动物实验设计

实验设计大纲实验名称：肾前性急性肾功能衰竭模型复制及解救课题来源：自选设计班级：检验医学院医学2018级检验一班设计人员：**设计日期：2010年11月10日指导老师：**实验设计的目的意义：实验设计的目的意义，国内外研究现状，存在的问题，解决问题的思路。目的与意义。学习用去甲肾上腺素复制肾前性急性肾功能衰竭模型，观察该模型一般状态下、尿蛋白及尿沉渣尿素氮、肌酐水平、内生肌酐清除率等变化测出用多巴胺解救的浓度及用量国内外研究现状未知存在的问题不知道多巴胺的最佳用量是多少，大剂量多巴胺可使肾血管明显收缩解决问题的思路剂量过大或滴注过快可出现心动过速、心律失常和肾血管收缩导致肾功能下降，一旦出现以上反应，就应减慢滴注速度或停药。可根据心率及心律来判断是否停药参考文献主编.金惠铭王建枝书名：病理生理学（第7版）人民卫生出版社.251至257页主编.杨宝峰书名.药理学（第7版）.人民卫生出版社.87至92页3．主编.杨芳炬书名.机能实验学.高等教育出版社.194至196页实验设计方案（实验设计目标,拟解决的主要问题,实验动物设计,实验专业设计，实验统计设计,实验方法设计，可行性分析,预期结果，实验设计工作时间安排）。实验设计目标利用去甲肾上腺素复制急性肾功能衰竭，观察是否有肾实质性病变用多巴胺解救肾衰，看其效果如何拟解决的关键问题控制去甲肾上腺素及多巴胺的量，注意心率及心律的变化实验设计实验专业设计去甲肾上腺素能激动a1受体，使血管收缩，滴注时间过长或剂量过大，可是肾脏血管剧烈收缩，引起肾有效循环血量减少，导致肾血液灌流量和GFR显著降低，出现尿量减少和氮质血症等多巴胺在低浓度时作用于D1受体，是通过激活腺苷酸环化酶，是使细胞内cAMP水平提高而导致血管舒张。使肾血管舒张，肾血流量增加，肾小球率过滤也增加实验动物设计（遗传背景，微生物质量控制，育种繁殖，饲养管理，动物模型，实验动物学技术）实验动物的选择：家兔遗传背景：近交系微生物质量控制：清洁动物饲养管理：全价饲料喂养动物模型：肾前性急性肾功能衰竭实验方法设计实验技术路线：复制急性肾衰模型检验该模型的尿常规及肌酐清除率等指标，与对照组比较输注低浓度多巴胺后测其尿常规及肌酐清除率等指标实验技术方法实验分组：实验组（去甲肾上腺素导致的急性肾衰的家兔）、对照组（注射生理盐水的家兔）模型复制：一、实验前24h，取健康家兔两只，称重后进行一下处理：实验组：静脉滴注去甲肾上腺素50ug溶于于100ml生理盐水中（40滴/分钟）对照组：静脉滴注0.9%生理盐水（30滴/分钟）100ml二、24h后，捉拿家兔，称重病麻醉（耳缘静脉注射1.5%戊巴比妥钠2ml/kg。麻醉后将家兔固定于兔台，导尿管导尿，收集尿液，留作尿蛋白、尿液肌酐浓度测定三、颈部剪毛，作颈部切口，分离一侧总动脉，作颈动脉插管以备取血用，分离另一侧颈静脉，作颈静脉插管后，输入5%葡萄糖（100ml/kg速度为50滴/min）,以保证有足够尿量，自输液开始记录一小时尿量。四、颈总动脉放血5ml,离心（2500r/min,10min），取血清待测定尿素氮、肌酐含量。实验组和对照组对比五、从耳缘静脉输注多巴胺（每分10ug/kg）,直到出现心率加快，停止。测此时尿液肌酐浓度5．实验结果：检测实验组于对照组的血肌酐，尿素氮等，比较，看急性肾衰是否复制成功，输入多巴胺溶液后，实验组家兔的血肌酐和尿素氮等于输入多巴胺前的对比，看多巴胺对急性肾衰的治疗效果实验设计工作时间安排实验前24h制造模型，实验可能用150分钟完成实验的条件仪器设备：哺乳动物手术器械，分光光度计，离心机，水浴锅，显微镜，中试管，塑料输尿管，酚红标准管药品试剂：去甲肾上腺素，多巴胺，1.5%戊巴比妥钠，血肌酐测定试剂