液相色谱柱压上升原因 液相色谱技术指标

第第页液相色谱柱压上升原因液相色谱技术指标色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命特别紧要。色谱柱压上升一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。浅析其原因，大致有以

色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命特别紧要。色谱柱压上升一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。浅析其原因，大致有以下几方面：

1、流动相的前处理杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力上升。这往往是由于流动相没有过滤，或虽已过滤但过滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所造成的。

2、样品的沉淀当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，样品进入色谱柱，有时可能因溶解度降低而沉淀出来，造成压力上升。

3、晶体的析出使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动相中的溶解度降低而析出，造成流体阻力加大、压力上升。

4、细菌或霉菌孳生霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长堵塞滤板，导致压力上升。所以在使用磷酸盐缓冲液时一般要现配现用。

5、溶质吸附当溶质在柱子上有较强的吸附，且所用的流动相难以将它们洗脱时，累积的未洗脱溶质也会造成阻力增大和压力上升。

6、流动相更换过度较快当更改流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力上升。

7、压力脉冲运行过程中，有时会产生系统内压力的蓦地升降。如此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力上升。

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液相色谱柱填装程序

液相色谱柱、特别是高效液相色谱柱的填装，需要有较高的技巧和娴熟的技能。因此，有人甚至将“装柱”看作是“艺术加技术”。但是，只要把握了一些基本的规律和方法，任何试验室都可以填装出具有较高柱性能的色谱柱。当然，目前大多数试验室多是购买商品预填装柱来充分分别、分析之需。但是在一些有特别需要的情况下，或为节省经费，在试验室中自行填装高效液相色谱柱还是可取的。

液相色谱柱填装程序中应当注意的问题：

①高压操作的安全问题。常发生的问题是柱子与匀浆罐连接不牢，造成加压时柱头被高压冲下或柱子从匀浆罐上滑脱。此时，轻则填装失败，材料损失，重则造成人身损害事故，确定要加以防范。除每次填装前均须认真确认是否连接正确且牢靠外，可以还可加上由法兰盘和长螺杆构成的防备脱落装置，以防万一、

②通常，先填装的柱床较后填装的柱床紧密。因此，当使用时宜以相反的方向为宜，即让近匀浆罐一端作为使用时流动相的出口，而填装时的出口端则作为流动相的