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2024年大学试题(农学)-植物组织培养笔试考试历年高频考点试题摘选含答案第1卷一.参考题库(共75题)1.一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,光照强度较弱幼苗生长粗壮。2.在植物组织培养中细胞分裂素和生长素各有什么作用?3.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以0.3—0.5mm、带()个叶原基为好。4.大多数植物组织培养培养基最适pH为()A、5.0-7.0B、5.0-6.0C、3.0-4.0D、7.0-8.05.选择适宜的外植体需从()、()、()、()及外植体的生理状态和发育年龄等方面加以考虑。6.简述植物茎尖脱毒和热处理脱毒的原理与方法。7.常用的细胞分裂素KT、ZT、()8.兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁,非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁。9.适合花粉培养的最适时期是()A、单核早期B、单核靠边期C、二核期D、三核期10.培养基中的铁盐,常用不易分解的乙二胺四乙酸铁螯合物,以防在pH较高时铁被氧化为不溶的氢氧化铁。11.愈伤组织是一种最常见的培养类型,因为除了茎尖分生组织培养和少数器官培养外,其它培养类型都要经历愈伤组织阶段才能产生再生植株。12.无病毒苗是指不含该种植物的主要危害病毒,即经检测主要病毒在植物内的存在表现()的苗木。13.试述植物组织培养中影响器官分化的因素有哪些?在实验研究中应该如何考虑这些因素以达到较好的器官分化效果?14.1902年,Haberlandt提出了植物细胞(),1934年,White出版了《植物组织培养手册》从而使植物组织培养为一门新兴学科。15.植物培养技术:灭菌、()、培养、驯化四个环节。16.对植物组织培养的培养基灭菌时,一般情况采用的条件是121摄氏度,保持时间是()分钟。17.光照条件下有利于细胞、愈伤组织的增殖,而器官的分化往往需要黑暗。18.1960年Cocking等人用酶分离原生质体获得成功,开创了()和体细胞杂交工作。同年Morel培养兰花的茎尖,获得了快速繁殖的脱毒兰花。其后,国际上相继把组织培养技术应用到兰花的快速繁殖上,建立了“兰花工业”。19.为什么茎尖培养可获得无特定病毒植株?怎样获得无特定病毒的试管苗?获得的无病毒苗用一种方法鉴定其真的无特定病毒的植株?20.茎尖微繁过程有哪几个阶段?21.一般液体培养的继代时间较短,()继代一次;而固体培养继代时间可以长些,()继代一次。22.实验室必须满足三个基本的需要是什么?23.茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养 两种类型。前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm,最小只有几十微米的茎尖进行培养,目的是获得无病毒植株;后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养,目的是()24.使单倍体植株染色体加倍的途径主要有自然加倍、人工加倍和()25.人工种子包裹方法离子交换法、干燥法、()26.如何减轻试管苗玻璃化现象?如何防止外植体的真菌污染?27.植物生长物质如何调控外植体形态发生?28.植物离体授粉技术通常包括()、()、()三个方面。29.植物生长调节物质使用不当时,材料也容易褐变,生长素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用。30.养基成分主要包括无机营养成分、有机营养成分、()、碳水化合物、其它物质。31.离体快繁商业化生产应注意的问题是快繁苗的污染、()、褐化和黄化。32.细胞悬浮培养主要应用于()、诱发和筛选突变体、原生质体培养和细胞器分离、食品生产等。33.