高考生物复习专题十五生物技术实践复习指导全国公开课一等奖百校联赛示范课赛课特等奖课件

生物大二轮复习第1页选考模块六专题十五生物技术实践第2页1重温考纲考点2知识网络构建3考向梳理4复习练案第3页重温考纲考点第4页考点考情1.微生物分离和培养2．培养基对微生物选择利用1.近五年考题中，对微生物分离和培养考查尤为突出，侧重考查微生物分离纯化技术，对传统发酵技术发酵原理、制作流程等考查频度也在不停提升。对胡萝卜素提取仅有卷Ⅰ进行了考查，侧重考查胡萝卜素萃取剂选择等。2．常借助某一特定微生物分离和培养考查微生物营养、接种方法等；对于生物技术在食品加工中应用，常借助发酵实例考查，填充内容多为教材中一些结论性语句等。植物有效成份提取考查也多以教材基础知识为主。第5页考点考情3．利用发酵加工食品基本方法及利用微生物进行发酵来生产特定产物4．从生物材料中提取一些特定成份3．备考时，从以下5个方面来把握：(1)掌握大肠杆菌纯化原理、主要方法及菌种保留方法。(2)认真分析教材中两个微生物分离与计数实例，并掌握微生物筛选及技术方法。(3)利用比较法归纳总结并掌握常见传统发酵技术原理、流程及影响原因等。(4)列表比较玫瑰精油、橘皮精油及胡萝卜素提取方法、原理、试验步骤等异同。第6页知识网络构建第7页第8页考向梳理第9页1．(·全国卷Ⅰ)一些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答以下问题：(1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生________。能分解尿素细菌不能以尿素分解产物CO2作为碳源，原因是______________________________________________________。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内葡萄糖主要作用是_____________________________________________________(答出两点即可)。考向一微生物培养利用脲酶分解尿素细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物为细胞生命活动提供能量，为其它有机物合成提供原料第10页(2)为了筛选可分解尿素细菌，在配制培养基时，应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其它两组原因是__________________________________________________________________________________________________。(3)用来筛选分解尿素细菌培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有______________________________________________________________(答出两点即可)。尿素其它两组都含有NH4NO3，能分解尿素细菌和不能分解尿素细菌都能利用NH4NO3，不能起到筛选作用为细菌生长提供无机营养，作为缓冲剂保持细胞生长过程中pH稳定第11页第12页2．(·全国卷Ⅱ)豆豉是大豆经过发酵制成一个食品。为了研究影响豆豉发酵效果原因，某小组将等量甲、乙两菌种分布接入等量A、B两桶煮熟大豆中并混匀，再将二者置于适宜条件下进行发酵，并在32h内定时取样观察发酵效果。回答以下问题：(1)该试验自变量是________、_______________。(2)假如发觉发酵容器内上层大豆发酵效果比底层好，说明该发酵菌是_________。菌种发酵时间好氧菌第13页(3)假如在试验后，发觉32h内发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵最正确时间；若要确定最正确发酵时间，还需要做事情是____________________________________________________________________________。(4)从大豆到豆豉，大豆中成份会发生一定改变，其中，蛋白质转变为____________，脂肪转变为__________________。延长发酵时间，观察发酵效果，最好发酵效果所对应时间即为最正确发酵时间氨基酸和肽脂肪酸和甘油第14页[解析]

