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文档简介
专题二微生物的培养与应用课题一微生物的试验室培养入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固剂)后,制成琼脂固·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。·氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N₂、NH氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。只有固氮微生物才能运用N₂。时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是无菌技术除了用来防止试验室的培养物被其他外来微生物消毒指使用较为温和的物理或化学措施仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒措施常用煮沸消毒法,巴氏消毒法(对于某些不耐高温的液体)尚有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、紫外线消毒。②玻璃器皿、金属用品等使用干热灭菌法,所用器械是干热灭菌箱;③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法,所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法,所用器械是紫外灯。比较项理化原因的作用强度芽孢和孢子能否被消灭消毒较为温和部分生活状态的微生物不能灭菌强烈能(1)措施环节:计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。(2)倒平板操作的环节:③用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍不小于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20mL)倒入培养皿,左手立即盖上培养④等待平板冷却凝固,大概需5~10min。然后,将平板倒过来放置,使培养皿盖在下、皿1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。你用什么措施来估计培养基培养微生物吗?为何?(1)微生物接种的措施最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。(2)平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面持续划线的操作。将汇集的菌种逐渐(3)稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释,然后将不一样稀释度的菌液分别涂(4)用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是:使汇集在一起的微生物分散成单个细(5)平板划线法操作环节:⑤将试管通过火焰,并塞上棉塞。⑥左手将皿盖打开一条缝隙.,右手将沾有菌种的接种环灼烧接种环吗?为何?3.在作第二次以及其后的划线操作时,为何总是从上一次划(6)涂布平板操作的环节:③将沾有少许酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s。想一想,第2步应怎样进行无菌操作?(1)对于频繁使用的菌种,可以采用临时保藏的措施。放入4℃的冰箱中保藏。后来每3~6个月,都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的(2)对于需要长期保留的菌种,可以采用甘油管藏的措施。(1)生物的营养(2)确定培养基制作与否合格的措施课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数素分解成氨之后,才能被植物运用。土壤中的细菌之因此能分解尿素,是由于他们能合成(1)试验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有助于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等),同步克制或制止其他微(2)选择性培养基(3)配制选择培养基的根据不加入有机物可以选择培养自养微生物;培养基中不加入氮元素,可以选择培养能固氮的(2)稀释涂布平板法记录样品中活菌的数目的原理采用此措施的注意事项:1.一般选用菌落数在30~300之间的平板进行计数2.为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入TTC3.本法仅限于形成菌落的微生物(1)土壤取样:同其他生物环境相比,土壤中的微生物,数量最大,种类最多。在富具有般选用一定稀释范围的样品液进行培养,以保证获得菌落数在30到300之间、适于计数的(3)微生物的培养与观测不一样种类的微生物,往往需要不一样的培养温度和培养时间。细菌30~37℃1~2天放线菌25~28℃5~7天霉菌25~28℃3~4天每隔24小时记录一次菌落数目,选用菌落数目稳定期的记录作为成果,这样可以防止唯独及培养时间),同种微生物体现出稳定的菌落特性。形状、大小、隆起程度、颜色。(1)怎样从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数?V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(ml),M代表稀释倍数课题三分解纤维素的微生物的分离(1)棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物,木材、作物秸秆等也富含纤维素。(1)筛选措施:刚果红染色法。可以通过颜色反应直接对微生物进行筛选。(2)刚果红染色法筛选纤维素分解菌的原理土壤取样→选择培养(此步与否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上→挑(1)土壤采集选择富含纤维素的环境。(2)刚果红染色法分离纤维素分解菌的环节倒平板操作、制备菌.悬液、涂布平板(3)刚果红染色法
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