活性炭在组织培养中的作用有()A、吸附有毒物质B、减少褐变,防止玻璃化C、创造黑暗环境,利于根的生长D、增加培养基中的养分34.一般将微量元素母液均配制成100倍,在配制培养基时,使用量为10ml/L。35.超低温保存也叫(),是指将植物的离体材料包括茎尖(芽)、分生组织、胚胎、花粉、愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等,经过一定的方法处理后在超低温(-196℃液氮)条件下进行保存的方法。36.下列有关生长素说法错误的()A、诱导愈伤组织形成B、体细胞胚的产生C、试管苗生根D、促进茎增粗37.组织培养中常用的灭菌方法?38.超低温保存是指在-100℃温下使细胞代谢和生长处于基本停止的状态,在适宜的条件下可迅速繁殖,生出新的植株,并保持原来的遗传特性。39.植物组织与细胞培养方法生产出药品,农药,香料,色素及食品添加剂。40.筛选培养基的方法:单因子试验法、多因子试验法、()41.无菌操作室适当位置应吊装1~2盏紫外灯,用以经常地照射灭菌。42.植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为光培养和()培养。43.以银杏胚培养为例,简述无菌接种操作的流程和注意事项。44.植物组织培养技术主要包括哪些环节?各环节的主要工作内容?45.胚状体发育顺次经过原胚期、()、心形胚期、鱼雷形胚期和子叶期。46.再分化分为四个水平,分别是什么?47.能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是()A、GAB、IAAC、NAAD、ZT48.通过器官发生再生植株的方式有三种:第一种最普遍的方式是先分化芽,再分化根;第二种是先分化根,再分化芽,这种方式中芽的分化难度比较大;第三种是在愈伤组织块的不同部位上分化出根或芽,再通过()形成完整植株。49.种质资源离体保存方法有两种:限制生长保存和()50.连续培养的种类:半连续培养、()51.植物组织培养过程中要注意决定愈伤组织生根还是生芽的关键取决于细胞分裂素与生长素之间浓度的比率。当配制的培养基中生长素/细胞分裂素的比例高时则有利于生根;生长素/细胞分裂素的比例低时则有利于生芽;若两者浓度相当时,既不利于生根,也不利于生芽,而是()的产生占优势。52.在培养基中加入活性炭有什么作用?53.种质保存分为原生境保存和()两种方式。54.下列不属于活性炭在组织培养中的作用是()A、吸附有毒物质B、减少褐变,防止玻璃化C、创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长D、增加培养基中的养分55.试管苗的增殖率是指植物()中间繁殖体的繁殖率。56.简述植物组织培养的最适温度、光照、光周期、强度、湿度、培养基的pH值。57.什么是看护培养法?58.外植体消毒应注意的问题是什么?59.在幼胚培养基中,蔗糖的主要作用是()、提供碳源和能源和防止幼胚早熟萌发。60.简述胚胎培养的操作步骤。61.胚胎培养的意义是什么?62.造成组织培养过程中发生污染的原因有哪些?如何有效控制污染?63.()方法不仅可以快速获得纯系,而且还能缩短育种年限、提高选择效率。A、胚培养B、基因工程C、人工种子D、单倍体育种64.压片染色法是检测花粉发育时期的简便有效方法,常用染色剂为()65.植物快繁的器官再生主要类型有哪些?66.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚。67.瓶口封塞可用多种方法,但要求绝对密闭,以防止培养基干燥和杂菌污染。68.在配制激素6-BA母液中应先加少量溶剂()A、NaOHB、HClC、NaClD、95%乙醇69.下列哪种在MS培养基中不起促进生长作用()A、氨基酸B、肌醇C、维生素D、琼脂70.胚休培养分二类:受精胚珠的培养和未受精胚珠的培养。受精胚珠培养目的一是打破种子的体眠二是挽救胚的发育,以获得杂交种。未受精胚珠培养的目的是获得()71.细胞的全能性,可以通过成熟细胞的脱分化和再分化过程得以体现。72.