（江苏专用）高考生物一轮复习 基因工程与蛋白质工程试题（含解析）-人教版

专题25基因工程与蛋白质工程

【考情探究】

课标解读

否怕分析备考指导

考点考向

基因工程的基因工程的原理基因工程在“生物工程结合最近几年的高考,预计2021

1

原理与技术与技术技术”模块中占有举足年高考中考查的重点还会延续

基因工程的基因工程的应用轻重的地位,是高考命题以往考向，特别是对基因工程的

2

应用与发展蛋白质工程的热点之一。高考对本专基本工具、构成基因表达载体与

题的考查主要集中在基PCR技术的综合性考查。因此,

因工程基本工具的作用在复习备考的过程中，要注意归

和特点、基因工程操作步纳梳理基因工程的基础知识，熟

骤以及基因工程在生产记基因工程基本工具、基本操作

和实践中的应用等方面;程序、鉴定方法、蛋白质工程等

试题多以最新科技信息基础知识,加强对基因表达载体

材料为情境,结合具体实图形的理解与应用。并通过必要

例分析，突出对限制酶、的题型训练，巩固基础知识、掌

DNA的粗提DNA粗提取与鉴

3PCR技术、基因表达载体握解题的方法和技巧，并进行归

取与鉴定定

的构建、目的基因的检测纳总结，以达到触类旁通之效。

和鉴定等内容的考查，且本专题中的“蛋白质工程”将

多以非选择题形式呈现。结合在基因工程中组题考查，可

高考对“DNA的粗提取与能是高考的新考向，也应该加以

鉴定”的考查主要表现重视。同时还应注意加强与细胞

在对实验原理、操作方法工程、胚胎工程的横向联系，重

与目的等方面，且多以选视“DNA的粗提取与鉴定”的实

择题形式呈现验考查

【真题探秘】

（2018课标全国I,38,15分）问答下列问鹿：

一、*栈生坊

昌枝生我。'I'"<HBovi）和科恩（S.CnhMi）将明«爪■核

心

精体蛋白恭翦血仓直更后事人mw细也中进行T国寿校羊井洲爪母植楂体*自&因为i|

举

友达.该研究除证叨T质粒可以作为找体外.还证明广什么能与虎独姐令在一起.X.他在大殖

饵M技乃（|>本题以6■因_______________________________（答出两点即可）杆黄中衣运呢？

工和为大背景,通过提供新材

（2）体外取组的质忖可通过—初亏的—.…

料,才女学生理解、分析问题•冬同工制•中，爻体佣脑为大心肝

和知识应用的能力：方法导人大炀fl黄细也：而体外重组的啤茵体DNA咽常需

的世蜘时，才用C。"处理大的杆

（2）试题设计既有如正点的蛉与.组装成完整理曲体后.才能通过侵

翰，仅2处于格曼金，MCQ”今

合.也有知识点的感体和迂移

染的方法将收组的卬出体DNA导入宿主细胞在细曲、Q的H他法.

