杂环类药物分析-吡啶类

药物分析第九章杂环类药物的分析目录CONTENTS吡啶类苯并噻嗪类苯并二氮杂卓类…1324一、结构与性质（一）化学结构基本结构→吡啶环

典型药物尼可刹米

硝苯地平异烟肼酰肼基：强还原性；缩合反应吡啶环：开环反应；N：弱碱性酰胺基：易水解硝基：遇光不稳定（二）主要性质1.吡啶环（1）弱碱性：本类药物吡啶环上的氮原子显碱性，吡啶环的pKb值为8.8（水中）。（2）吡啶环的开环反应（戊烯二醛反应

）本反应适用于吡啶环的α、α΄位无取代基的异烟肼和尼可刹米。当溴化氰与芳伯胺作用于吡啶环，使环上氮原子由3价转变成5价，吡啶环发生水解反应生成戊烯二醛，再与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物。其颜色随所用芳胺的不同有所差异，如与苯胺缩合显黄至黄棕色；与联苯胺则显粉红至红色。（3）沉淀反应：吡啶环为含氮杂环，可与沉淀试剂如重金属盐类（如氯化汞、碘化铋钾等）发生沉淀反应。2.二氢吡啶环（1）还原性：硝苯地平为二氢吡啶环，具有还原性。（2）解离性：在碱性条件下，硝苯地平的二氢吡啶环1,4-位氢均可发生解离，形成p-π共轭而呈色。3.取代基（1）酰肼基（异烟肼）：还原性，异烟肼与硝酸银反应，即生成可溶于稀硝酸的白色异烟酸银沉淀，并生成氮气和金属银，在管壁上产生银镜。（2）酰胺基（尼可刹米）：水解性。4.吸收光谱特性结构中均有共轭体系，在紫外光区有特征吸收；在红外光区亦有特征吸收。二、鉴别（一）吡啶环的反应1.沉淀反应：本类药物具有吡啶环的结构，可与重金属盐类及苦味酸等试剂形成沉淀。例：异烟肼、尼可刹米可与氯化汞形成白色沉淀。例：尼可刹米可与硫酸铜及硫氰酸铵作用生成草绿色配位化合物沉淀二、鉴别（一）吡啶环的反应2.开环反应（戊烯二醛反应）：

当溴化氰与芳伯胺作用于吡啶环，使环上氮原子由3价转变成5价，吡啶环发生水解反应生成戊烯二醛，再与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物。其颜色随所用芳胺的不同有所差异，如与苯胺缩合显黄至黄棕色；与联苯胺则显粉红至红色。例：取尼可刹米1滴，加水50mL，摇匀，分取2mL，加溴化氰试液2mL与2.5%苯胺溶液3mL，摇匀，溶液渐显黄色。二、鉴别（一）吡啶环的反应3.颜色反应二氢吡啶在强碱溶液中，1,4位氢发生解离，形成p-π共轭而发生颜色变化。例：取硝苯地平约25mg，加丙酮1ml溶解，加20%氢氧化钠溶液3～5滴，振摇，溶液显橙红色。二、鉴别（二）酰肼基的银镜反应例：取异烟肼约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生气泡与黑色浑浊，并形成银镜。二、鉴别（三）分解产物的反应尼可刹米和烟酰胺的分子结构中，吡啶环β位上的取代基均为酰胺基结构，可遇碱水解，根据水解产物的性质，对药物进行鉴别。例：尼可刹米与氢氧化钠试液加热，即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。例：烟酰胺的鉴别：在供试品水溶液中加氢氧化钠试液后，缓缓煮沸，即发生氨臭。继续加热至氨臭除尽，放冷，加酚酞指示液1～2滴，用稀硫酸中和，再加硫酸铜试液，即缓缓析出烟酸铜的淡蓝色沉淀；滤过，取沉淀炽灼，即发生吡啶的臭气。二、鉴别（四）紫外可见分光光度法例：取硝苯地平适量，加三氯甲烷2ml使溶解，加无水乙醇制成每1ml约含15μg的溶液，照紫外-可见分光光度法测定，在237nm的波长处有最大吸收，在320～355nm的波长处有较大的宽幅吸收。二、鉴别（五）红外分光光度法例：硝苯地平的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集469图）一致。三、检查1.异烟肼中游离肼的检查

