微生物的选择培养和计数练习 高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3

1/1微生物的选择培养和计数练习一、选择题1．下列关于倒平板、平板划线法和稀释涂布平板法的叙述，正确的是()A．倒平板时将培养皿打开，培养皿皿盖倒放在桌子上B．平板划线法除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线可以不用灭菌C．应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏大D．与平板划线法相比，稀释涂布平板法形成单菌落的效果更好2．下列环境中易得到纤维素分解菌的是()A．湿润的环境中 B．腐殖质丰富的环境中C．富含无机盐的环境中 D．养鱼的池塘中3．用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是()A．未接种的选择培养基B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基D．接种了的选择培养基4．下列培养基能鉴定分解尿素细菌的是()A．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水、酚红指示剂B．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、水、酚红指示剂C．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水、酚红指示剂D．KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水、酚红指示剂5.生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，研究小组将该菌的悬浮液在不含任何生长因子但含有其他必需营养物质的平板培养基上涂布均匀，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法错误的是()A．倒平板后不接种，直接培养可判断培养基是否被污染B．倒平板后需要进行灭菌处理C．图示结果表明该菌需要生长因子乙和丙D．生长图形法还可用于某些菌种的筛选6.平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是()A．不含氮源的平板不能用于微生物培养B．平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒C．接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃D．利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物7．某实验小组欲从土壤中筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌。下列叙述错误的是()A．采样与培养：称量1g土样置于刚配制的液体培养基中，30℃振荡培养B．接种：为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列梯度稀释后接种C．选择：选用淀粉作唯一碳源的固体培养基进行选择培养D．筛选：将适量的碘液滴加到平板中的菌落周围，出现透明圈说明此种菌能分解淀粉8．下表所列培养基配方中，能作为选择培养基、鉴别培养基的依次是()原料①②③④蛋白胨10g10g10g10g乳糖5g5g5g5g蔗糖5g5g5g5gKH2PO42g2g2g2g伊红0.4g亚甲蓝0.065g琼脂10g20g20g青霉素20g蒸馏水1000mL1000mL1000mL1000mLA.①③B．③①C．②④D．①②9．生物兴趣小组的三位同学吃冰激凌后有两人严重腹泻，他们怀疑冰激凌中大肠杆菌超标。于是他们设计实验对此冰激凌进行检测。下列实验操作，合理的是()A．再去买一个同样品牌的同种冰激凌，然后配制伊红—亚甲蓝培养基(该培养基可用来鉴别大肠杆菌)，灭菌、倒平板B．取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释，稀释倍数为1×10～1×105C．取各个稀释浓度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，共培养18个平板，在适宜温度下培养48hD．统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小10．如图所示，科研人员利用诱变方式选育可高产β－胡萝卜素的三孢布拉霉负菌。未突变菌不能在含有β－紫罗酮的培养基上生长。随β－胡萝卜素含量增加，菌体颜色从黄色加深至橙红色。图甲为选育菌种及获得β－胡萝卜素的流程，以下相关叙述错误的是()A．要得到图乙所示的菌落，可用稀释涂布平板法进行②操作，然后培养B．经过程①紫外线照射的三孢布拉霉负菌都能在含β－紫罗酮培养基上生长C．进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养D．能在添加了β－紫罗酮的乙上长成菌落的细菌，其遗传物质发生了改变11．产脂肪酶细菌可用于含油废水处理。科研人员用射线照射从土壤中分离的菌株，反复筛选后获得产酶能力提高的菌株，具体流程如图。下列相关叙述正确的是()A．步骤①取土壤样品溶于无菌水中制成菌悬液B．步骤②中的固体平板可以是以脂肪作为唯一氮源的培养基C．步骤②中射线照射可以引起细菌基因突变或染色体变异D．步骤③透明圈越大的菌落，其脂肪酶的活性一定越高二、非选择题12．将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：(1)M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制___________的生长，加入了链霉素的培养基属于___________培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有________________(答出两点即可)。氮源进入细菌后，可参与合成的生物大分子有________________________________________________________________________(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产生淀粉酶的微生物，加入的显色剂是__________，该方法能筛选出产生淀粉酶微生物的原理____________________________________________________。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133。乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是________________________________________________________________________。13．研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题：(1)研究者先制备富集培养基，然后采用________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养物，除了稀释涂布平板法，还可采用____________________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以______________为碳源时生长状况最好。(2)研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，推测其原因可能是______________________________________________。(答一点即可)(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是________________________________________________________________________。