(1)试验使用甲、乙两种菌种，并在32h内定时取样观察发酵效果，所以该试验自变量是菌种和发酵时间。(2)假如发觉发酵容器内上层大豆发酵效果比底层好，说明该发酵菌是好氧型微生物。(3)假如在试验后，发觉32h内发酵效果越来越好，且随发酵时间呈直线上升关系，则无法确定发酵最正确时间；若要确定最正确发酵时间，还需要做事情是延长取样观察时间，观察发酵结果，最好发酵效果所对应时间即为最正确发酵时间。(4)从大豆到豆豉，在相关微生物作用下，大豆中蛋白质转变为肽和氨基酸，脂肪转变为甘油和脂肪酸。第15页3．(·全国卷Ⅰ)空气中微生物在重力等作用下，能够一定程度地沉降。某研究小组欲用平板搜集教室空气中微生物，以了解教室内不一样高度空气中微生物分布情况。试验步骤以下：①配置培养基(成份：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H2O)；②制作无菌平板；③设置空白对照组和若干试验组，进行相关操作；④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落平均数。第16页回答以下问题：(1)该培养基中微生物所需氮起源于__________________。若要完成步骤②，该培养基中成份X通常是_________。(2)步骤③中，试验组操作是_______________________________________________________________。(3)若在某次调查中，某一试验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了________现象。若将30(即36－6)个/平板作为本组菌落数平均值，该做法_________(填“正确”或“不正确”)。牛肉膏、蛋白胨琼脂将试验组平板分别放置在教室不一样高度位置上，开盖暴露一段时间污染不正确第17页[解析]

(1)牛肉膏、蛋白胨都含有N，可为微生物生长提供氮源。制作无菌平板所用培养基为固体培养基，所以X应为琼脂。(2)由试验目标可知，该试验自变量为教室不一样高度，因变量为微生物分布情况，故试验组操作应为将试验组平板分别放置在教室不一样高度位置上，开盖暴露一段时间。(3)空白培养基上出现菌落，说明培养基被污染了，即调查中出现了污染现象。试验过程中若培养基被污染，必须将其抛弃，重新制作新培养基进行试验。第18页4．(·全国卷Ⅲ)某同学用新鲜泡菜滤液为试验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生乳酸能溶解培养基中碳酸钙。回答以下问题：(1)分离纯化乳酸菌时，首先需要用________对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释理由是_________________________________________________。(2)推测在分离纯化所用培养基中加入碳酸钙作用有_______________和_______________________。分离纯化时应挑选出_______________菌落作为候选菌。(3)乳酸菌在－20℃长久保留时，菌液中常需要加入一定量________(填“蒸馏水”、“甘油”或“碳酸钙”)。无菌水泡菜滤液中菌浓度高，直接培养极难分离得到单菌落判别乳酸菌中和产生乳酸(或酸)含有透明圈甘油第19页[解析]

(1)分离纯化乳酸菌过程中，需要在固体培养基上培养乳酸菌并得到单菌落。因为泡菜滤液中菌浓度高，直接培养极难分离得到单菌落，故分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释。(2)因为乳酸菌代谢产生乳酸能够溶解培养基中碳酸钙，形成透明圈，所以培养基中加入碳酸钙用于判别乳酸菌，同时碳酸钙也能够中和乳酸菌产生乳酸。(3)乳酸菌在－20℃长久保留时，菌液中需要加入一定量甘油，加甘油是为了防止水结冰产生冰晶损伤细胞。第20页1．理清微生物培养五种基本方法(填空)(1)培养基制备：计算→_______→溶化→________→倒平板。(2)无菌技术：主要包含_________和________。(3)倒平板操作：待培养基冷却至________左右时，在_______________附近倒平板。称量灭菌消毒灭菌50℃酒精灯火焰(4)平板划线操作：平板划线法是经过接种环在琼脂固体培养基表面___________操作，将聚集菌种____________分散到培养基表面。划线时应注意划线方法(如图)。连续划线逐步释释第21页(5)稀释涂布平板法：先将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不一样稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基表面，进行培养。在稀释度足够高菌液里，聚集在一起微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成_________________。单个菌落第22页2．熟记微生物分离与计数两个实例(填空)(1)土壤中分解尿素细菌分离、计数：①筛选：选择培养基。②分离：土壤取样→____________→微生物培养与观察。③计数：_______________和显微镜直接计数法。样品稀释活菌计数法第23页(2)分解纤维素微生物分离：①筛选原理：②流程：土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌落第24页3．比较记忆果酒、果醋、腐乳和泡菜制作(填表)项目内容果酒和果醋制作腐乳制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量作用菌种果酒：①__________果醋：②__________③_________④__________原理(1)酵母菌在无氧条件下将葡萄糖氧化成乙醇(2)醋酸菌在有氧条件下将乙醇氧化为醋酸毛霉将蛋白质、脂肪分解成⑤____________乳酸菌将葡萄糖分解为乳酸原料选择⑥___________(或苹果)⑦_________大白菜、花椰菜等新鲜洁净蔬菜酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌小分子有机物新鲜葡萄豆腐第25页项目内容果酒和果醋制作腐乳制作制作泡菜并检测亚硝酸盐含量试验流程挑选葡萄↓⑧_________↓⑨__________↓酒精醋酸→发酵发酵↓

