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第1章第2节一[基础达标]题组一培育基的种类、成分及用途1.(2024·广东名校联考)下列有关微生物养分物质的叙述中,正确的是()A.是碳源的物质不行能同时是氮源B.微生物培育所需的培育基都须要供应碳源、氮源、水、无机盐,缺一不行C.牛肉膏蛋白胨培育基属于合成培育基,养分全面D.微生物在固体培育基表面生长,可形成肉眼可见的菌落【答案】D【解析】是碳源的物质同时也可以是氮源,如牛肉膏和蛋白胨均可作为碳源和氮源,同时还供应维生素,A错误;并非全部微生物的培育基中都必需含有碳源、氮源,如自养的微生物不须要碳源,固氮微生物不须要氮源,B错误;牛肉膏蛋白胨培育基是一种应用最广泛和最一般的培育基,属于自然培育基,C错误;固体培育基可用于微生物的分别鉴定,微生物在固体培育基表面生长,可形成肉眼可见的菌落,D正确。2.(2024·广东名校联考)下表为某培育基的配方,有关叙述正确的是()成分牛肉膏葡萄糖K2HPO4琼脂蒸馏水含量10g10g2g适量定容至1000mLA.从物理性质看该培育基属于液体培育基B.该培育基中属于碳源的物质有葡萄糖、牛肉膏,属于氮源的物质是牛肉膏C.能在此培育基上生长的只有大肠杆菌D.该培育基调整合适的pH后就可以接种运用【答案】B【解析】从物理性质看该培育基含有琼脂,属于固体培育基,A错误;培育基中属于碳源(为微生物供应碳元素)的物质有葡萄糖、牛肉膏,属于氮源(为微生物供应氮元素)的物质是牛肉膏,B正确;许多微生物都能利用葡萄糖,此培育基中能生长多种微生物,不仅仅只有大肠杆菌,C错误;该培育基调整合适的pH后要进行高压蒸汽灭菌操作,D错误。3.据报道,在某餐馆就餐的多位客人均在餐后半小时出现恶心、呕吐、腹泻等症状。食品卫生监督管理局的工作人员接到群众举报后立即出动,在该餐馆采集样本,并对样本进行培育,检测鉴定,最终发觉该餐馆运用的筷子未经严格消毒,大肠杆菌等多种细菌数量严峻超标。据此推断,工作人员选用的培育基按功能分,应属于()A.选择培育基 B.液体培育基C.固体培育基 D.鉴别培育基【答案】D【解析】由题干信息分析可知,食品卫生监督管理局的工作人员通过培育样本,发觉样本中含有多种细菌,最终确定其中含有大肠杆菌等菌种,故该培育基按功能分,属于鉴别培育基。题组二无菌技术4.(2024·广东广州期中)消毒和灭菌是微生物培育中常用的操作方法。下列说法正确的是()A.在100℃条件下煮沸5~6分钟属于灭菌方法,可杀死微生物的养分细胞和一部分芽孢B.无菌技术中,若处理对象为液体,则只能消毒,不能灭菌C.试验操作时应避开已经灭菌处理的材料用具与四周物品相接触D.高压蒸汽灭菌锅只有当压力表的压力降到一个标准大气压时,才能打开盖子【答案】C【解析】在100℃条件下煮沸5~6分钟属于煮沸消毒法,可杀死微生物的养分细胞,不能杀死芽孢,A错误;无菌技术中,若处理对象为液体,可以接受高压蒸汽灭菌法灭菌,B错误;试验操作时应避开已灭菌处理的材料用具与四周物品接触,以防止杂菌污染,C正确;高压蒸汽灭菌后须要待压力降至零位时,打开放气阀,待蒸汽完全放出后,打开容器,取出灭菌物品,D错误。5.(2024·广东名校阶段练习)微生物培育过程中,要特殊重视无菌操作,请分析下列操作,正确的项数是()①培育基、锥形瓶都要进行干热蒸汽灭菌②加入培育基中的指示剂和染料不须要灭菌③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌④干热灭菌可以杀死微生物的养分细胞和部分芽孢⑤涂布平板时所用的涂布器需酒精浸泡后灼烧灭菌⑥家庭制作泡菜并无刻意的灭菌环节,发酵初期乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长A.一项 B.二项C.三项 D.四项【答案】B【解析】培育基应进行高压蒸汽灭菌,①错误;加入培育基中的指示剂和染料须要灭菌,否则会感染杂菌,影响微生物的培育,②错误;家庭制作葡萄酒时将容器和葡萄进行消毒,不须要灭菌,③错误;煮沸消毒可以杀死微生物的养分细胞和部分芽孢,而灭菌,例如干热灭菌能杀灭环境中一切微生物,包括孢子和芽孢,④错误;涂布平板时所用的涂布器需70%酒精浸泡后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌,⑤正确;家庭制作泡菜时须要将容器进行清洗消毒,但不须要刻意灭菌,⑥正确。题组三微生物的纯培育6.下列关于倒平板及对菌种纯化的说法,正确的是()A.倒平板时左手将灭过菌的培育皿盖完全打开,右手将锥形瓶中培育基倒入培育皿(10~20mL),左手立即盖上培育皿盖B.运用已灭菌的接种环及培育基之后不须要再灭菌C.平板冷凝后要将平板倒置,以防皿盖上的冷凝水流入培育基D.