下列材料遗传上最稳定的是()A、茎尖分生组织B、不定芽C、体细胞胚D、愈伤组织73.6-BA是指()A、苄基腺嘌呤B、激动素C、萘乙酸D、吲哚乙酸74.常见的培养基种类有哪些?各有何特点?专为什么材料的培养而设计的?75.在Schleiden和Schwann所发展起来的细胞学说推动下,1902年德国植物生理学家G.Haberlandt提出了()的设想,并成为用人工培养基对分离的植物细胞进行培养的第一人。第2卷一.参考题库(共75题)1.简述接种前的准备及接种操作。2.大多数植物组织培养最适温度一般为()℃。A、37±1B、26±2C、16±2D、4±23.固体培养基与液体培养基相比有何特点?4.体细胞胚发生的途径可分为()和直接途径。5.组培过程中培养物的细胞分裂停止,绿叶变黄,进而变白,这属于缺氮症。6.植板率是指已形成细胞团的单细胞与()的百分数。7.组织培养植株再生的途径:直接产生不定芽和()8.愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和()方式。9.愈伤组织的形态发生有哪些情况?10.低温保存是基本特征是保存材料的定期(),不断繁殖更新。11.下列不能作消毒剂进行外植体消毒时()A、升汞B、次氯酸钠C、过氧化氢D、甲醛12.驯化的目的是在于提高试管苗对外界环境条件的适应性,提高其()的能力,促使试健壮,提高苗的移裁成活率。13.()也称解剖镜,用于切取很小的外植体(如茎尖分生组织、胚胎等)和解剖、观察植物的器官、组织等。A、倒置显微镜B、电子显微镜C、双目实体显微镜D、普通生物显微镜14.植物组织培养的整个历史可以追溯到19世纪末和20世纪初。一个多世纪来,植物组织培养的发展大致可以分为探索、奠基和()三个阶段。15.看护培养法的特点是什么?16.FAD法可显示细胞内脱氢酶的活性,脱氢酶使FAD还原生成一种红色的物质,作为检验活细胞的方法。17.固相化的方法有哪些?18.每次接种前,可用70%酒精喷雾接种室,使空气中的细菌和真菌孢子随灰尘的沉降而沉降;用70%酒精擦洗超净工作台面,再用紫外灯照射20分钟。19.带芽茎段培养可能获得:单苗(芽)、丛生苗(芽)、完整植株、()20.植物组织培养按培养基的物理状态分为固体培养、液体培养()21.环境的相对湿度过低易使培养基丧失大量水分,湿度过高时,则易造成污染。22.一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成()的现象称为"脱分化"。23.原生质体融合的方法有无机盐诱导融合、高pH高钙离子法、PEG法、聚乙二醇与高pH高钙相结合的诱导融合、()24.试管苗的驯化注意:()、温、光、水、肥、气的综合管理。25.如何减轻植物组织培养中试管苗玻璃化现象?26.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是()A、细胞分裂加快B、正在分裂的细胞体积小,内无液泡C、细胞的核和核仁增至最大D、细胞中的RNA 含量减少,而DNA 含量保持不变27.培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是()28.组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化和()29.如何得到单细胞无性系?30.培养基中加入活性炭是为了向植物提供碳源。31.花药培养是器官培养,花粉培养属于细胞培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成()32.培养基的母液一般是配成大量元素,微量元素,维生素和氨基酸4类存放备用。MS培养基中组成大量元素的盐类分别是()、()33.通过植物组织培养获得无病毒苗的方法主要有茎尖分生组织培养、愈伤组织培养、珠心胚培养及()34.2,4—D可用01mol/L的HCl助溶,再加蒸馏水定容。35.种质资源的离体保存:是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质等材料,采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存,在需要时可重新恢复其生长,并()的方法。