HYT 179-2015 海洋环境中邻苯二甲酸脂类的测定 气相色谱-质谱法

Z17中华人民共和国海洋行业标准海洋环境中邻苯二甲酸酯类的测定气相色谱-质谱法Determinationofphthalateacideasters(PAEs)inthemargaschromatagraphy-massspectr2015-07-30发布HY/T179—2015 I 12规范性引用文件 3原理 4试剂和材料 5仪器和设备 36样品的采集与保存 37分析步骤 48空白实验 9结果计算 610检测限、回收率和精密度 6附录A(资料性附录)邻苯二甲酸酯类化合物及内标物信息 7附录B(资料性附录)邻苯二甲酸酯类化合物的色谱/质谱图 8附录C(资料性附录)邻苯二甲酸酯类化合物及内标物定性离子表 9附录D(规范性附录)邻苯二甲酸酯类化合物检测限、回收率和精密度 I本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由福建省海洋环境与渔业资源监测中心提出。本标准由全国海洋标准化技术委员会(SAC/TC283)归口。本标准起草单位：福建省海洋环境与渔业资源监测中心，厦门大学海洋与地球学院。1海洋环境中邻苯二甲酸酯类的测定气相色谱-质谱法警告——本实验操作过程中需接触标准物质和有机溶剂，且标准物质或溶液均具有高毒性，因此实验应在通风橱内进行。1范围本标准规定了海洋环境中海水、沉积物及生物体中16种邻苯二甲酸酯的气相色谱-质谱检测的样品采集与测定方法。本标准适用于海洋环境中海水、沉积物及生物体中邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPRP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DiBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二戊酯(DAP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸二庚酯(DHPP)、邻苯二甲酸苄基丁基酯(BBP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二辛酯(DnOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DiNP)、邻苯二甲酸二异癸酯(DiDP)、邻苯二甲酸二癸酯(DDCP)、邻苯二甲酸双十一酯(DUP)等16种邻苯二甲酸酯的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB17378.3—2007海洋监测规范第3部分：样品采集、贮存与运输海水样品采用C₈固相萃取柱进行富集和净化；沉积物样品使用二氯甲烷提取，硅胶固相萃取柱净化；生物体样品使用二氯甲烷提取，弗洛里硅土固相萃取柱净化。净化液经浓缩后用气相色谱-质谱法测定，内标法定量。4试剂和材料注意：所使用的器皿均应为玻璃材质。除另有说明外，本标准所用试剂均为色谱纯，所用水为超纯水(18.2MΩ·cm)。4.1正己烷。4.2乙酸乙酯。4.3二氯甲烷。4.4丙酮。4.6盐酸：分析纯，含量36%～38%(体积分数)。4.725%盐酸：取适量盐酸(4.6)按体积分数加入水稀释。4.8无水硫酸钠：分析纯，于450℃灼烧4h,冷却至室温，于密闭干燥器中储存备用。4.9铜粉：分析纯。25%盐酸(4.7)浸泡1min,水洗涤至中性，再用丙酮(4.4)淋洗，保存于丙酮(4.4)2中，有效期1个月。使用前于60℃下氮气吹干。4.10活性碳：化学纯(120目),25%盐酸(4.7)浸泡4h,水洗涤至中性，再用丙酮(4.4)淋洗，保存于丙酮(4.4)中，有效期1个月。使用前于60℃下氮气吹干。4.11铝箔：使用前在400℃下烘烤4h。4.13浓硫酸：分析纯，含量95%～98%(体积分数)。4.14铬酸洗液：取20g重铬酸钾(4.12)溶于40mL水中，缓慢加入360mL浓硫酸(4.13)。4.15.1手工填装萃取柱，柱管采用5mL玻璃柱管。填料要求如下：a)C₁₈填料(40μm～63μm,60Â);b)硅胶(分析纯，100目～200目),使用前在180℃下活化8h,冷却至室温后，密封保存于密闭干燥器中备用；c)弗罗里硅土(分析纯，100目),使用前经320℃灼烧4h,冷却后按每100g弗罗里硅土加入超纯水3mL,摇荡10min以充分混合，放置2h,密封保存于密闭干燥器内备用。1000mg/5mL或相当者；弗罗里硅土固相萃取柱，玻璃柱管，1000mg/5mL或相当者。