平板划线法是首先进行梯度稀释,然后将稀释的菌种通过接种环在固体培育基上连续划线,从而将聚集的菌种渐渐分散形成单个菌落【答案】C【解析】倒平板时用左手的拇指和食指将培育皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,而不是干脆将盖完全打开,A错误;运用灭过菌的接种环及培育基之后仍需进行灭菌处理,以免污染环境或感染操作者,B错误;平板冷凝后要倒置放置,防止皿盖上的冷凝水珠落入培育基,C正确;平板划线法不须要梯度稀释,干脆通过接种环在固体培育基上连续划线,从而将聚集的菌种渐渐稀释、分散,形成单个菌落,D错误。7.下列有关微生物的分别与培育的叙述中,不正确的是()A.获得纯净培育物的关键是防止杂菌污染B.倒置平板可防止培育皿盖上的冷凝水滴落造成污染C.倒平板时将培育皿的盖拿开,以便于将锥形瓶中的培育基倒入培育皿D.检验培育基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培育基放在恒温箱中培育【答案】C【解析】微生物培育中获得纯净培育物的关键是防止杂菌污染,A正确;倒平板后须要将培育皿倒置,目的是防止培育皿盖上的冷凝水滴落,造成污染,B正确;倒平板时左手拿起一套培育皿,用中指、无名指和小指托住培育皿底部,用食指和大拇指夹住皿盖并开启一缝,恰好能让三角瓶伸入,随后倒出培育基,C错误;检验培育基是否被杂菌污染的最有效方法是将未接种的培育基放在恒温箱中培育,一段时间后若有菌落,说明培育基被污染,若无菌落,说明培育基没有被污染,D正确。8.有关纯化酵母菌试验操作的叙述,错误的是()A.在其次区域内划线时,接种环上的菌种干脆来源于菌液B.第一步灼烧接种环是为了避开接种环上可能存在的微生物污染培育物C.每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种D.划线结束后,灼烧接种环能刚好杀死接种环上的菌种,避开细菌污染环境和感染操作者【答案】A【解析】在其次区域内划线时,接种环上的菌种干脆来源于第一区域的划线末端,A错误;为避开杂菌的污染,第一步操作时须要灼烧接种环,B正确;每次划线前,灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种,C正确;为避开细菌污染环境和感染操作者,划线结束后,灼烧接种环能刚好杀死接种环上的菌种,D正确。9.(2024·广东惠州期中)为纯化某菌种,某小组在鉴别培育基上划线接种了该种细菌,培育结果如图所示。下列叙述正确的是()A.图中的菌落均由同种微生物形成B.该过程中接种环至少灼烧3次C.该培育基运用完之后,无需再进行灭菌处理D.从3区菌落挑取后进行培育可获得纯培育物【答案】D【解析】同种微生物形成的菌落大小、形态、颜色等特征较为稳定,而图中菌落特征不愿定完全相同,且试验是在鉴别培育基上进行的菌种纯化,故图中的菌落不愿定由同种微生物形成,A错误;接种时,须要在第一次接种前以及每一次接种后灼烧接种环,因此接种过程中接种环共需4次灼烧处理,B错误;该培育基运用完之后,须要进行灭菌处理才能丢弃,避开造成污染,C错误;由图可知,3区存在单菌落,挑取一个单个菌落进行纯培育,可获得纯培育物,D正确。[实力提升]10.(2024·广东名校阶段练习)大肠杆菌是人和动物肠道寄生菌,在确定条件下会引起胃肠道等局部组织感染。检验水样中大肠杆菌数目是否符合生活饮用水卫生标准,常用滤膜法测定,其操作流程如下图所示。大肠杆菌的代谢物能与伊红亚甲蓝(EMB培育基的指示剂)反应,菌落呈深紫色。下列对该试验操作的分析,错误的是()A.测定前,滤杯、滤膜和滤瓶均可用干热灭菌法灭菌处理B.留意避开已灭菌处理的材料用具与四周用品接触C.将过滤完的滤膜紧贴在EMB培育基上,完成大肠杆菌的接种操作D.EMB培育基属于选择培育基,只有大肠杆菌能正常生长并形成深紫色菌落【答案】D【解析】干热灭菌法适用于滤杯、滤膜和滤瓶的灭菌,防止杂菌的污染,A正确;已灭菌处理的材料用具须要避开与四周用品接触,否则会被重新感染,导致灭菌失败,B正确;由于过滤完后细菌黏附在滤膜上,将滤膜紧贴在EMB培育基上可以将黏附在滤膜上的菌种接种在培育基上,C正确;EMB培育基属于鉴别培育基,D错误。11.(2024·广东佛山期中)将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱,是许多人日常贮存西瓜的方法。近年来网络上有一种观点认为盖上保鲜膜贮存的西瓜中细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多,某生物探讨小组针对上述说法进行探究,他们将盖保鲜膜保存了三天的西瓜的瓜瓤制备成浸出液,再将浸出液接种到培育基平板上进行视察,下列说法正确的是()A.因为接种的浸出液中含氮,所以培育基可不加氮源B.只须要设置未接种瓜浸出液的空白平板作比照C.培育一段时间后应统计培育基上菌落的种类和数量D.