↓果酒果醋让豆腐长出⑩_________↓加盐腌制↓加卤汤装瓶↓密封腌制制泡菜：选材配制盐水味料装坛加调↓发酵↓成品测亚硝酸盐含量：配制溶液→制备标准显色液→制备样品处理液→比色冲洗榨汁毛霉第26页(1)高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖(

)(2)倒平板时，应将打开皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(

)(3)为了预防污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(

)(4)某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后培养皿须放在光照培养箱中培养(

)(5)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采取接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法(

)××××√第27页(6)在琼脂固体培养基上长出单个菌落含有各种细菌(

)(7)检测土壤中细菌总数试验操作中，确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上试验组平板进行计数(

)(8)培养微生物培养基分装到培养皿后进行灭菌(

)(9)勤向腐乳坯表面喷水，有利于毛霉菌丝生长(

)(10)醋酸菌在无氧条件下利用乙醇产生醋酸(

)(11)酵母菌在无氧条件下利用葡萄汁产生酒精(

)(12)泡菜腌制利用了乳酸菌乳酸发酵(

)×××××√√第28页(13)腐乳制作利用了毛霉等微生物蛋白酶和脂肪酶(

)(14)某研究性学习小组以樱桃番茄为材料进行果酒、果醋发酵试验。先供氧进行果醋发酵，然后隔绝空气进行果酒发酵(

)(15)在制作果醋时，假如条件适宜。醋酸菌可将葡萄汁中糖分解成醋酸(

)√×√第29页1．已知微生物A能够产生油脂，微生物B能够产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油生产。回答相关问题：(1)显微观察时，微生物A菌体中油脂通常可用_____________________染色。微生物A产生油脂不易挥发，可选取__________(填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”)从菌体中提取。(2)为了从自然界中取得能产生脂肪酶微生物B单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物土壤中取样，并应选取以________为碳源固体培养基进行培养。题型1微生物培养和应用苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法油脂第30页(3)若要测定培养液中微生物B菌体数，可在显微镜下用_______________直接计数；若要测定其活菌数量，可选取________________法进行计数。(4)为了确定微生物B产生脂肪酶最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了深入确定该酶最适温度，应围绕_______℃设计后续试验。血细胞计数板稀释涂布平板4540第31页[解析]

(1)油脂可被苏丹Ⅲ染液或者苏丹Ⅳ染液染成橘黄色或红色。因为不易挥发，不能用水蒸气蒸馏法，故采取萃取法。(2)产生脂肪酶微生物B能够分解脂肪，故能够以脂肪为碳源固体培养基进行培养，不产生脂肪酶微生物无法生存。(3)微生物B菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，活菌用稀释涂布平板法。(4)45℃降解10g油脂所需酶量最大，故酶活性最小；40℃温度下降解10g油脂所需酶量最小，故酶活性最大，但40℃不一定是酶最适温度，故围绕40℃温度进行后续试验设计。第32页2．下表为培养某种微生物培养基配方，请回答相关问题。KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素蒸馏水1.4g2.1g0.2g10.0g1.0g定容至1000mL(1)该培养基只允许分解尿素细菌生长，这种培养基称为_____培养基。该培养基会抑制其它种类微生物生长，其原因是该培养基___________________。选择以尿素为唯一氮源第33页(2)若要经过统计培养基中菌落数来预计样品中细菌数，上述培养基中还需要添加成份是_______，接种时应采取____________________法，该方法接种培养后菌落，不可能是下列图中_______(单项选择)。琼脂稀释涂布平板D第34页(3)从土壤中分离出分解尿素细菌后，要对其作深入判定，可在上述培养基中加入_________指示剂，培养该菌后，假如指示剂变_____，可初步判定该种细菌能够分解尿素。(4)某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为106平板中测得菌落数平均值为163，则每毫升样品中细菌数是________________。酚红红1.63×109个第35页[解析]

