和红细胞增多的诊断、血液稀释和血液浓缩变化的测定、计算红细胞平均体积和红

细胞平均血红蛋白浓度等。

【检测原理】HCT直接测定用离心法，间接测定用血液分析仪法。

1.离心沉淀法常用微量（microhematocrit）法和温氏（Wintrobe）法，其检测原理基本相同。以不

改变红细胞体积及血容量的抗凝剂处理全血，注入标准毛细玻璃管或Wintrobe管，用一定转速离心一定时

间后，读取红细胞层的高度。血液离心后分5层，自上而下分别为血浆层、血小板层、白细胞和有核红细胞

层、还原红细胞层和氧合红细胞层。读取结果以还原红细胞层为准（图2-16）。

图2-16血细胞比容结果判断

图2-16血细胞比容结果判断

2.血液分析仪法由测定红细胞计数和红细胞平均体积后导出，HCT=红细胞计数X红细胞平均体积。

【方法学评价】HCT检测的方法学评价见表2-11。

表2T1HCT检测的方法学评价

方法优点缺点

温氏法（离心法）应用广泛，无须特殊仪器难以完全排除残留血浆（可达2%〜3%）,

单独采血用血量大。已渐被微量法取代

微量法（离心法）WHO推荐为常规方法,NCCLS（II7-A3）推需微量高速血液离心机

荐为参考标准。标本用量少，相对离心

力高，结果准确、快速、重复性好

微量离心ICSH（2003）推荐的测定HCT的替代参需用参考方法测定全血Hb和压积红细Hb

计算法考方法，可常规用于HCT测定的校准。浓度。HCT=全血Hb/压积红细Hb

计算公式:HCT=（离心HCT值-0.0119）

/0.9736

血液分析仪法无须单独采血测定，检查快速，精密度准确性不及微量离心法,需定期校正仪器

高

放射性核素法ICSH曾推荐为参考方法，准确性最高方法繁琐、特殊，不适用于临床常规检查

【质量保证】

1.操作规范化避免操作误差，如抗凝量不准，混匀不充分，离心速度不均等。

2.注意干扰因素①假性增高：红细胞形态异常（如小红细胞、大红细胞、球形红细胞、椭圆形红细

胞或镰形红细胞等）和纤细胞增多时应注明，因红细胞的变形性减低和数量增多可使血浆残.留量增加：高

网织红细胞或高白细胞等也可使HCT假性增高。②假性降低：体外溶血、自身凝集等。

【参考值】男性:0.380〜0.508；女性：0.335〜0.450。

【临床意义】HCT的临床意义与红细胞计数相似。HCT减低是诊断贫血的指标，若红细胞数量正常，血

浆量增加，为假性贫血；HCT增加可因红细胞数量绝对增加或血浆量减少所致。HCT的主要应用价值为:

1.临床补液量的参考各种原因导致脱水时，HCT都会增高，补液时可监测HCT,HCT恢复正常表示血

容量得到纠正。

2.真性红细胞增多症诊断指标当HCT大于0.7,RBC为(7~10)X1012/L,Hb大于180g/L,即可诊

断。

3.红细胞平均指数计算的基础数据红细胞平均值(MCV、MCHC)可用于贫血的形态学分类。

4.血液流变学指标HCT增高表明红细胞数量偏高，可导致全血黏度增加，严重者表现为高黏滞综合

征，易引起微循环障碍、组织缺氧。HCT与其他血液流变学指标联合应用，可对一些血栓前状态进行监测。

五、红细胞平均指数

红细胞平均指数包括红细胞平均体积(meancorpuscularvolume,MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(mean

corpuscularhemoglobin,MCH)和平均灯:细胞血红蛋白浓度(meancorpuscularhemoglobinconcentration,

MCHC)。红细胞平均指数有助于深入认识红细胞特征，为贫血的鉴别诊断提供线索

【检测原理】

1.手工法红细胞平均指数根据RBC、Hb、HCT测定结果计算出来(表2-12)。

表2-12红细胞平均指数的计算

指数含义计算公式小位

MCV全部红细胞体积的平均值飞升(fl)

lfl=10-15L

MCH全部红细胞血红蛋白含量的平均皮克(pg)lpg=

值1012g

MCHC全部红细胞血红蛋白浓度的平均g1.

值

2.血液分析仪法MCV由血液分析仪直接测定导出；由仪器测定HGB、RBC可计算出MCH=HGB/RBC；MCHC

=HGB/(RBCXMCV)o

【方法学评价】

1.手工法红细胞平均指数测定由RBC、HGB、HCT测定后计算，因此，必须用同一抗凝血标本，且所测

数据必须准确。仪器法红细胞平均指数测定同样依赖于RBC、HGB和MCV测定的准确性。

2.红细胞平均指数仅反映红细胞群体平均情况，无法阐明红细胞彼此之间的差异，对一些早期贫血(如

缺铁性贫血)也缺乏敏感性。如缺铁性贫血合并巨幼细胞性贫血时，小红细胞MCV、MCH可小至50日、15pg,

而大红细胞MCV、MCH又可分别达150fl、50pg,而MCHC却无明显变化，总体计算MCV、MCH也可在正常范

围；缺铁性贫血和轻型珠蛋白合成障碍性贫血都表现为小细胞低色素，但血涂片上却见缺铁性贫血的红细

胞明显大小不均。

【参考值】MCV、MCH、MCHC的参考值见表2-13。

表2-13MCV、MCH、MC1IC参考值

人群MCV(fl)MCH(pg)MCHC(g/L)