平板中长出的菌落是由一个细胞增殖而成的子细胞群体【答案】C【解析】浸出液虽然含有氮,但由于接种时取用的浸出液少,因此培育基上氮含量少,故培育基要加入氮源,A错误;探究盖上保鲜膜贮存的西瓜中细菌的种类和数目是否比没用保鲜膜的多,除了须要设置未接种瓜瓤浸出液的空白平板作比照外,还须要设置接种没用保鲜膜盖上的瓜瓤浸出液的平板作比照,B错误;由题意可推知,该试验的因变量是菌落的种类和数量,所以培育一段时间后,应统计培育基上菌落的种类和数量,C正确;平板中长出的菌落是可能由一个或多个细胞增殖而成的子细胞群体,D错误。12.请回答下列与大肠杆菌有关的问题。(1)下表是某公司研发的一种培育大肠杆菌菌群的培育基配方。成分蛋白胨乳糖蔗糖K2HPO4显色剂琼脂含量/g10.05.05.02.00.212.0将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL该培育基属于______(填“固体”或“液体”)培育基,该培育基中的氮源是____________________________。(2)在微生物培育操作过程中,为防止杂菌污染,需对培育基和培育皿进行________(填“消毒”或“灭菌”);操作者的双手须要进行清洗和________。(3)将配制好的培育基分装到试管中,加棉塞后若干支试管扎成一捆,包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入________________中灭菌,温度为121℃,时间为15~30min。灭菌完毕拔掉电源,待锅内压力自然降到零,同时温度到达70℃以下时,再渐渐打开排气阀以解除余气,将试管取出。(4)从一支试管向另一支试管接种时应留意,接种环要在酒精灯________________(填“火焰的不充分燃烧层”或“火焰的充分燃烧层”)灭菌,并且待接种环________后蘸取菌种。【答案】(1)固体蛋白胨(2)灭菌消毒(3)高压蒸汽灭菌锅(4)火焰的充分燃烧层冷却13.某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A。探讨人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培育基,胜利筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。试验的主要步骤如图所示。请分析并回答下列问题。(1)培育基中加入化合物A的目的是____________,这种培育基属于________培育基。(2)目的菌生长所需的氮源和碳源是来自培育基中的________。试验须要振荡几次进行培育,由此推想目的菌的代谢类型是______________________。(3)转为固体培育基时,常接受平板划线的方法进行接种,在进行下一区域划线前要将接种环__________________。(4)探讨人员统计污水池中“目的菌”的总数,选用1×10-4、1×10-5、1×10-6倍稀释液进行涂布平板,每种稀释液都设置了3个培育皿。从设计试验的角度看,还应设置的一组比照试验是____________________________,设置此比照试验的目的是___________________________________________。(5)探讨人员接受平板划线法纯化水样中分别出的细菌。操作时,在其次次及以后的划线,总是从上一次划线的末端起先划线,这样做的目的是______________________________________。划线的某个平板培育后,第一划线区域的平行线上都不间断地长满了菌落,其次划线区域所划的第一条平行线上无菌落,其他平行线上有菌落。造成第一条平行线无菌落可能的操作失误有____________________________。(6)在示意图A和图B中,________表示的是用平板划线法接种培育后得到的结果。eq\o(\s\up7(),\s\do5(A))eq\o(\s\up7(),\s\do5(B))【答案】(1)筛选目的菌选择(2)化合物A异养需氧型(3)灼烧并冷却(4)不接种的空白培育基检验培育基制备过程中是否被杂菌污染(5)将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌落接种环灼烧后未冷却或划线未从第一划线区域末端起先(6)A【解析】(1)培育基中加入化合物A是为分解化合物A的微生物供应碳源和氮源,分别出能分解化合物A的微生物;这种培育基从功能上分属于选择培育基。(2)分析培育基的配方可知,该培育基由化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制而成,因此化合物A为目的菌供应了碳源和氮源;目的菌是需氧微生物,因此在培

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