36.MS培养基是1962年Murashige和Skoog为培养烟草材料而设计的。它的特点是()的浓度高,具有高含量的氮、钾,尤其硝酸盐的用量很大,同时还含有一定数量的铵盐。37.干燥箱用于干燥需保持80~100℃;进行干热灭菌需保持120℃,达1至3小时。38.什么是看护培养?其具体的方法是什么?39.器官发生形成小苗的方式有哪些?40.植物组织培养有哪些特点?41.在植物组织培养中,通过哪些途径可以得到完整的植株?42.植物培养技术:()、接种、培养、驯化四个环节。43.用平板培养法培养单细胞或原生质体时,常用()来衡量细胞培养效果。44.培养基当中生长素与细胞分裂素的比例高时,仅形成愈伤组织。45.原生质体的融合可实现体细胞的杂交,其融合的方式分为自发融合和()两类。46.快速冷冻法的关键是使细胞内的水分迅速越过冰晶生长的危险温度区,检测冷冻保存后的细胞和器官活力的最基本方法是()47.适合外植体材料表面消毒的方法是()A、高压蒸汽B、适宜浓度的消毒剂浸泡C、紫外线消毒D、熏蒸消毒48.组织培养细胞再分化包括四个水平:细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化(器官发生)和()49.因地制宜建一个组织培养实验室,需要哪些分实验室?各分室的作用是什么?50.茎尖分生组织培养的目的主要是(),其茎尖一般取()毫米。为了使脱毒效果更好,可以将茎尖分生组织培养与()结合起来。脱毒处理的试管苗,在用于生产之前,必须进行()51.简述实验室的组成及功能。52.花药培养是器官培养,花粉培养属()53.胚珠培养分二类:受精胚珠的培养和未受精胚珠的培养。受精胚珠培养目的一是打破种子的休眠;二是挽救胚的发育,以获得杂交种。未受精胚珠培养的目的是获得()54.冷冻保存后细胞和器官最基本的活力检测方法是()55.离体胚的培养分为二种类型,()和幼胚培养。56.植物组织培养发展可分为三个时期:()、奠基阶段、快速发展和应用阶段。57.下列具有细胞全能性的细胞是()A、成熟的老细胞B、幼嫩的组织细胞C、愈伤组织细胞D、番茄的受精合子58.胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别是什么?59.如何纯化分离的植物原生质体并鉴定其活力?60.应用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病毒苗,主要程序为()→()→()→()→()61.组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是污染、褐变、()62.幼胚培养时,其发育过程有()、呸性发育、形成愈伤三种方式。63.通过子房的培养,即可能等到单倍体植株,也有可能得到二倍体植株。64.进行植物组织培养最基本的前提条件是()65.在固体培养时()是使用最方便的。66.在组织培养中,IAA、ZT和GA必须用过滤灭菌法灭菌,而接种室空间采用()或甲醛熏蒸法灭菌。67.在组织培养中,IAA和GA必须用()灭菌,而接种室空间采用70%的酒精或2%新洁尔灭喷雾或甲醛熏蒸法灭菌。68.培养基中常用的植物激素有哪些?各有何作用?69.离体叶片在诱导愈伤组织的培养基上培养,一般从()或叶脉处容易发生愈伤组织。70.微繁不定芽的产生有两个途径,一是不定芽不通过愈伤组织由外植体直接产生,二是外植体诱导产生愈伤组织,由愈伤组织上产生不定芽。后一途径相对较为优越,因为通过愈伤组织不会出现一些突变。71.在离体叶培养中,6-BA和KT利于芽的形成;24D利于()的形成。72.超低温保存冷冻处理的方法包括:快冻法、慢冻法、预冻法和()四种方法。73.简述细胞悬浮培养主要应用。74.微繁不定芽的产生有两个途径,一是不定芽不通过愈伤组织由外植体直接产生,二是外植体诱导产生愈伤组织,由愈伤组织上产生不定芽。前一途径相对较为优越,因为通过愈伤组织会出现一些突变。75.植物脱病毒一般采用茎尖培养脱毒和()两种方法。