心肌细胞.叶内姗胞中.可作为第组唾首体而士细胞的

“臭延先窠（1）佟仆*组的质归可■以选人受住如胞：4■枚土扬米因可在厚杖向电中表达

I（2>tt<K牛上餐白（泰冬也曲作要白）如声

/（3）,白蜂果陷更杳色第

基础篇

考点1基因工程的原理与技术

【基础集训】

1.（2019江苏常州一模,25）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如图

所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述正确的有（多

选）（）

腔性

B退火

Q延伸

Q变性

A.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连

C.退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物

D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA分子所占的比例为15/16

答案ABC

2.(2019江苏华罗庚、江都、仪征三校联考,33)下表是几种限制酶识别序列及其切割位点,

图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下

歹IJ问题：

限制酶BamHIBelISau3AIHindHI

1I1I

识别序列及GGATCCTGATCAGATCAAGCTT

切割位点CCTAGGACTAGTCTAGTTCGAA

tftt

图2

(1)用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用两种限制酶切割,酶切后的载体

和目的基因片段,通过酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于

态的大肠杆菌。

(2)为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加，平板上长

出的菌落,常用PCR鉴定,所用的引物组成为图2中。

(3)若Bamll1酶切的DNA末端与BelI酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列

为，对于该部位，这两种酶(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切

开。

(4)若用Sau3AI切图1质粒最多可能获得种大小不同的DNA片段。

答案(l)BclI和HindHIDNA连接感受态(2)四环素引物甲和引物丙

(3)TGATCCACTAGG或GGATCACCTAGT都不能(4)7

考点2基因工程的应用与发展

【基础集训】

（2019江苏六合高级中学2月月考,18）中华鲸是地球上最古老的脊椎动物,被称为“活化

石”。研究者试图通过蛋白质工程改造中华鳏体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域

环境，以下说法错误的是（）

A.该工程可以定向改变蛋白质分子的结构

B.改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的

C.改造后的中华鳄和现有中华婚仍是同一物种

D.改造后的中华鲍的后代不具有改造的蛋白质

答案D

考点3DNA的粗提取与鉴定

【基础集训】

1.（2018江苏南京、盐城一模，12）下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是

（）

A.鸡血细胞是较理想的实验材料

B.NaCl溶液浓度越高,DNA的溶解度越大

C.在用酒精析出DNA时,最好使用体积分数为95%的冷酒精溶液

D.DNA溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热,检测结果呈蓝色

答案B

2.（2019江苏苏州一模,13）如图为“DNA的粗提取与鉴定”实验（以鸡血细胞液为实验材料）

中部分操作步骤示意图，图中装置可以进行该实验的多个步骤。若在下列操作之前甲烧杯中

已加入相应的实验材料或溶液,相关叙述错误的是（）

A.若向甲烧杯中倒入蒸储水并快速搅拌,则在装置乙完成过滤之后弃去滤液

B.若向甲烧杯中加入2mol/L的NaCl溶液,则在装置乙完成过滤之后保留滤液

C.若向甲烧杯中缓缓加入蒸储水并轻缓搅拌,则在装置乙完成过滤之后保留粘稠物

D.若在甲烧杯中加入体积分数为95%的冷酒精并轻轻搅拌，则玻棒上会出现丝状物

答案A

综合篇

提升与基因工程中工具酶相关的问题分析

【综合集训】

1.（2019江苏海安期末）科研人员通过基因工程实现了甘露聚糖酶基因在猪肠道野生酵

母菌中的表达，使原来不能被猪利用的粗纤维在猪肠道内被分解成可直接被吸收的单糖。如

图为构建工程菌的部分过程,其中介导序列能引导载体整合到酵母菌的染色体DNA上。请据

图回答:

限制酶识别序列和切割位点

J

EcoRI

GAATTC

1

BamHI

GGATCC

I

BgHI

AGATCT

SalIJ

GTCGAC

⑴①过程中需要的工具酶是,其最适温度的范围一般是

（a.55~60℃,b.70~75℃,c.90~95℃）。②③过程中的工具酶作用的化学键是。

（2）①过程利用野生酵母菌染色体DNA进行PCR扩增介导序列时,科研人员设计了如下一对引

物:5'-|GAATTC|GACCTCAAATCAGGTAGG-3'和3'-TTGCATTGACTTACA|CCTAGG|-5',其中下划线部分

序列的设计依据是,方框部分序列的设计目的

是。

⑶若BamllI酶切的DNA末端与BglH酶切的DNA末端可以被DNA连接酶连接，原因

是，连接后的部位，这两种酶（填“都能”“都不能”或

“只有一种能"）切开,原因是o

（4）若使用EcoRI和SalI酶对重组表达载体进行完全酶切并鉴定，可得到种DNA片

段。

答案（D热稳定性DNA聚合酶（Taq酶或耐高温的DNA聚合酶）b.70~75℃磷酸二酯键

（2）介导序列两端的部分DNA序列使扩增出的介导序列两端含有限制酶EcoRI和BamllI的

识别序列（便于构建重组质粒）（3）黏性末端序列互补（或黏性末端相同）都不能连接后

该部位不再是BamHl酶与BglH酶的识别序列（4）3

2.图（a）中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRI、BamHI和Sau3AI三种限制性内切酶的

识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的EcoRI、Sau3AI的切点是

唯一的）。

-C*AATTC-----------------&ATCC-----------------»CATC-

------CTTAACCCTAGCCTAG

tft

图（a）

图⑹

根据基因工程的有关知识，回答下列问题:

(1)经BamllI酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被酶切后的产物连接，理

由是o

(2)若某人利用图(b)所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图(c)

所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有,不能表达的原因

是_______________________________________________________________________________

(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有和,

其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是，

答案(l)Sau3AI两种酶切割后产生的片段具有相同的黏性末端(2)甲和丙甲中目的

基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终止子的下游,二者的目的基因均不能被转

录(3)E•coliDNA连接酶ODNA连接酶ZDNA连接酶

应用篇

应用口蹄疫病毒VP1基因在胡萝卜中的表达及转基因大米的培育

【应用集训】

我们日常吃的大米中铁含量极低，科研人员通过基因工程等技术，培育出了铁含量比普通

大米高60%的转基因水稻，改良了稻米的营养品质。如图为培育转基因水稻流程示意图，请回

答下列问题:

铁结合蛋白基因

导入农杆储

潮忠素

抗性基因

的农杆菌

组Ti质粒加人培养基/

开花后水稻

未成熟的胚

起伤组纨转移上竺巴

MS培养基繇T黑

⑴铁结合蛋白基因可来自菜豆，且基因的脱氧核甘酸序列已知，可以用

法获得此目的基因或用技术扩增此目的基因。

（2）构建重组Ti质粒时,通常要用分别切割

将重组Ti质粒转入农杆菌时,可以用处理农杆菌,使重组Ti质粒易于导入。

（3）将含有重组Ti质粒的农杆菌与水稻愈伤组织共同培养时，通过培养基2的筛选培养，可以

获得；培养基3与培养基2的区别是o

检测培育转基因水稻的目的是否达到，需要检测转基因水

稻。

（4）为研究外源基因的遗传方式,将T。植株上收获的种子种植成小株系,检测各单株的潮霉素

抗性。在检测的多数/株系内，抗潮霉素植株与潮霉素敏感植株的比例为3：1,此结果说明

外源基因的遗传符合定律。有少数Z株系的植株表现为对潮霉素敏感,但其体

内能检测到铁结合蛋白基因，造成这一结果最可能的原因

是。

答案（1）化学合成（或从基因文库中获取）PCR（2）（同种）限制性核酸内切酶含目的基

因的DNA片段和质粒CaCh溶液（3）含有重组质粒（或含有潮霉素抗性基因）的愈伤组织

生长素和细胞分裂素的比例不同（成熟）种子中铁含量（4）（基因）分离潮霉素抗性基因

没有表达（或“潮霉素抗性基因丢失”）

【五年高考】

考点1基因工程的原理与技术

1.（2019江苏单科，16,2分）下列生物技术操作对遗传物质的改造，不会遗传给子代的是

（）

A.将胰岛素基因表达质粒转入大肠杆菌,筛选获得基因工程菌

B.将花青素代谢基因导入植物体细胞,经组培获得花色变异植株

C.将肠乳糖酶基因导入奶牛受精卵,培育出产低乳糖牛乳的奶牛

D.将腺甘酸脱氨酶基因转入淋巴细胞后回输患者,进行基因治疗

答案D

2.（2019江苏单科,33,8分）图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0

具有四环素抗性基因（tet，）和氨芳青霉素抗性基因（amp'）。请回答下列问题:

图1

(l)EcoRV酶切位点为；T?”，Ec。RV酶切出来的线性载体Pl为末端。

(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段,其两端各自带有一个腺喋吟脱氧核

昔酸。载体P1用酶处理,在两端各添加了一个碱基为的脱氧核甘酸，形成P2;P2

和目的基因片段在酶作用下,形成重组质粒P3o

(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到A、B、C

三类菌落，其生长情况如下表(“+”代表生长，“-”代表不生长)。根据表中结果判断，应选

择的菌落是(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别

是、。

菌落类型平板类型ABC

无抗生素+++

氨芾青霉素++-

四环素+--

氨茉青霉素+四环素+--

(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴

定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置,PCR鉴定时应选择的一

对引物是o某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp

片段,原因是。

图2

答案(8分)(1)平(2)胸腺喀咤(T)DNA连接(3)BA类菌落含有POC类菌落未转入

质粒(4)乙丙目的基因反向连接

3.(2018江苏单科,32,8分)为生产具有特定性能的a-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中