(1)分析培养基配方可知，该培养基以尿素为唯一氮源，只允许分解尿素细菌生长，会抑制不能分解尿素其它种类微生物生长，所以这种培养基称为选择培养基。(2)上述培养基中缺乏凝固剂，为液体培养基。若要经过统计培养基中菌落数来预计样品中细菌数，应使用固体培养基，所以在上述培养基中还需要添加琼脂。惯用稀释涂布平板法来统计样品中活菌数目。从图中信息可知，A、B、C图采取是稀释涂布平板法，D图采取是平板划线法，所以用稀释涂布平板法纯化微生物时得到菌落不可能是D。第36页(3)对分离菌种作深入判定，在以尿素为唯一氮源培养基中加入酚红指示剂，培养该菌后，假如指示剂变红，说明该菌合成脲酶将尿素分解成了氨，使培养基pH升高，即可初步判定该种细菌能够分解尿素。(4)某同学用0.1mL稀释液在稀释倍数为106平板中测得菌落数平均值为163，则每毫升样品中细菌数是：163÷0.1×106＝1.63×109(个)。第37页易错警示相关选择培养基选择方法3个错混点(1)在培养基中加入某种化学物质。比如，加入青霉素能够分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度食盐能够得到金黄色葡萄球菌。这里加入是在主要营养成份完整基础上进行。(2)改变培养基中营养成份。比如缺乏氮源时能够分离出固氮微生物；石油作为唯一碳源时，能够分离出能消除石油污染微生物。(3)改变微生物培养条件。比如，将培养基放在高温环境下培养，能够得到耐高温微生物。第38页3．(陕西安康二调)利用不一样微生物发酵作用制作食品，历史悠久，惠及民生，请分析回答以下问题：(1)在果酒制作中，温度是主要控制条件，_____左右温度最适合酵母菌繁殖，发酵过程中会产生大量_____________(气体)，要及时排出。酵母菌无氧呼吸产生酒精可用酸性______________溶液进行检验。(2)腐乳制作流程是：让豆腐上长出_________→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。若腌制时，应注意控制_____________。(3)正常制作泡菜过程中，乳酸发酵过程发生在乳酸菌细胞_____________中，若腌制过程中温度高，用盐量少，腌制时间短，则泡菜中亚硝酸盐含量________。题型2传统发酵技术应用20℃二氧化碳重铬酸钾毛霉盐用量细胞质基质增多第39页[解析]

(1)在果酒制作中，选取菌种为酵母菌，20℃左右最适合酵母菌繁殖，发酵过程中，酵母菌细胞呼吸会产生大量二氧化碳，要及时排出。在酸性条件下，橙色重铬酸钾与酒精反应展现灰绿色，所以酵母菌无氧呼吸产生酒精可用重铬酸钾溶液进行检验。(2)腐乳制作流程是：让豆腐上长出毛霉＋加盐腌制＋加卤汤装瓶＋密封腌制。若腌制时，应注意控制盐用量。(3)乳酸是乳酸菌细胞进行无氧呼吸产物，乳酸菌中无氧呼吸场所是细胞质基质。正常制作泡菜过程中，若腌制过程中温度高，用盐量少，腌制时间短，则泡菜中亚硝酸盐含量会增多。第40页4．(四川凉山二诊)将醋酸菌突变体中与耐酸相关ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答以下问题：(1)对含有ALDH基因DNA与质粒用同种限制酶切割后，经过_____________酶连接形成重组质粒。为取得耐酸醋酸菌，用_________________________法接种于含高浓度醋酸培养基进行筛选。将筛选纯化菌种用____________方法长久保留。DNA连接平板划线(稀释涂布平板)甘油管藏第41页(2)下列图表示温度、乙醇浓度对该醋酸菌产酸量影响。①醋酸菌能将乙醇转变为_________，再将其转变为醋酸。②研究不一样酒精浓度下最高产酸量时，最好把温度控制为_________________℃，如温度过高，醋酸菌代谢迟缓甚至死亡，原因是____________________________________________。乙醛35(30～35)温度过高，影响酶活性(使酶失活)第42页③酒精发酵后经过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调整到_________左右才接种醋酸菌，较高酒精浓度会使产酸量下降，不宜接种，原因是__________________________________________________。(3)为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1mL发酵液稀释100倍后，分别取0.1mL稀释菌液均匀涂布在4个平板上；经适当培养后，4个平板上菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中活菌数为____________。4%(较)高浓度酒精会抑制醋酸菌生长和代谢1.4×105第43页[解析]