4.16医用脱脂棉：丙酮(4.4)浸泡8h～10h,室温下挥干，密封保存备用。以脱脂棉代替固相萃取柱筛板。4.17玻璃纤维滤膜：孔径0.45μm,直径47mm,将玻璃纤维滤膜于400℃下灼烧5h,待冷却至室温4.18邻苯二甲酸酯标准品：邻苯二甲酸二甲酯(DMP)、邻苯二甲酸二乙酯(DEP)、邻苯二甲酸二丙酯(DPRP)、邻苯二甲酸二异丁酯(DiBP)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、邻苯二甲酸二戊酯(DAP)、邻苯二甲酸二己酯(DHXP)、邻苯二甲酸二庚酯(DHPP)、邻苯二甲酸苄基丁基酯(BBP)、邻苯二甲酸二环己酯(DCHP)、邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(DEHP)、邻苯二甲酸二辛酯(DnOP)、邻苯二甲酸二异壬酯(DiNP)、邻苯二甲酸二异癸酯(DiDP)、邻苯二甲酸二癸酯(DDCP)、邻苯二甲酸双十一酯(DUP),除DiNP,DiDP和DDCP是同分异构体混合物外，其他标准品纯度均高于97.0%。16种标准品及内标物信息参见附录A。4.19.1标准储备液(1000mg/L):准确称取16种邻苯二甲酸酯各单体标准品10.0mg,分别用适量正已烷(4.1)溶解并定容至10mL,混匀。4℃下避光保存，有效期12个月。4.19.2标准中间液：用正己烷(4.1)分别稀释标准储备液(4.19.1)至10mg/L,4℃下避光保存，有效期6个月。10.0μg/L、50.0μg/L、100.0pg/L和200.0μg/L的混合标准工作液。4.20.1苯甲酸苄酯(BBZ):纯度99.0%。4.20.2内标储备液(1000mg/L):准确称取苯甲酸苄酯标准品10.0mg,用适量正已烷(4.1)溶解并定容至10mL,混匀。4℃下避光保存，有效期12个月。4.20.4内标工作液：临用前将内标中间液(4.20.3)用正己烷(4.1)稀释配制，使用浓度为100μg/L。34.20.5内标使用液：临用前将内标工作液(4.20.4)用正己烷(4.1)稀释配制，使用浓度为10μg/L。5仪器和设备注意：所使用的器皿均应为玻璃材质。所用玻璃仪器和器皿在使用前用超纯水、丙酮(4.4)和正己烷(4.1)依次冲洗。5.1气相色谱-质谱联用仪(GC-MS):配EI源。5.5超声波清洗仪。5.6匀浆机。5.7离心机：转速不少于2000r/min。5.8氮吹仪。5.9涡旋振荡混合器。5.10旋转蒸发仪。5.11具塞玻璃离心管：20mL。5.15玻璃干燥器。5.16冷冻干燥机。6样品的采集与保存6.1样品瓶的处理所有样品采集、贮存与运输技术要求应满足GB17378.3—2007的规定。所有器皿均为玻璃材质，采样工具可使用金属工具。使用前经铬酸洗液(4.14)浸泡8h～10h,用超纯水洗净，再用正己烷(4.1)润洗3次备用。6.2水样采集与保存采集表层水样，装于预先处理过的样品瓶中，采样时用水样荡洗样品瓶3次。样品采集完毕，用玻6.3表层沉积物样品采集与保存6.3.1表层沉积物采用不锈钢材质抓斗式采泥器采集，置于搪瓷盘中，混合均匀，装至预先处理过的棕色广口瓶中。样品冷藏运输。6.3.2将样品均匀摊平在铝箔(4.1干燥后样品用铝箔(4.11)封装，置于干燥器中存放。6.4生物样品采集与保存采集生物样品，用铝箔(4.11)包好，加冰运回实验室。用自来水洗去样品表面的泥土，超纯水冲洗，绞碎、匀浆后装入预先处理过的棕色广口瓶中，置于一20℃冰箱中冷冻保存。47分析步骤7.1试样处理7.1.1水样前处理7.1.1.1称取0.5gC₈填料[4.15.1.a]],均匀地装入5mL玻璃柱管内，轻敲使之填实；或使用商品化固相萃取柱。7.1.1.2依次用乙酸乙酯(4.2)、甲醇(4.5)、超纯水各5mL,以约1mL/min流速预淋洗固相萃取柱，保持柱体湿润；准确量取500mL水样，以3mL/min的流速通过固相萃取柱进行富集；用10mL的超纯水清洗固相萃取柱，减压抽干10min;用15mL乙酸乙酯(4.2)以1mL/min的流速洗脱待测物，将洗脱液收集到玻璃离心管中。7.1.1.3往洗脱液中加入2g无水硫酸钠(4.8)脱水，以2000r/min转速离心15min;取出上清液于玻璃离心管中40℃下氮吹浓缩至干，用内标使用液(4.20.4)定容至1mL,待测。7.1.2沉积物样品前处理7.1.2.1沉积物样品阴干后，经研磨，过100目筛，用铝箔(4.11)包实，置于干燥器中备用。