第1卷参考答案一.参考题库1.参考答案:错误2.参考答案: 生长素能促进细胞的纵向伸长,它的作用具有两重性:既促进生长,又能抑制 生长、甚至杀死植物;既促进发芽,又会抑制发芽;既能防止落花落果,又可疏花疏果。 这取决于浓度、细胞的年龄和器官的种类。一般低浓度促进生长,中浓度抑制生长,高 浓度则杀死植物。 细胞分裂素能促进细胞分裂和扩大、延迟衰老和保鲜、诱导芽的分化、促进侧芽发 育,防止果树生理落果、打破种子的休眠,促使其发芽等作用。3.参考答案:1—24.参考答案:B5.参考答案:植物基因型;外植体来源;外植体大小;取材季节6.参考答案: (1)茎尖培养脱毒原理是感染病毒植株的体内病毒的分布不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染程度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少。方法:微茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱毒和珠心组织培养脱毒。 (2)热处理脱毒是当植物组织处于高于正常温度的环境中时,组织内部的病毒受热后部分或全部钝化,不能生成或生成病毒很少,以致病毒含量不断降低从而达到脱毒的目的。热处理的方法有温汤浸渍处理法和热空气处理脱毒法。7.参考答案:6-BA8.参考答案:错误9.参考答案:B10.参考答案:正确11.参考答案:正确12.参考答案:阴性反应13.参考答案: 首先,通过调节培养基中生长素和激动素或激动素之间的平衡关系,可以在一定程度上影响不定芽的分化。培养基中存在的腺嘌呤或激动素能够促进不定芽的分化和发育,但是培养基中的其他化合物,特别是IAA和NAA可以改变这种促进作用,因为生长素能够抑制不定芽的形成。当与激动素或腺嘌呤结合使用时,生长素可以抵消他们促进不定芽形成的作用,若IAA的相对浓度较高则有利于细胞的增殖和根的分化;若腺嘌呤或激动素的相对浓度较高,则有利于不定芽的分化;当这两种激素之间的比例适中时,则或产生无结构的愈伤组织。赤霉素对于不定芽的分化具有抑制作用,但是如果不定芽已经形成,赤霉素则会促进它们进一步伸长。不同组织在不定芽分化过程中对生长素和细胞分裂素的要求是不同的,所要求的水平取决于这两类物质的内生水平。 其次,培养方式和培养条件也会影响不定芽的分化。一些植物的培养材料在固体培养基上只能以一种完全无结构的状态生长,但在成分相同的液体培养基中却能分化不定芽丛。此外,光周期、光质和光强对器官的分化也有影响。一般培养物适合的光强为1000~1500lx,光周期为12~16h,金紫外和蓝紫光能够促进芽的发生,而红光对生根具有显著作用。例如红光和远红外光交替照射对杜鹃花器官发生有良好效果。根据培养材料种类的不同,不同的培养方式和培养条件对不定芽分化的影响有所不同。 最后,培养材料的基因型、供体植株和外植体的生理状态、外植体的细胞发育状态、培养物的历史及内生激素水平也会影响器官的分化,在进行组织培养时应该进行具体分析和研究。14.参考答案:“全能性”学说15.参考答案:接种16.参考答案:15~2017.参考答案:错误18.参考答案:植物原生质体培养19.参考答案: (1)感染病毒植株的体内病毒的分布并不均匀,病毒的数量随植株部位及年龄而异,越靠近茎顶端区域的病毒的感染深度越低,生长点则几乎不含或含病毒很少。 (2)了解植物携带何种病毒,病毒在体内的分布位置;母体植株的选择和预处理;茎尖的剥离;脱毒效果检测。 (3)取培养植株的叶片置于研钵中,加入少量的水和等量的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0),磨成匀奖,将其涂抹在指示植株叶片上,在指示植物的叶片撒上金刚砂,通过轻轻摩擦使汁浸入叶片表皮细胞而又不损伤叶片。5分钟后用清水清洗叶面。将指示植株放于防蚜虫网罩的温室内。然后视其病斑的有无,来判断是否脱除了病毒。20.参考答案: 茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段: 1.无菌培养的建立。 2.