异烟肼是一种不甚稳定的药物，游离肼是由制备时原料引入，或在贮藏过程中降解而产生。肼又是一种诱变剂和致癌物质，因此国内外药典规定了异烟肼及其制剂中游离肼的限量检查。方法：TLC供试品溶液：100mg/ml对照溶液：0.08mg/ml固定相：硅胶G薄层板展开剂：异丙醇-丙酮（3︰2）显色剂：乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液结果判断：本法以试验条件下不出现游离肼斑点为合格。三、检查2.硝苯地平中有关物质的检查二氢吡啶类药物遇光极不稳定，在生产和贮藏过程中分子内部可能发生光化学歧化作用而发生降解。可降解为杂质Ⅰ及杂质Ⅱ。杂质来源？杂质Ⅰ杂质Ⅱ如何检查？HPLC法（避光操作）供试品溶液：1mg/ml。对照品贮备液：10μg/ml（杂质Ⅰ、杂质Ⅱ混合溶液）。对照溶液：含硝苯地平2μg/ml和杂质Ⅰ、Ⅱ各1μg/ml的混合溶液。系统适用性溶液：含硝苯地平1mg/ml和杂质Ⅰ、Ⅱ各10μg/ml的混合溶液。固定相：十八烷基硅烷键合硅胶。流动相：甲醇-水（60∶40）。检测波长：235nm。杂质Ⅰ、杂质Ⅱ：按外标法计算（0.1%）。其他单个杂质：主成分自身对照法（0.2%）。总杂质：主成分自身对照法（0.5%）。四、含量测定1.非水滴定法：尼可刹米2.铈量法：硝苯地平3.紫外可见分光光度法：尼可刹米注射液4.高效液相色谱法：硝苯地平制剂、异烟肼及其制剂硝苯地平的含量测定取本品约0.4g，精密称定，加无水乙醇50ml，微温使溶解，加高氯酸溶液（取70%高氯酸8.5ml，加水至100ml）50ml、邻二氮菲指示液3滴，立即用硫酸铈滴定液（0.1mol/L）滴定，至近终点时，在水浴中加热至50℃左右，继续缓缓滴定至橙红色消失，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml硫酸铈滴定液（0.1mol/L）相当于17.32mg的C17H18N2O6。按干燥品计算，本品含C17H18N2O6应为98.0%～102.0%。终点：微过量Ce4+将指示剂中的Fe2+氧化成Fe3，生成邻二氮菲-铁，橙红色消失。铈量法实例分析

按上述方法测定硝苯地平原料药的含量：称取供试品2份，分别为0.3903g、0.4113g，用硫酸铈滴定液（0.1018mol/L）滴定，消耗滴定液体积分别为22.02ml、23.17ml（空白校正后的消耗体积），计算硝苯地平原料药的含量，并判断是否符合规定。（干燥失重结果为0.3%）解：第1份供试品按干燥品计算的重量=0.3903g×（1－0.3%）=0.3891g

第2份供试品按干燥品计算的重量为0.4101g第2份供试品的含量为99.62%。2份的相对平均偏差为0.09%，不超过0.5%。2份的平均含量为99.7%。结论：符合规定。硝苯地平片的含量测定：色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（60∶40）为流动相；检测波长为235nm。理论板数按硝苯地平峰计算不低于2000，硝苯地平峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。HPLC测定法：避光操作。取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于硝苯地平10mg），置50ml量瓶中，加甲醇适量，超声使硝苯地平溶解，放冷，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取硝苯地平对照品，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中约含20μg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。本品含硝苯地平（C17H18N2O6）应为标示量的90.0%～110.0%。【规格】（1）5mg。（2）10mg。实例分析

按上述方法测定硝苯地平片（规格为10mg）的含量：20片的总重为2.4832g，称取2份供试品的量分别为0.1285g、0.1226g；2份供试品的平均峰面积分别为5520、5350；对照品浓度为20μg/ml，对照品平均峰面积为5320。计算硝苯地平片的含量。并判断是否符合规定。第2份供试品相对标示量的含量为101.84%。2份的相对平均偏差为0.7%，不超过3.0%。