(1)DNA连接酶作用是连接两条DNA链；微生物接种惯用方法是平板划线法和稀释涂布平板法；甘油管藏方法适合长久保留菌种。(2)由图1，能够看出在35℃，产酸量最多，所以温度应控制在35℃，温度过高，影响酶活性，醋酸菌代谢迟缓甚至死亡；由图2，能够看出在乙醇浓度为4%时，产酸量最高．高浓度酒精会抑制醋酸菌生长和代谢。(3)第1个平板菌落数为24，与其它平板差异太大，可能由偶发原因引发，应取菌落数目介于30～300计数，所以取后3个平板菌落数平均值为(139＋140＋141)/3＝140，那么1mL发酵液活菌数目为140×10×100＝1.4×105。第44页易错警示相关果酒和果酷制作步骤3个错混点(1)材料选择与处理选择新鲜葡萄，榨汁前先冲洗后除去枝梗，以防止去除枝梗时引发葡萄破损，增加被杂菌污染机会。第45页(2)预防发酵液被污染需要从发酵制作过程进行全方面考虑，因为操作每一步都可能混入杂菌。为防止杂菌污染：榨汁机要洗净并晾干；发酵装置要洗净并用70%酒精消毒；果酒制作时封闭充气口；若用简易发酵装置，每隔一定时间排气时只需拧松瓶盖，不要完全揭开瓶盖等。果醋制作时，要经过充气口不停通入无菌空气。(3)控制好发酵时间与温度，果酒制作时适时放气。第46页1．(·全国卷Ⅲ)绿色植物甲含有物质W，该物质为无色针状晶体，易溶于极性有机溶剂，难溶于水，且受热、受潮易分解。其提取流程为：植物甲→粉碎→加溶剂→振荡→搜集提取液→活性炭处理→过滤去除活性炭→蒸馏(含回收溶剂)→重结晶→成品。回答以下问题：(1)在提取物质W时，最好应选取一个原料是________(填“高温烘干”“晾干”或“新鲜”)植物甲，不宜选取其它两种原因是___________________________________________________________________________________________________________________________________。考向二植物有效成份提取晾干高温烘干过程中，植物甲中物质W易被破坏；新鲜植物甲含水量高，用于提取极性有机溶剂会被水稀释，进而降低对物质W提取效果第47页(2)提取物质W时，振荡作用是______________________________。(3)活性炭含有很强吸附能力，在提取过程中，用活性炭处理提取液目标是___________________________。(4)现有丙酮(沸点56℃)、乙醇(沸点约78℃)两种溶剂，在提取物质W时，应选取丙酮作为提取剂，理由是______________________________________。(5)该试验操作过程中应注意事项是________________________________(答出两点即可)。使原料和溶剂充分混匀去除提取液中色素丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质W分解较少在温度较低情况下操作，防火第48页[解析]