7.1.2.2准确称取10.0g沉积物样品于100mL具塞三角瓶中，加入2.5g铜粉(4.9),5g无水硫酸钠(4.8),混合均匀后用25mL二氯甲烷(4.3)以超声波辅助萃取20min,移取上清液于玻璃离心管中；重复萃取一次，合并上清液；以2000r/min速度离心10min;将上清液收集于玻璃梨形瓶中，使用旋转蒸发仪(5.10),在40℃水浴中旋转蒸发至近干，加入1mL乙酸乙酯(4.2),使用涡旋振荡混合器(5.9)涡旋混合。7.1.2.3称取1g硅胶(4.15.1b)],均匀填装于5mL玻璃柱管内，或使用商品化固相萃取柱。使用前用5mL乙酸乙酯(4.2)预淋洗固相萃取柱，弃预淋洗液。将提取液(7.1.2.2)过柱，用2mL乙酸乙酯(4.2)分2次清洗玻璃梨形瓶，洗涤液依次过柱，弃流出液；用10mL乙酸乙酯(4.2)淋洗固相萃取柱，收集洗脱液于玻璃离心管中，在40℃下经氮吹浓缩至干，用内标使用液(4.20.4)定容至1mL,待测。7.1.3生物样品前处理7.1.3.1生物样品经匀浆后，置于棕色具塞广口瓶中，于一20℃冰箱中保存。7.1.3.2准确称取5.0g匀浆后的样品于100mL具塞三角瓶中，加入10g无水硫酸钠(4.10);用25mL二氯甲烷(4.5)以超声波辅助萃取20min,移取上清液于玻璃离心管中；重复萃取一次，合并上清液，以2000r/min速度离心10min;将上清液收集于玻璃梨形瓶中，使用旋转蒸发仪(5.11),在40℃水浴中旋转蒸发至近干，加入1mL乙酸乙酯(4.4),使用涡旋振荡混合器(5.10)涡旋混合。7.1.3.3称取1g弗罗里硅土(4.15.1.c)],均匀装填于5mL玻璃柱管内，或使用商品化固相萃取柱，在弗罗里硅土上层加入0.02g活性碳(4.10)。用5mL乙酸乙酯(4.2)预淋洗固相萃取柱，弃去预淋洗液；将提取液(7.1.3.2)过柱，用2mL乙酸乙酯(4.2)分2次清洗玻璃梨形瓶，洗涤液依次过柱，弃流出液；用10mL乙酸乙酯(4.2)淋洗固相萃取柱，收集洗脱液于玻璃离心管中，在40℃下经氮吹浓缩至干，用内标使用液(4.20.4)定容至1mL,待测。7.2测定7.2.1色谱条件色谱条件宜采用以下条件：5——色谱柱：中等极性毛细管柱(填料为35%苯基-甲基聚硅氧烷),规格(长度×内径×膜厚):30.0m×0.25mm×0.25μm,或其他性能相当的色谱柱；——进样口温度：300℃;——色谱柱升温程序：初始柱温100℃保持0.50min,以25℃/min升温至300℃,保持2.00min;——载气：高纯氦气(纯度≥99.999%);——流速：1.2mL/min,恒流模式； 7.2.2质谱条件质谱条件宜采用以下条件：——离子源：电子轰击离子源(EI);——色谱-质谱接口温度：290℃;——离子源温度：280℃;——四极杆温度：150℃;——溶剂延迟：3.80min;——测定方式：选择离子监测(SIM),监测离子参见附录C;——电离能量：70eV。7.3定性分析选择离子监测模式，保留时间和特征离子相对丰度定性。将样品溶液与混合标准溶液中待测化合物的保留时间进行比较，样品与标准品的保留时间相对偏差不大于5%,并且对应特征离子相对丰度与浓度相当的混合标准溶液特征离子相对丰度相一致，偏差不超过表1规定的范围，就可定性确证目标分析物。邻苯二甲酸酯类化合物的定性离子和定量离子参见附录C。标准溶液的色谱图参见附录B。表1定性确证时相对离子丰度的允许偏差允许偏差7.4定量分析取试样溶液和标准溶液(4.21.3),按内标法，以峰面积定量，采用标准曲线校正，浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，标准溶液及试样溶液中的邻苯二甲酸酯类化合物响应值均应在仪器检测的线性范围内。对于DiNP、DiDP和DDCP,以所有同分异构体色谱峰面积总和计算峰面积。8空白实验除不加试样外，采用完全相同的步骤进行平行操作。6 (1)X;——试样中目标化合物的含量(质量分数本标准对16种邻苯二甲酸酯类化合物的检测限见附录D。在试样中定量加入适当已知浓度的混合标准工作溶液(4.21.3),按步骤7.1和7.2进行回收率测定。本标准对16种邻苯二甲酸酯类化合物的回收率见附录D。16种邻苯二甲酸酯的回收率应在重复性相对标准偏差(RSD)小于15%。再现性相对标准偏差(RSD)小于20%。本标准对16种邻7(资料性附录)邻苯二甲酸酯类化合物及内标物信息表A.1邻苯二甲酸酯类化合物及内标物信息中文名称1Phthalicacid,bis-m2Phthalicacid,bis-ethyles3Phthalicacid,bis-p4Phthalicacid,bis-iso-butylester567Phthalicacid,bis-h