克隆了a-淀粉酶基因(1656个碱基对)，利用基因工程大量制备a-淀粉酶，实验流程见图。

请回答下列问题：

(1)利用PCR技术扩增a-淀粉酶基因前,需先获得细菌的。

(2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的端加上限制性酶切位点,

且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点，主要目的

是o

(3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中的设定与引

物有关,的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)

①变性温度②退火温度③延伸温度④变性时间

⑤退火时间⑥延伸时间

(4)如图表示筛选获得的工程菌中编码a-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列：

5'-UGCCAUCAACAAAUACUAAC回U...-3，

图中虚线框内mRNA片段包含个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第

一个密码子最多有种。

(5)获得工程菌表达的a-淀粉酶后，为探究影响酶活性的因素，以浓度为遇的可溶性淀粉为

底物测定酶活性，结果如下：

缓冲液50mmol/LNa2HP01-KIl2P0450mmol/LTris-HCl50mmol/LGly-Na0II

pH6.06.57.07.57.58.08.59.09.09.510.010.5

酶相对活性%25.440.249.863.270.195.599.585.368.163.741.520.8

根据上述实验结果，初步判断该a-淀粉酶活性最高的条件

为。

答案（8分）（1）基因组DNA（2）5'使DNA片段能定向插入表达载体，减少自连（3）②

@（4）813（5）pH为8.5,缓冲液为50mmol/LTirs-HCl

4.（2017江苏单科,33,8分）金属硫蛋白（MT）是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计

划通过多聚酶链式反应（PCR）扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化

处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题：

«=CZ372℃|步骤3

口

55r步骤2=---------三-

_______________________-O_______0

t=a___________________________________—

------------:~~——55t1步骤2

72TI步骤3

第二轮循环0-------------

-------------B394-步骤］'--------------------------

（1）从高表达MT的生物组织中提取mRNA,通过获得用于PCR扩增。

（2）设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物（引物1和引物2）,为方便构建重组质粒,在

引物中需要增加适当的位点。设计引物时需要避免引物之间形

成，而造成引物自连。

（3）图中步骤1代表，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循

环。

（4）PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏的碱基

配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但的引物需要

设定更高的退火温度。

（5）如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有（填序号:①升高

退火温度②降低退火温度③重新设计引物）。

答案（8分）（1）逆转录cDNA（2）限制性核酸内切酶

碱基互补配对（3）变性（4）引物与模板G/C含量高（5）②③

5.（2015江苏单科,32,9分）胰岛素A、B链分别表达法是生产胰岛素的方法之一。图1是该

方法所用的基因表达载体，图2表示利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素的基本流程（融

合蛋白A、B分别表示B-半乳糖甘酶与胰岛素A、B链融合的蛋白）。请回答下列问题:

加半乳糖甘前编码区

启动子，iB

复制原点珂玲

胰岛素

7

氨节育密素Rr>A或B链编码区

抗性范因

图1

a肽段

O给磅吆产W照隐注5）

大肠奇菌""雄合蛋臼A5胰岛素A链加工

a.肽段।—--r1

*⑥国产Lj胰病

大肠?1浦融赤白B"^==康岛素B链

图2

（1）图1基因表达载体中没有标注出来的基本结构是。

（2）图1中启动子是酶识别和结合的部位，有了它才能启动目的基因的表达;氨革青

霉素抗性基因的作用是。

（3）构建基因表达载体时必需的工具酶有o

（4）B-半乳糖甘酶与胰岛素A链或B链融合表达,可将胰岛素肽链上蛋白酶的切割位点隐藏

在内部,其意义在于。

（5）溟化氟能切断肽链中甲硫氨酸竣基端的肽键,用溟化氟处理相应的融合蛋白能获得完整

的A链或B链，且B-半乳糖甘酶被切成多个肽段，这是因

为。

（6）根据图2中胰岛素的结构,请推测每个胰岛素分子中所含游离氨基的数量。你的推测结果

是_,理由是。

答案（9分）（1）终止子（2）RNA聚合作为标记基因，将含有重组质粒的大肠杆菌筛选出

来（3）限制酶和DNA连接酶（4）防止胰岛素的A、B链被菌体内蛋白酶降解（5）B-半乳

糖甘酶中含多个甲硫氨酸，而胰岛素A、B链中不含甲硫氨酸（6）至少2个两条肽链的一

端各有一个游离的氨基,氨基酸R基团中可能还含有游离的氨基

考点2基因工程的应用与发展

6.（2019江苏单科,29,8分）利用基因编辑技术将病毒外壳蛋白基因导入猪细胞中，然后通过

核移植技术培育基因编辑猪,可用于生产基因工程疫苗。下图为基因编辑猪培育流程,请回答

下列问题:

3号4号

⑴对1号猪使用处理，使其超数排卵，收集并选取处在

时期的卵母细胞用于核移植。

（2）采集2号猪的组织块,用处理获得分散的成纤维细胞,放置于370c的CO?

培养箱中培养,其中CO?的作用是。

（3）为获得更多基因编辑猪,可在胚胎移植前对胚胎进行。产出的基因编辑猪的性染

色体来自号猪。

（4）为检测病毒外壳蛋白基因是否被导入4号猪并正常表达,可采用的方法有（填序

号）。

①DNA测序②染色体倍性分析

③体细胞结构分析④抗原一抗体杂交

答案（8分）（1）促性腺激素减数第二次分裂中期（2）胰蛋白酶（胶原蛋白酶）维持培

养液的pH（3）分割2⑷①④

7.（2019天津理综,9,12分）B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞（2n）和精子中正常表

达，但在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响,设计了如下实验。

水稻B基因

编码指门的序列—基因T-DNA

V2ZZZZZZZZk^^

凡_耳每平■嚼

4水稻g苗

饕定9i&

转基因

那毒案

k>*可在水稻卵细胞中启动转录的启动子植株

据图回答：

（DB基因在水稻卵细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中._______（单选）。

A.含B基因的染色体缺失

B.DNA聚合酶失活

C.B基因发生基因突变

D.B基因的启动子无法启动转录

(2)从水稻体细胞或中提取总RNA,构建文库,进而获得B基因编码蛋白的

序列。将该序列与Luc基因(表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光)连接成融合基因(表达

的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能)，然后构建重组表达载体。

(3)在过程①、②转化筛选时，过程中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上，过程

在培养基中应加入卡那霉素。

(4)获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是(多选)。

A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交

B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交

C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交

D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光

(5)从转基因植株未成熟种子中分离出胚,观察到细胞内仅含一个染色体组,判定该胚是由未

受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表

明o

答案(共12分)(1)D(2)精子cDNA(3)②①(4)BCD(5)B基因表达能使卵细胞不

经受精直接发育成胚

8.(2018课标全国I,38,15分)回答下列问题：

(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌

细胞中进行了表达。该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了一

_______________________(答出两点即可)。

(2)体外重组的质粒可通过C/参与的方法导入大肠杆菌细胞;而体外重组的噬菌体

DNA通常需与组装成完整噬菌体后,才能通过侵染的方法将重组的噬菌体

DNA导入宿主细胞。在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的

是o

(3)真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时，表达出的蛋白质可能会被降解。为防

止蛋白质被降解,在实验中应选用的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化

的过程中应添加的抑制剂。

答案（1）体外重组的质粒可以进入受体细胞;真核生物基因可在原核细胞中表达（2）转化

外壳蛋白（或答噬菌体蛋白）细菌（3）蛋白酶缺陷型蛋白酶

9.（2015海南单科,31,15分）在体内，人胰岛素基因表达可合成出一条称为前胰岛素原的肽

链，此肽链在内质网中经酶甲切割掉氨基端一段短肽后成为胰岛素原，进入高尔基体的胰岛

素原经酶乙切割去除中间片段C后,产生A、B两条肽链,再经酶丙作用生成由51个氨基酸残

基组成的胰岛素。目前，利用基因工程技术可大量生产胰岛素。回答下列问题：

（D人体内合成前胰岛素原的细胞是,合成胰高血糖素的细胞是。

（2）可根据胰岛素原的氨基酸序列,设计并合成编码胰岛素原的序列,用该序列

与质粒表达载体构建胰岛素原基因重组表达载体,再经过细菌转化、筛选及鉴定，即可建立能

稳定合成的基因工程菌。

（3）用胰岛素原抗体检测该工程菌的培养物时，培养液无抗原抗体反应,菌体有抗原抗体反应,

则用该工程菌进行工业发酵时，应从中分离、纯化胰岛素原。胰岛素原经酶处理便

可转变为胰岛素。

答案⑴胰岛B细胞胰岛A细胞（每空3分，共6分）

（2）DNA胰岛素原（每空3分，共6分）

（3）菌体（3分）

考点3DNA的粗提取与鉴定

10.（2019江苏单科，10,2分）下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错课的是（）

A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近

B.DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂

C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNA

D.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热

答案A

11.（2018江苏单科，17,2分）关于还原糖、蛋白质和DNA的鉴定实验，下列叙述正确的是

（）

A.在甘蔗茎的组织样液中加入双缩胭试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖红色

B.在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色

C.提取DNA时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过滤并弃去滤液

D.将DNA粗提物溶解在2moi/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色

答案D

12.（2015江苏单科,25,3分）图1、2分别为“DNA的粗提取与鉴定”实验中部分操作步骤示