(4)深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶的一般共性外，其特性可能还有_____________________________________________。14．产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：(1)常规微生物实验中，下列物品及其灭菌方法错误的是__________(填编号)。编号①②③④物品培养基接种环培养皿涂布器灭菌方法高压蒸汽火焰灼烧干热臭氧(2)称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经__________后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中10倍稀释的菌悬液培养后平均长出了46个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌__________个。(3)为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐射进行__________育种。将辐射处理后的酵母菌涂布在以__________为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径________的菌落，纯化后获得A、B两突变菌株。(4)在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株_______进行后续相关研究，理由是___________________________________________________________。答案：1．D倒平板时不能把培养皿皿盖完全打开并放到桌面上，这样会污染培养皿中的培养基，A错误；除了第一次划线需要将接种环灼烧灭菌外，以后的每一次划线前也要将接种环进行灼烧灭菌，目的是将上次划线结束后残留的微生物杀死，确保以后的划线接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，使目的菌尽快分散成单个，B错误；应用稀释涂布平板法对微生物进行计数的估计值比实际值偏小，因为可能会有两个或多个微生物连在一起长成一个菌落，C错误；与平板划线法相比，稀释涂布平板法分离得到单菌落的效果更好，D正确。2．B生物与环境之间存在相互依存的关系，在富含纤维素的环境中，更容易寻找到纤维素分解菌，故纤维素分解菌主要分布在腐殖质丰富的环境中，B正确。3．C将菌液稀释相同的倍数并接种，牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目应明显多于选择培养基上的菌落数目，因此，应选择接种的牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。4．CA项的培养基中没有碳源；B项的培养基中没有琼脂，为液体培养基，而鉴定分解尿素的细菌应该用固体培养基；C项的培养基中有琼脂，以尿素为唯一氮源，且含有碳源、无机盐、水和酚红指示剂，可以鉴定分解尿素的细菌；D项的培养基没有尿素，不能鉴定分解尿素细菌。5.B可通过培养空白培养基判断培养基是否被污染，A正确；应该先将培养基灭菌后再倒平板，B错误；图中菌落生活在乙、丙区域之间，说明需要生长因子乙和丙，C正确；不同菌种所需生长因子不同，可利用生长图形法筛选某些菌种，D正确。6.D不含氮源的平板可用于固氮微生物的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。7．A配制的液体培养基需要经过高压蒸汽灭菌后才能使用，A错误；接种时为避免培养液中菌体浓度过高，需经过系列梯度稀释降低细菌的浓度后，再用涂布平板法接种，B正确；实验目的是筛选出能分解淀粉的芽孢杆菌，所以需要选用淀粉作唯一碳源的固体培养基进行选择培养，C正确；淀粉遇碘液变成蓝色，所以为了筛选目的菌株，将适量的碘液滴加到平板中的菌落周围，出现透明圈说明淀粉被分解，则此种菌能分解淀粉，D正确。8．B③加了青霉素，能抑制细菌的生长，有选择作用，故③能作为选择培养基；①加了伊红、亚甲蓝，可作为鉴别培养基。9．D若只对一个冰激凌进行检测，样品太少，实验结果不具有准确性，A项说法不合理；测定细菌的数量，一般选用104、105、106倍稀释的稀释液进行培养，应取10mL刚融化的冰激凌作为原液进行梯度稀释，稀释倍数为1×10～1×106，B项说法不合理；实验应该设置对照，取各个稀释浓度的冰激凌液各0.1mL，用涂布平板法进行接种，每个浓度涂3个平板，再取一个平板接种等量无菌水(作为对照)，共培养19个平板，C项说法不合理；因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故统计菌落数目，以菌落数代表大肠杆菌数会导致统计结果比实际值偏小，D项说法合理。10．B图乙中的菌落均匀分布于平板，说明采用的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；过程①紫外线照射的作用是利用物理因素诱导基因发生突变，由于突变的低频性和不定向性，被照射的三孢布拉霉负菌不可能都能在含β－紫罗酮的培养基上生长，B错误；橙红色的菌体为高产菌，进行③操作时，应选择较大的橙红色菌落中的菌株继续接种培养，C正确；能在添加了β－紫罗酮的乙上长成菌落的细菌是经过紫外线照射后的高产菌，其遗传物质发生了改变，D正确。11．A土壤样品中包含目的菌株，可取土壤样品溶于无菌水中制成菌悬液，再通过平板划线法或稀释涂布平板法接种到固定培养基上进行筛选，A正确；组成脂肪的化学元素有C、H、O，要筛选可以产生脂肪酶的细菌，需要用以脂肪作为唯一碳源的固体培养基，B错误；细菌是原核生物，没有成形的细胞核和染色体，不会发生染色体变异，C错误；透明圈大的菌落，酶活性不一定大，因此对初筛选的透明圈大的菌落要进行发酵培养，进一步对发酵液进行酶活性检测，D错误。12．(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(DNA、RNA)(3)碘液淀粉遇碘显蓝色，产淀粉酶菌落周围淀粉被水解，不会与碘液发生颜色反应(4)乙同学的结果中，1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差解析：(1)M培养基若用于真菌的筛选，说明M培养基能满足真菌的生长，而能抑制其他微生物的生长，链霉素是一种抗生素，可以抑制细菌的生长。加入了链霉素的培养基能筛选出真菌，该培养基属于选择培养基。(2)微生物生长需要多种营养物质，除氮源外，还需要碳源、无机盐、水以及特殊营养物质等。氮元素是蛋白质和核酸等生物大分子的组成元素，因此氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有蛋白质和核酸(DNA、RNA)。(3)筛选产淀粉酶的微生物，加入的显色剂是碘液，原理是淀粉遇碘显蓝色，产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解，不会与碘液发生颜色反应。(4)乙同学的结果可信度低，因为1个平板的计数结果与另2个相差悬殊，结果的重复性差，不能简单地用其平均数作为最终结果。13．(1)高压蒸汽灭菌平板划线纤维素(2)某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或某些微生物只有在深海冷泉的特定环境中才能存活)(3)拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到非生物环境中，有利于碳循环的顺利进行(4)耐低温解析：(1)富集培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。可以采用稀释涂布平板法或平板划线法对微生物进行分离纯化。分析题图可知，在以纤维素为碳源的培养基中细胞数最多，故拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(2)深海冷泉中某些微生物只有利用深海冷泉中的特有物质和在深海冷泉的特定环境中才能生存，故将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能