芽的增殖。 3.中间繁殖体的增殖。 4.诱导生根。 5.试管苗的移栽。21.参考答案:1周;2-4周22.参考答案:试验准备;无菌操作;控制培养23.参考答案:离体快繁24.参考答案:通过愈伤组织再生加倍25.参考答案:冷却法26.参考答案: (1)利用固体培养方法,增加琼脂浓度,降低培养基中的渗透势,造成细胞吸水阻遏。或提高培养基中蔗糖含量或加入渗透剂,减少培养基中植物材料可获得的水分,这也可以抑制玻璃化的发生。 (2)适当降低培养基中的细胞分裂素和赤霉素的浓度。或者,适当增加培养基中Ca、Mg、Mn、K、P、Fe、Cu、Zn元素含量,降低N和CL元素比例,特别是降低胺态氮的浓度,提高硝态氮量。 (3)增加自然光照。 因为自然光中的紫外线能促进试管苗成熟。 (4)改善培养器皿的气体交换状态封口膜。 (5)在培养基中添加其他物质。如添加马铃薯汁可降低油菜的玻璃苗的产生频率。27.参考答案:在植物组织培养过程中,常用的植物激素有生长素类和细胞分裂素类,在高生长素(如使用高浓度2,4—D)时能促进外植体的脱分化,在生长素/细胞分裂素比值较高时,促进不定根的发生,比值较低时促进不定芽的发生。28.参考答案:胚珠试管受精;离体子房授粉;雌蕊离体授粉29.参考答案:错误30.参考答案:植物生长调节物质31.参考答案:玻璃化32.参考答案:植物有用物质的生产33.参考答案:A,B,C34.参考答案:错误35.参考答案:冷冻保存36.参考答案:D37.参考答案: 分为物理的和化学的两类: (1)物理方法如干热(烘烧和灼烧)、湿热(常压或高压蒸煮)、射线处理(紫外线、超声波、微波)、过滤和大量无菌水冲洗等措施; (2)化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理。38.参考答案:错误39.参考答案:正确40.参考答案:光谱实验法41.参考答案:正确42.参考答案:暗43.参考答案: 操作流程: ①超净工作台及工具的准备 ②银杏种子消毒 ③接种工具灭菌 ④用接种刀从中间切开银杏种子,取出银杏胚 ⑤打开培养基,用镊子夹取银杏胚,将其接到培养基上 ⑥封口 注意事项: ①防止污染:接种全过程要求无菌操作。为减少污染,要求方法简单、操作迅速 ②银杏胚接种时,切忌接种过深 ③注意胚的形态学上端,不要接倒了44.参考答案: (1)培养基的配制及灭菌 (2)外植体的选择及灭菌 (3)外植体的接种及培养 (4)试管苗的驯化与移栽45.参考答案:球形胚期46.参考答案: (1)细胞水平的分化 (2)组织水平的再分化 (3)器官水平的再分化 (4)植株水平的分化47.参考答案:A,B48.参考答案:维管组织的联系49.参考答案:超低温保存50.参考答案:连续培养51.参考答案:愈伤组织52.参考答案: (1)主要是利用其吸附作用,减少一些有害物质的影响 (2)活性炭使培养基变黑,有利于某些植物生根 (3)对形态发生和器官形成有良好的效应53.参考答案:非原生境保存54.参考答案:D55.参考答案:快速繁殖56.参考答案: (1)温度:大多数组织培养在23~27℃之间进行,一般采用25±2℃。低于15℃时培养,植物组织会表现生长停止,高于35℃时对植物生长不利。 (2)光照:光照强度1000lx—1500lx;黑暗条件利于细胞、愈伤组织的诱导增殖;光照条件利于器官的分化。组织培养最常用的光暗周期是16h的光照,8h的黑暗 (3)湿度:一般要求70%-80%的相对湿度,常用加湿器或经常洒水的方法来调节湿度。 (4)渗透压:通常1-2个大气压对植物生长有促进作用,2个大气压以上就对植物生长有阻碍作用,而5-6个大气压植物生长就会完全停止,6个大气压植物细胞就不能生存。 (5)pH制不同的植物对培养基最适PH值的要求也是不同的, 大多在5—6.5左右,一般培养基皆要求5.8,一般来说pH值高于6.5时,培养基会变硬;低于5时,琼脂不能很好地凝固。因为高温灭菌会降低pH值(约0.2-0.3个pH值)因此在配制时常提高pH值0.2-0.3单位57.参考答案:指用一块活跃生长的愈伤组织块来看护单个细胞,并使其生长和增殖的方法。58.参考答案: 1.