成年人男83.9—99.127.8〜33.8320〜355

女82.6—99.126.9〜33.3322〜362

1〜3岁79〜10425〜32280〜350

新生儿86〜12027〜36250〜370

【临床意义】纤细胞平均指数可用于贫血形态学分类（表2-14）及提示贫血的可能原因。①MCV可将

红细胞按平均体积分为正细胞、小细胞和大细胞。②MCH常用于贫血分类。在大多数贫血中，MCH与MCV相

关：小细胞贫血与低色素相关，正细胞与正色素相关，很少有MCH增高而MCV不增高的情况。③MCHC反映

了红细胞中血红蛋白的浓度，在许多造血系统疾病中，MCHC仍保持恒定。

表2T4贫血形态学分类及临床意义

贫血形态学分类MCVMCHMCHC临床意义

正常细胞性贫血正常正常正常急性失血、急性溶血、再生障碍性贫血、白血病等

大细胞性贫血增高增高正常叶酸、维生素以缺乏或吸收障碍

单纯小细胞性贫血降低降低正常慢性炎症、尿毒症

小细胞低色素性贫降低降低降低铁缺乏、维生素B.缺乏、珠蛋白生成障碍性贫血、慢

血.性失血等

六、网织纤细胞计数

网织红细胞（reticulocyte,Ret）是介于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡阶段细胞，略大于成熟

红细胞（直径8.0〜9.5um）,其胞质中残存的嗜碱性物质核糖核酸（RNA）源自有核红细胞。RNA是嗜碱性

物质，经碱性染料（如天青B、煌焦油蓝或新亚甲蓝等）活体染色后，形成蓝色或紫色的点粒状或丝网状

结构沉淀物，故名网织红细胞。网织红细胞白骨髓释放到外周血后仍具有合成血红蛋白的能力，约1〜2d

后，其核酸物质消失殆尽，过渡为成熟红细胞。

在红细胞发育过程中，RNA含量有明显规律性变化，即由原始阶段较为丰富，然后逐渐减低，至细胞

完全成熟后消失或接近消失，即红细胞中网线状结构越多，表示细胞越幼稚。ICSH将Ret分为4型（表2-15,

图2-17）。

表2-15网织红细胞分型及特征

分型形态特征正常存在部位

1型（丝球型）RBC儿乎被网织物充满仅在正常骨髓

II型（网型）位于RBC中央线团样结构松散大量存在于骨髓，外周血很难见到

in型（破网型）网状结构稀少，呈不规则枝点状排列少量存在于外周血中

W型（点粒型）嗜碱性物质少，呈分散的细颗粒、短丝状主要存在于外周血中

图2-17网织红细胞

图2T7网织红细胞

【检测原理】网织红细胞的核糖核酸以弥散胶体状态存在。常规血细胞染色法（如Wright染色）在

涂片及染色过程中对细胞进行了固定，使网织红细胞的核酸物质即使着色也难于在普通显微镜下识别。网

织红细胞须经活体或荧光染色后才可用显微镜识别或经仪器计数分类。

1.普通显微镜法活体染料（新亚甲蓝或煌焦油蓝）的碱性着色基团（带正电荷）可与网织红细胞RNA

的磷酸基（带负电荷）结合，使RNA胶体间的负电荷减少而发生凝缩，形成蓝色的点状、线状或网状结构。

2.仪器法包括流式细胞法网织红细胞计数仪和血液分析仪法。荧光染料与网织红细胞中RNA结合，

发出特定颜色的荧光进行RNA定量，可精确计数网织红细胞占成熟红细胞的百分数（Ret*）。仪器还可据

RNA含量荧光强度将网织红细胞分成低荧光强度网织红细胞（lowfluorescentreticulocyte,LFR）、中

荧光强度网织红细胞（middlefluorescenlreticulocyte,MFR）和高荧光强度网织红细胞（high

fluorescentreticulocyte,HFR）三类，并计算网织红细胞其他参数。

【方法学评价】网织红细胞计数的方法学评价见表276。

表2-16网织红细胞计数方法学评价

检测方法评价

普通显微镜法简便、成本低，可直观细胞形态；影响因素多，重复性差

玻片法水分易蒸发，染色时间短，结果偏低

试管法易掌握，重复性较好，易复查

米勒窥盘计数法规范计算区域，减少了实验误差，ICSH推荐方法

仪器法检测细胞多，精密度高，与手工法相关性好、易标准化。仪器贵；在出现H-J

小体、有核红细胞、巨大血小板时结果常假性增高

【质量保证】以手工计数法为重点。

1.染料选择用了网织红细胞计数的活体染料很多，有新亚甲蓝、煌焦油蓝、中性红等，其评价见表

2-17。

表2-17手工法网织红细胞活体染色染料评价

染料评价

新亚甲蓝WHO推荐使用，对RNA着色强、试剂稳定，Hb几乎不着色

煌焦油蓝溶解度低，染料沉渣易附着红细胞表面，影响辨认：易受变性珠蛋白小体、HbH包涵体干

扰

中性红染液浓度低、背景清晰、网织颗粒与Hb对比鲜明；不受变性珠蛋白小体、HbH包涵体干

扰

2.正确辨认网织红细胞外周血中网织红细胞主要为IV型，凡含有2个以上网织颗粒红细胞均应计为网

织红细胞。

3.网织红细胞计数方法

（1）Miller窥盘：普通显微镜计数时，为缩小分布误差，降低劳动强度，ICSH及我国卫生部临床检

验中心推荐使用Miller窥盘（图2-18）进行网织红细胞计数。

（2）显微成像系统：借助计算机和细胞形态分析软件，根据细胞内网织颗粒的数量多少，对网织红细

胞进行分群：①HFR：粗颗粒堆积成网状。②MFR：粗颗粒在10个以上，或细小颗粒超过15个。③LFR：细胞

内含15个以下细小颗粒。

图2-18Miller窥盘结构示意图

（A为红细胞计