(1)依据题于信息，物质W受热、受潮易分解，所以不宜选择高温烘干，而新鲜植物甲含水量高，用于提取极性有机溶剂会被水稀释，进而降低对物质W提取效果，故不应选取新鲜植物甲。(2)提取物质W时，振荡能够使原料和所加有机溶剂充分混匀。(3)利用活性炭吸附能力，能够去除提取液中植物甲所含色素，从而得到较为纯净物质W与有机溶剂混合物。(4)丙酮沸点低于乙醇，蒸馏时物质W分解较少。(5)物质W轻易受热分解，所以蒸馏操作适宜在较低温度下进行，同时因试验中使用了有机溶剂，要注意防火。第49页1．植物有效成份提取3种方法比较提取方法试验原理适用范围水蒸气蒸馏法利用水蒸气将挥发性较强植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层适适用于提取玫瑰油、薄荷油等__________强芳香油压榨法经过机械加压，压榨出果皮中芳香油适适用于柑橘、柠檬等易_______原料中芳香油提取有机溶剂萃取使芳香油溶解在有机溶剂中，蒸发溶剂后就可取得芳香油适用范围广，要求原料颗粒要尽可能细小，能充分溶解在有机溶剂中挥发性焦糊第50页NaCl

压榨过滤萃取过滤第51页(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选取干薄荷叶作原料，可采取水蒸气蒸馏法提取(

)(2)用萃取法提取薄荷油时，采取溶剂是酒精，原理是薄荷油易溶于有机溶剂酒精中(

)(3)用萃取法提取胡萝卜素主要步骤是：干燥、粉碎、萃取、浓缩、过滤(

)(4)在胡萝卜颗粒加热干燥过程中，温度过高和时间过长会造成胡萝卜素分解(

)(5)提取胡萝卜素可经过纸层析法进行判定，在判定过程中不需要对照(

)×××√×第52页1．血红蛋白是人和其它脊椎动物红细胞主要组成成份，负责血液中O2运输。请依据血红蛋白提取和分离流程图回答下列问题。题型1

DNA和蛋白质提取与分离技术第53页(1)将试验流程补充完整依次是_________________、_________________。凝胶色谱法基本原理是依据_______________________分离蛋白质有效方法。(2)洗涤红细胞目标是去除_____________________，洗涤洁净标志是____________________________。(3)分离血红蛋白时，由上到下第_______层是血红蛋白水溶液。血红蛋白释放凝胶色谱柱装填相对分子质量大小杂蛋白(或血浆蛋白)离心后上清液中没有黄色三第54页(4)下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品加入示意图，正确加样次序是___________________。(5)假如红色区带_______________________，说明色谱柱制作成功。④①②③均匀一致地移动第55页[解析]

(1)样品处理及粗分离包含：红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液、透析，凝胶色谱操作包含：凝胶色谱柱制作、凝胶色谱柱装填、样品加入和洗脱。凝胶色谱法基本原理是依据相对分子质量大小分离蛋白质。(2)洗涤红细胞目标是去除杂蛋白，洗涤洁净标志是上清液中没有黄色。(3)分离血红蛋白时，可显著看到试管中溶液分为4层：第1层为无色透明甲苯层；第2层为白色薄层固体，是脂溶性物质沉淀层；第3层是红色透明液体，是血红蛋白水溶液；第4层是其它杂质暗红色沉淀物。(4)加样次序是：调整缓冲液面、滴加透析样品、样品渗透凝胶床、再调整缓冲液面。(5)假如红色区带均匀一致地移动，说明色谱柱制作成功。第56页2．(·南通三模)生物兴趣小组以苹果为材料开展细胞中DNA含量测定研究，主要试验流程如图，其中SDS(十二烷基硫酸钠)含有破坏细胞膜和核膜、使蛋白质变性等作用，苯酚和氯仿不溶或微溶于水，它们密度均大于水。请分析回答：第57页(1)步骤①中苹果组织研磨前先经液氮冷冻处理主要优点是____________________。在常温条件下，也可向切碎组织材料中加入一定量_______________，再进行充分搅拌和研磨。(2)依据试验流程可推知，步骤③④所依据原理是_______________________________________________。(3)步骤⑤加入2～3倍体积95%乙醇目标是_____________________________________________________________。充分破碎植物细胞洗涤剂和食盐DNA不溶于苯酚、氯仿，而蛋白质等杂质能溶使DNA析出，同时去除部分蛋白质等杂质(提取杂质较少DNA)第58页(4)下面是某同学设计DNA判定试验主要步骤：①取1支2