要考虑药剂对各类菌类的杀灭效果,从中选出最有效的杀菌剂; 2.考虑植物材料对杀菌剂的忍耐力。59.参考答案:维持渗透压60.参考答案: 1.取子房 2.常规表面消毒 3.解剖镜下,取胚珠、去珠被、取出完整幼胚 4.固体培养61.参考答案: ①、克服远缘杂种的不育性 ②、使胚胎发育不完全的植株获得后代 ③、缩短育种年限,提高育种效率62.参考答案: 造成组织培养过程中污染的原因很多,如工作环境及仪器的因素、培养基及器皿灭菌不彻底、外植体带菌、操作时不遵守操作规程等。造成污染的病原主要分为细菌和真菌两大类。 真菌性污染主要指霉菌引起的污染。一般接种后3~8d即可发。真菌性污染一般多由接种室内的空气不清洁、超净工作台的过滤效果不理想、操作不慎等原因引起。此类污染可通过完善操作、控制培养环境、严格操作程序来克服。 细菌性污染除外植体带菌或培养基灭菌不彻底外,主要是操作人员的不慎造成。除要求操作人员严格按照无菌操作程序操作外,外植体带菌引起的污染与外植体的种类、取材季节、部位、预处理方法及消毒方法密切相关。因此,取材以春夏生长旺季、当年生的嫩梢为佳,应尽量选择晴天中午进行,或取离体枝梢在洁净空气条件下抽芽,然后从新生组织中取材接种。 外植体的彻底消毒是控制污染的前提,应根据不同材料选择合适的消毒剂和消毒方法,有些特殊材料还须进行预处理,以达到最佳消毒效果。对于材料内部带菌的组织有时还需在培养基中加入适量抗生素。63.参考答案:D64.参考答案:醋酸洋红65.参考答案:短枝发生型;丛生芽发生型;不定芽发生型;胚状体发生型;原球茎发生型66.参考答案:错误67.参考答案:错误68.参考答案:B69.参考答案:D70.参考答案:单倍体植株71.参考答案:正确72.参考答案:A73.参考答案:A74.参考答案: 常见的培养基有如下五类: 1、MS培养基,特点是无机盐和离子浓度较高,为较稳定的平衡溶液,专门为培养烟草细胞而设计。 2、B5培养基,主要特点是含有较低的铵,因为铵可能对不少培养物的生长有抑制作用,专门为培养大豆根细胞而设计。 3、White培养基,特点是无机盐数量较低,适于生根培养,专门为培养番茄根尖而设计。 4、N6培养基,特点是成分简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高,专门为水稻等禾谷类植物花药培养而设计。 5、KM-8P培养基,特点是有机成分较复杂,专门为原生质体培养设计。75.参考答案:细胞全能性第2卷参考答案一.参考题库1.参考答案: 无菌操作前的准备步骤: (1)在接种3天前用甲醛熏蒸接种室,并于接种前3小时打开其内紫外线灯进行杀菌; (2)在接种前20分钟,打开超净工作台的风机以及台上的紫外线灯; (3)接种员先洗净双手,在缓冲间换好专用实验服,并换穿拖鞋等; (4)上工作台后,用酒精棉球搽拭双手,特别是指甲处。然后搽拭工作台面; (5)先用酒精棉球搽拭接种工具,再将镊子和剪刀从头至尾过火一遍,然后反复过火尖端处,对培养皿要过火烤干; (6)接种时,接种员双手不能离开工作台,不能说话、走动和咳嗽等; (7)接种完毕后要清理干净工作台,可用紫外线灯灭菌30分钟,若连续接种,每5天大强度灭菌一次。 无菌接种步骤: (1)将初步洗涤及切割的材料放入烧杯,带入超净台上,用消毒剂灭菌,再用无菌水冲洗,最后沥去水分,取出放置在灭过菌的纱布上或滤纸上。 (2)材料吸干后,一手拿镊子、一手拿剪刀或解剖刀,对材料进行适当的切割。(如叶片切成0.5cm2的小块;茎切成含有一个节的小段。微茎尖要剥成只含1-2片幼叶的茎尖大小等。)在接种过程中要经常灼烧接种器械,防止交叉污染。 (3)用灼烧消毒过的器械将切割好的外植体插植或放置到培养基上。2.参考答案:B3.参考答案: 优点:操作简便,通气问题易于解决,便于经常观察研究. 缺点:培养物与培养基的接触(即吸收)面积小,各种养分在琼脂中扩散较慢,影响养分的充分利用,同时培养物排出的一些代谢废物,聚集在吸收表面,对组织产生毒害作用。4.参考答案:间接途径5.参考答案:错误6.参考答案:接种总细胞数7.参考答案:通过愈伤组织形成不定芽8.参考答案:胚状体9.