意图，下列叙述正确的是（多选）（）

理而细胞讷DNA浓热溶滞

A.图1、2中加入蒸储水稀释的目的相同

B.图1中完成过滤之后保留滤液

C.图2中完成过滤之后弃去滤液

D.在图1鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质

答案BCD

教师专用题组

1.（2014江苏单科,23,3分）下列关于基因工程技术的叙述，错误的是（多选）（）

A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核甘酸序列

B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应

C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因

D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达

答案ABC

2.（2014江苏单科,16,2分）下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验叙述,簿送的是（）

A.酵母和菜花均可作为提取DNA的材料

B.DNA既溶于2moi/LNaCl溶液也溶于蒸播水

C.向鸡血细胞液中加蒸僧水搅拌,可见玻棒上有白色絮状物

D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝

答案c

3.（2013江苏单科,22,3分）小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏

反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相

关叙述正确的是（多选）（）

A.设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列

B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列

C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶

D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞

答案BD

4.（2018北京理综,5,6分）用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,

酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不氐颂的是（）

XhoISalISalISalIXho

图1酶切位点图

①②

图2电泳结果示意图

A.图1中两种酶识别的核甘酸序列不同

B.图2中酶切产物可用于构建重组DNA

C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物

D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA

答案D

5.（2017北京理综,5,6分）为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因

C（图1）,拟将其与质粒（图2）重组,再借助农杆菌导入菊花中。

HamilI

£coR1后动子

次终止子\

EcoRIEcaRI4启动子）

L_______I■质粒

Ic基因|潮毒索抗性基因*/

mi图2

下列操作与实验目的不，的是（）

A.用限制性核酸内切酶EcoRI和连接酶构建重组质粒

B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞

C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞

D.用分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上

答案C

6.（2014广东理综,25,6分）利用基因工程技术生产按酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示,下

列叙述正确的是（双选）（）

|抗农药马拉硫一小菜蛾卜而^QrE基因||表达载体|

|降解马拉硫一残商卜|CarE制剂用工程菌四大M杆菌网金组表达载体|

A.过程①需使用逆转录酶

B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因

C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备

D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞

答案AD

7.（2014重庆理综,4,6分）如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确

的是（）

A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与

B.③侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到④的染色体上

C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状

D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异

答案D

8.(2012江苏单科,32,9分)图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分

碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp【、BamHI>MboISmaI4

种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C,CGG、G'GATCC.'GATC.

CCC'GGGO

请回答下列问题：

目的基因D

111111111r**i।H:I111i("i111111111111111

GGATCCCICCGCGCCCGCGGCATCC

CCTAGG(XXCCCGGGCCCCCTAGG

1113i11L.」iMi□iL.」iiiliiL.一1111iii111

(1)图1的一条脱氧核甘酸链中相邻两个碱基之间依次由连接。

(2)若用限制酶SmaI完全切割图1中DNA片段,产生的末端是末端，其产物长度

为»

(3)若图1中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换,那么基因D就突变为基因d。从杂合子

中分离出图1及其对应的DNA片段,用限制酶SmaI完全切割，产物中共有种不同长度

的DNA片段。

(4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理