参考答案: (1)愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成,即无根的芽或无芽的根; (2)先形成芽,再在芽伸长后,在其茎的基部长出根而形成小植株,多数植物属这种情况; (3)先产生根,再从根基部分化出芽而形成小植株。这种情况较难诱导芽的形成,尤其对于单子叶植物; (4)先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根,然后两者结合起来形成一株小植株。 单子叶植物:与双子叶植物诱导发生过程类似,只是在形态上无鱼雷形胚等阶段,成熟体胚上有盾片、胚芽鞘和胚根等结构。10.参考答案:继代培养11.参考答案:D12.参考答案:光合作用13.参考答案:C14.参考答案:迅速发展15.参考答案: 优点: ①简便易行。 ②效果好,易于成功。 缺点:不能在显微镜下直接观察细胞的生长过程。16.参考答案:错误17.参考答案:凝胶包埋、表面吸附、网格及泡沫固定、膜固定。18.参考答案:正确19.参考答案:愈伤组织20.参考答案:半固体培养基21.参考答案:正确22.参考答案:细胞团23.参考答案:电融合技术24.参考答案:基质25.参考答案: 在组织培养过程中,经常会发现不定芽丛或者试管苗畸形生长,茎叶呈半透明水渍状,叶片失绿、皱缩,并沿纵向卷曲,脆弱易碎,叶表面完全无蜡质,称之为“玻璃化现象”。这种“玻璃苗”细胞丧失持水能力,细胞内水分大量外渗,增加了植株水分的散失和蒸腾,是组织培养中一种生理失调或生理病变,它极易引起植株死亡,很难移植成活,已成为茎尖脱毒、工厂化育苗等方面的严重障碍。为了更好解决“玻璃化现象”,可以: (1)适当提高培养基中的琼脂、蔗糖或其他渗透剂的浓度,降低培养基的衬质势。 (2)可在培养基中加入适量生长延缓剂,例如ABA、PP333,并降低培养基中含氮量和细胞分裂素、赤霉素浓度。 (3)增加培养容器的透气性,并避免容器底部受下层日光灯的加热,使容器底部适当降温造成容器内的湿度有自上而下的梯度。 (4)控制培养室内温度,可对培养材料适当进行低温处理。 (5)增加自然光照。26.参考答案:A,B,C,D27.参考答案:茎尖培养脱毒28.参考答案:植株水平的分化29.参考答案: 在细胞培养中,常由分散性较好的愈伤组织或悬浮培养物来制备单细胞,也可以用机械法和酶解法从植物器官直接制备单细胞。由分离的单细胞经看护培养法、微室培养法或平板培养法,即可得到单细胞无性系。30.参考答案:错误31.参考答案:单倍体植株32.参考答案:硝酸钾;硝酸铵33.参考答案:花药培养34.参考答案:错误35.参考答案:再生植株36.参考答案:无机盐37.参考答案:错误38.参考答案: 看护培养指用一块生长活跃的愈伤组织来看护单个细胞或其他培养物,使其生长和增殖的方法。 具体方法: 1、将生长活跃的愈伤组织放入灭过菌的固体培养基上,并在愈伤组织上放一片无菌滤纸片。 2、将该愈伤培养过夜。 3、将单细胞或其他培养物放于滤纸片上面,移入培养室培养。39.参考答案: (1)愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成,即无根的芽或无芽的根; (2)先长芽,后长根,多数情况; (3)先长根,再从根的基部长芽。这种情况较难诱导芽的形成,尤其对于单子叶植物; (4)先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根,然后两者结合起来形成一株植株。40.参考答案: (1)培养条件可以人为控制 (2)生长周期短,繁殖率高 (3)管理方便,利于工厂化生产和自动化控制41.参考答案: (1)外植体→愈伤组织→根、芽→试管苗 ①同时长芽和根 ②先长芽,再长根 ③先长根,再长芽 (2)外植体→胚状体→试管苗 (3)外植体→根、芽→试管苗42.参考答案:灭菌43.参考答案:植板效率44.参考答案:错误45.参考答案:诱导融合46.参考答案:再培养法47.参考答案:B48.参考答案:植株
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